La Reserva Natural Estricta Otamendi (RNEO) conserva una importante extensión de pastizales y zonas boscosas con vegetación nativa. En el presente trabajo, se presenta la primera lista de especies de dípteros caliptrados de la Reserva. Se registraron 56 especies y 33 géneros pertenecientes a siete familias (Anthomyiidae, Calliphoridae, Fanniidae, Muscidae, Rhinophoridae, Sarcophagidae y Tachinidae). Se citan, por primera vez para la Argentina, Anthomyia aurifacies (Albuquerque) (Anthomyiidae), Myospila fluminensis Couri & Lopes (Muscidae) y el género Thomazomyia (Sarcophagidae). Además, se registran por primera vez para la provincia de Buenos Aires 4 especies de Fanniidae, 4 de Muscidae y 3 de Sarcophagidae. La diversidad fue mayor en el ambiente de bosque (44 especies) y las familias con mayor riqueza fueron Sarcophagidae (20 especies) y Muscidae (12 especies). Se registró un 20 % de nuevos taxones para la provincia.A list of species of Calyptratae is firstly disclosed in this work for Otamendi Reserve. This protected area contains a large area housing native species of grasses and woods. We recorded seven families of Calyptratae (Anthomyiidae, Calliphoridae, Fanniidae, Muscidae, Rhinophoridae, Sarcophagidae and Tachinidae) which include 56 species and 33 genera. Anthomyia aurifacies (Albuquerque) (Anthomyiidae), Myospila fluminensis Couri & Lopes (Muscidae) and the genus Thomazomyia (Sarcophagidae) are new records for Argentina. Four species of Fanniidae, 4 species of Muscidae and 3 species of Sarcophagidae are reported from Buenos Aires province for the first time. The richness was higher in the forest (44 species) and Sarcophagidae (20 species) and Muscidae (12 species) exhibited higher species richness than the remaining families. We registered 20% new taxa for the province.Facultad de Ciencias Naturales y Muse