目的对复方三维右旋泛酸钙糖浆进行质量分析。方法采用高效液相色谱法对复方三维右旋泛酸钙糖浆中的烟酰胺进行定量分析,C18柱（4.6mm×150mm,5μm）,流动相:0.01mol·L-1硫酸钠溶液（用稀硫酸调pH 4.0）-乙腈（98∶2）;流速:1.0mL·min-1;检测波长262nm,进样量20μL。结果烟酰胺浓度在0.0089～0.1337mg·mL-1范围内线性关系良好,r=0.9999（n=6）;加样平均回收率为99.58%（n=9）。结论本方法专属性强、准确可靠、灵敏度高、简便稳定,可用于烟酰胺的质量控制

吴越

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定量分析复方三维右旋泛酸钙糖浆中的烟酰胺的含量吴 越( 厦门大学附属第一医院药学部 厦门 361000)摘要: 目的 对复方三维右旋泛酸钙糖浆进行质量分析。方法 采用高效液相色谱法对复方三维右旋泛酸钙糖浆中的烟酰胺进行定量分析，C18柱( 4. 6mm ×150mm，5μm) ，流动相: 0. 01mol·L －1硫酸钠溶液( 用稀硫酸调 pH 4. 0) -乙腈( 98∶ 2) ; 流速: 1. 0mL·min －1 ; 检测波长 262nm，进样量 20μL。结果 烟酰胺浓度在 0. 0089 ～ 0. 1337mg·mL －1范围内线性关系良好，r = 0. 9999( n = 6) ; 加样平均回收率为 99. 58% ( n = 9) 。结论 本方法专属性强、准确可靠、灵敏度高、简便稳定，可用于烟酰胺的质量控制。关键词: 复方三维右旋泛酸钙糖浆; 烟酰胺; HPLC中图分类号: R927 文献标识码: A 文章编号: 1006-3765( 2019) -03-04033-0051-03作者简介: 吴 越，女( 1988 － ) 。毕业于福建中医药大学。现于厦门大学附属第一医院药学部工作。Content Determination of Nicotinamide in Compound Trivitamin and Calci-um Pantothenate Syrup by HPLCWU Yue( The First Affiliated Hospital of Xiamen University，Faculty of Medicine，Xiamen 361000，China)ABSTRACT: OBJECTIVE A method was established to determine the content of nicotinamide in CompoundTrivitamin and Calcium Pantothenate Syrup by HPLC. METHODS An Aichrombond C18 column ( 4. 6 × 150mm，5μm) was used. The mobile phase consists of sodium sulfate solution ( adjusted to pH4. 0 with 1mol·L －1 sulfateacid) -acetonitrile ( 98 ∶ 2 ) . The flow rate was 1. 0mL · min －1 and the detection wavelength was set262nm. RESULTS There was a good linear relationship for nicotinamide within the range of 0. 0089 － 0. 1337mg·mL －1 ( r = 0. 9999) . The Adding sample average recovery rate was 99. 58% with RSD 0. 