Afin de définir les mécanismes par lesquels les antigènes grand T des papovavirus induisent la recombinaison dans les cellules de mammifère, nous avons construit deux lignées cellulaires permettant d'étudier la recombinaison homologue entre un tandem tête-à-queue de gènes T moyen du virus du polyome inactifs pour la transformation néoplasique. Ces lignées ont été nommées Hy2 et Hy5. Une recombinaison homologue entre les séquences répétées de T moyen devrait restaurer un gène intact capable de transformer la cellule. La reconstitution d'un gène T moyen fonctionnel par recombinaison spontanée se produit avec un taux qui se situe entre 10-7 et 10-5 événement par génération cellulaire. Dans la lignée Hy2, la recombinaison reconstitue un gène T moyen entre les deux copies défectueuses du gène. Dans la lignée Hy5, la recombinaison spontanée se produit surtout entre les séquences plasmidiques de l'insert viral provoquant ainsi l'inversion d'un des gènes T moyen inactifs. Cette inversion augmente l'expression du gène défectueux et la surproduction d'antigène T moyen mutant transforme la cellule. L'introduction de l'antigène grand T du virus du polyome augmente de 10 000 à 1 000 000 de fois le taux de recombinaison dans les lignées Hy2 et Hy5. L'antigène grand T de SV40 induit aussi une recombinaison à haute fréquence en dépit du fait qu'il ne puisse pas initier la synthèse de l'ADN à l'origine de réplication du virus du polyome. Des mutants de l'antigène grand T du virus du polyome inactifs pour l'initiation de la réplication virale provoquent également une recombinaison de l'insert viral dans les deux lignées. Mes résultats montrent que la recombinaison est indépendante des fonctions réplicatives de grand T et ne nécessite pas l'amplification des séquences virales. La restauration d'un gène T moyen n'est donc pas le résultat du modèle de la structure en pelure d'oignon. Dans la lignée Hy2, nous proposons que la recombinaison reconstitue un gène T moyen intact entre les deux copies défectueuses par des mécanismes de "slipped-strand mispairing" et d'échange inégal au niveau de l'insert. Dans la lignée Hy5, la restauration d'un gène T moyen intact est plutôt le résultat d'échange inégal entre chromatides-soeurs, de conversion génique et d'événements de recombinaison complexes. Un de ces événements mène à la perte d'un fragment acentrique et la formation d'un chromosome dicentrique. Mes résultats permettent de mieux comprendre comment l'antigène grand T induit la formation d'aberrations chromosomiques dans des cellules transformées. Finalement, je discute d'une relation possible entre le degré de méthylation d'une région d'ADN et son influence sur l'efficacité de recombinaison homologue dans les cellules de mammifère