4( n = 9) . CONCLUSIONThe method is convenient，sensitive，accurate and reproducible. It can be used to control the quality of CompoundTrivitamin and Calcium Pantothenate Syrup.KEY WORDS: Compound Trivitamin and Calcium Pantothenate Syrup; Nicotinamide; HPLC烟酰胺又称尼克酰胺 ( Nicotinamide) ，简称 VB3 或 NSA，微毒，LD50 : 2500 ～ 3500mg· kg－1 ( 大 鼠 皮 下 为 1700mg·kg －1 ) ，分子式 C6H6N2O，分子量 122. 13，结构( 见图 1) 。白色结晶性粉末，无臭，带苦味。干燥状态 50℃以下极稳定，与无机酸和碱一起加热，则水解成烟酸。易溶于丙酮、氯仿、丁醇等，溶于水〔1〕。烟酰胺( Nicotinamide，NAA) 是烟酸( Nicotinic acid，NA 或称维生素 B3 ) 的生理性活性酰胺成分。NA 在体内先转化为NAA，进而再转化为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 ( NAD，辅酶Ⅰ)和磷酸烟酰胺腺嘌呤二核苷酸( NADP，辅酶Ⅱ) ，它们是众多脱氧酶中的同工酶。与 NA 不同的是，NAA 对血压、脉搏和体温均无影响，也不会致畸〔1〕。烟酰胺参与机体多种氧化还原反应，医学上用于治疗糙皮病、口炎、舌炎、肝脏疾病及日光性皮炎〔2〕; 大剂量使用可降低胆固醇和甘油三酯，其生理作用与烟酸相仿，但水溶性较好，无明显扩张血管作用〔3〕。烟酰胺的过量摄入可引起红晕、皮肤搔痒、头痛等症状，1982 年起日本已禁止使用烟酰胺，并对其在食物中的含量十分关注。为了有效地监控烟酰胺这类成分在相关食品中的含量，建立图 1 烟酰胺结构式准确、有效、快速的测定方法显得十分必要〔4〕。1 材料1. 1 仪器 Agilent 1200 高效液相色谱 仪 ( G1322A 脱 气 机，G1313A自动进样器，G1314A UV 检测器) 、Ver0801 chemistation 色谱工作站。1. 2 试药 烟酰胺对照品 ( 来源:中检所，批号: 100115-200302) ; 复方三维右旋泛酸钙糖浆( 批号: 050803、050804、050805) ; 乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。2 方法2. 1 含量测定2. 1. 1 色谱条件与系统适用性试验: 色谱柱: Agilent TC C18柱( 4. 6mm × 150mm，5μm) ; 流动相: 0. 01mol·L －1 硫酸钠溶液( 用稀硫酸调 pH 4. 0 ) -乙腈( 98∶ 2 ) ; 流速: 1. 0mL·min －1 ;检测波长 262nm，进样量 20μL。理论板数按烟酰胺计不低于3500，烟酰胺主峰与相邻峰的分离度符合要求。2. 1. 2 波长的选择: 取烟酰胺，加流动相制成每 1mL 中含·15·Strait Pharmaceutical Journal Vol 31 No. 3 201920μg 的溶液，照分光光度法，在 200nm ～ 400nm 波长范围内扫描，结果在 262nm 波长处又最大吸收，确定 262nm 波长为测定波长。烟酰胺紫外扫描图谱( 见图 2) 。图 2 烟酰胺紫外扫描图谱2. 1. 3 对照品溶液的制备: 精密称取烟酰胺对照品约 11mg，置于 250mL 容量瓶中，加流动相溶解并稀释定容至刻度( 每1mL 约含烟酰胺 44μg) ，作为对照品溶液。2. 1. 4 供试品溶液的配制: 取样品 15g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加水 25mL，振摇 20min，移入 100mL 量瓶中，锥形瓶用适量水洗涤，洗液并入量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。2. 2 专属性试验 取上述配制好的对照品溶液和样品溶液，并按处方配制除烟酰胺以外的其他成分和辅料制成阴性溶液，按上述选定的方法进行测定，色谱图显示样品溶液出现一个主峰与对照品主峰的保留时间一致，该主峰与相邻峰的分离度良好，阴性溶液在烟酰胺的主峰位置没有出现其他的杂质峰，说明此方法可避免其他成分和辅料的干扰，可用于复方三维右旋泛酸钙糖浆中烟酰胺的含量测定( 见图 3) 。2. 3 线性关系考察 精密称取烟酰胺对照品 22. 31mg，置于50mL 量瓶中，加水适量，使其溶解，再加水定容至刻度，摇匀，精密量取 1. 0mL，3. 0mL，5. 0mL，8. 0mL，10. 0mL，分 别 置 于50mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。按上述色谱条件分别进行测定，记录色谱图，以峰面积 A 为纵坐标，以浓度 C( mg·mL －1 ) 为横坐标，得回归方程为: A =28660C － 19. 584，r= 0. 9999，结果表明烟酰胺在 0. 0089 ～ 0. 1337mg·mL －1 范围内线性关系良好。2. 4 精密性试验 精密吸取含量测定项下第二批样品的第一份溶液，重复进样 6 次，1 次 20μL，以烟酰胺峰面积计算，RSD 为 0. 2%。2. 5 重复性试验 精密称取样品，按含量测定项下样品取样量的 80%、100%、120% 各取样三份，照含量测定项下的方法进样测定( n = 9) ，进样量为 20μL，结果样品 RSD 为 0. 4%。2. 6 稳定性试验 取复方三维右旋泛酸钙糖浆的供试品溶液，分别在 0，2，5，6，8，12，24h 进样，依法测定，以烟酰胺的峰面积计算，RSD 为 0. 7%，表明样品溶液在正常储藏下 24h 内稳定。图 3 复方三维右旋泛酸钙糖浆中烟酰胺的 HPLC 图A: 烟酰胺对照品; B: 复方三维右旋泛酸钙糖浆样品; C: 空白辅料2. 7 加样回收率试验 精密称取含量为 99. 03%，批号为006001A 的样品三份，约为 7. 5g，置于 50mL 容量瓶中，加水少量溶解; 再精密称取烟酰胺对照品 21. 81mg，置于 50mL 容量瓶中，定容至刻度，摇匀。分别精密吸取此对照品溶液2mL，3mL，3mL 至样品溶液中，加水定容至刻度，摇匀，照含量测定项下的方法进样测定( n = 9) ，进样量为 20μL。结果 RSD为 0. 4%。2. 8 空白回收率试验 ①按处方量加入除烟酰胺以外的其余样品成分，配成 1000g 的溶液，作为空白样品溶液; ②精密称取样品约 15g，置于 50mL 容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀; 精密称取约 15g 的①号溶液 9 份，置于 50mL 的容量瓶中，分别加入 4mL，5mL，6mL 的②号溶液各三份，加水定容至刻度，摇匀，按含量测定项下的方法进样测定，求得样品 RSD 分别为 0. 3%。2. 9 耐用性试验 用 Agilent TC C18 柱 ( 4. 6mm × 150mm，5μm) 色谱柱和 Waters C18 ( 4. 6mm × 250mm，5μm) ，理论板数均不低于 3500，保留时间与分离度均符合要求，本法具有良好的耐用性( 见表 1) 。·25·海峡药学 2019 年 第 31 卷 第 3 期表 1 色谱柱比较型号 流动相比例( 缓冲液∶乙腈)保留时间( min)理论板数拖尾因子Agilent TC C18柱( 4. 6mm ×150mm，5μm)98∶2 14. 391 12012 1. 2Waters C18( 4. 6mm ×250mm，5μm)98∶2 14. 391 17666 1. 23 实验结果供试品溶液: 取三个不同批号的样品各两份，约 15g，置于 50mL 容量瓶中，定容稀释至刻度，作为供试品溶液。取上述配制好的对照品溶液和维生素 B1、维生素 B6 含量测定项下的供试品溶液( 30g→100mL) 各 20μL 注入液相色谱仪，按外标法以峰面积计算( 见表 2) 。表 2 含量测定W( g) A F F平均RSD( % )含量( % )平均含量( % )0. 01168 1332. 10 3. 50374E-081332. 28 3. 50326E-08 3. 5052E-08 0. 10. 01233 1405. 64 3. 50521E-081404. 29 3. 50858E-0814. 9473 1214. 65 98. 901217. 26 99. 1214. 9226 1213. 15 98. 94 99. 031215. 61 99. 1414. 9645 1160. 97 94. 421162. 93 94. 5815. 0576 1166. 99 94. 33 94. 391165. 87 94. 2414. 9569 1218. 74 99. 171221. 28 99. 38 99. 2814. 9897 1222. 39 99. 251223. 03 99. 304 讨论4. 1 流动相的选择 由于本品成分复杂，干扰组分多，因此流动相的选择非常关键，且流动相的比例也会影响峰形及分离度，经实验研究，选用了以 0. 01mol·L －1 硫酸钠溶液( 用稀硫酸调 pH 4. 0) -乙腈( 98∶ 2) 为流动相。结果显示在此流动相下各成分峰的峰形及分离度均较好。4. 2 流动相的 pH 流动相的酸碱度对色谱图的峰形影响较大，经实验，选择 pH 4. 0，在此条件下所得到的峰形好，且能与该复方制剂中的其他成分较好地分离。在查阅文献时发现，在测定复方三维右旋泛酸钙糖浆中烟酰胺的含量时，曾采用 1mol·L －1 的硫酸调节流动相 pH，而本文采用的是稀硫酸，使得 pH 值变化不会太大，便于控制。4. 3 复方三维右旋泛酸钙糖浆的成分复杂，需对样品进行前处理。讨论采用振摇或超声处理，但考虑到超声溶出的干扰成分较多，故采用振摇溶解样品。4. 4 本文做了加样回收及空白回收两项回收率试验，结果都证明烟酰胺在此方法下所测得的含量符合要求。4. 5 色谱柱比较 本实验用 Agilent C18 和 Waters C18 两种色谱柱测定主成分峰的理论板数及与相邻峰的分离度。结果表明，在两种色谱柱条件的情况下，烟酰胺的峰形及分离度均较好。参考文献〔1〕李峰 . 国内外烟酸 /烟酰胺的发展动态 ( 一) 〔J〕. 甲醛与甲醇，2004，5: 1-6.〔2〕顾有守 . 烟酰胺在皮肤科的应用及展望〔J〕. 岭南皮肤性病科杂志，2008，15( 4) : 251-252.〔3〕靲培英 . 烟酰胺在皮肤病中的应用〔J〕. 国外医学皮肤性病学分册，1997，23( 3) : 139-141.〔4〕马永建，冯芳 . 离子对反相高效液相色谱同时测定饮品中 Vpp，VB6 及咖啡因含量〔J〕. 江苏预防医学，2000，11( 2) : 7-8.作者简介: 周 浩，男。学历: 本科。职称: 高级工程师。研究方向: 药物分析。通讯作者: 杨利红，女。学历: 博士研究生。职称: 主任药师。研究方向: 药物分析。E-mail: bjsnowman@ 126. com国家评价性抽验头孢氨苄甲氧苄啶制剂质量分析周 浩1，于 佳2，刘云飞1，王凌波1，杨利红2* ( 1. 正大天晴药业集团股份有限公司 南京 210023; 2. 黑龙江省食品药品检验检测所 哈尔滨 150088)摘要: 目的 评价国内不同厂家生产的头孢氨苄甲氧苄啶制剂的质量与存在问题分析。方法 以有关物质、溶出度、装量差异和含量测定为研究项目，采用法定检验方法结合探索性研究进行样品检验，统计分析头孢氨苄甲氧苄啶制剂的质量现状并进行评价。结果 227 批样品中有16 批样品不符合规定，不合格率为 7% ，不合格批次均为胶囊剂。结论 胶囊剂总体质量状况一般，不合格样品涉及的检验项目和生产厂家较多。现行的法定检验标准虽然基本可行，但仍存在一定缺陷。关键词: 头孢氨苄甲氧苄啶制剂; 国家评价性抽验; 质量分析中图分类号: R927 文献标识码: A 文章编号: 1006-3765( 2019) -03-04166-0053-04·35·Strait Pharmaceutical Journal Vol 31 No. 3 2019

定量分析复方三维右旋泛酸钙糖浆中的烟酰胺的含量

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