Se determinó la actividad antimicrobiana de extractos y fracciones de diferentes polaridades de la especie vegetal Cuphea ciliata Ruiz y Pav. frente a microorganismos Gram (+) y Gram (-) por el método de difusión en gel por perforación en placa. Las pruebas de eficacia antimicrobiana exhibieron inhibición significativa en los extractos etanólicos

Bustos, Diana M.

Rodriguez, Oscar E.

Torrenegra, Ruben D.

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We determine the antimicrobial activity of extracts and fractions of different polarity
of the specie Cuphea ciliata Ruiz & Pav, againt microorganisms Gram (+) and Gram
(-) by the method of diffusion in gel with perforation in plates,. The tests of
antimicrobial efficiency show significant inhibition in the etanolic extracts.Se determinó la actividad antimicrobiana de extractos y fracciones de diferentes
polaridades de la especie vegetal Cuphea ciliata Ruiz & Pav. frente a
microorganismos Gram (+) y Gram (-) por el método de difusión en gel por
perforación en placa. Las pruebas de eficacia antimicrobiana exhibieron inhibición
significativa en los extractos etanólicos

Torrenegra, Rubén E.

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Actividad antimicrobiana de cuphea ciliata ruiz y pav. (lythraceae).

Universidad Tecnológica de Pereira: Open Journal Systems

Scientia et Technica Año XIII, No 33, Mayo de 2007. UTP. ISSN 0122-1701                                                                                                                      259  Fecha de Recepción: 15 Febrero de 2007 Fecha de Aceptación: 12 Marzo de 2007 ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE Cuphea ciliata Ruiz & Pav. (LYTHRACEAE)  RESUMEN Se determinó la actividad antimicrobiana de  extractos y fracciones de diferentes polaridades de la especie vegetal Cuphea ciliata Ruiz & Pav. frente a microorganismos Gram (+) y Gram (-) por el método de difusión en gel por perforación en placa. Las pruebas de eficacia antimicrobiana exhibieron inhibición significativa en los extractos etanólicos.  PALABRAS CLAVES: Cuphea ciliata, Lythraceae, etnobotánica, actividad antimicrobiana.  ABSTRACT  We determine the antimicrobial activity of  extracts and fractions of different polarity of the specie Cuphea ciliata Ruiz & Pav, againt microorganisms Gram (+) and Gram (-) by the method of diffusion in gel with perforation in plates,. The tests of antimicrobial efficiency show significant inhibition in the etanolic extracts.  KEYWORDS: Cuphea ciliata, Lythraceae, ethnobotany, antimicrobial activity     OSCAR E. RODRIGUEZ M.Sc.  Candidato a Doctorado en Ciencias Biológicas. Profesor Cátedra Universidad Javeriana oscar-rodriguez@javeriana.edu.co  RUBEN D. TORRENEGRA  Quìmico.  Profesor Titular , Director GIFUJ Pontificia Universidad Javeriana rtorrene@javeriana.edu.co  DIANA M. BUSTOS Licenciada en Biología Universidad Distrital dianamarcela26@gmail.com 1. INTRODUCCIÓN Cuphea ciliata Ruiz & Pav. perteneciente a la familia  Lythraceae, es una especie endémica colombiana, herbácea de un m de alto, bien ramificada con  hojas opuestas pecioladas (Figura 1); se encuentra distribuida en los departamentos de Cundinamarca y Boyacá y se le denomina popularmente como: “Moradita” por el color de sus flores;  es empleada en la medicina tradicional como astringente y en las enfermedades de  garganta, es muy usada para curar hinchazones e irritaciones, en infecciones urinarias y  enfermedades venéreas. [1]  Figura 1. Cuphea ciliata Ruiz & Pav. Tomado de: GUNNAR H. & LENNART A. Flora de Ecuador. Lythraceae by Alicia Leurteig  2. CONTENIDO  2.1 Parte experimental  La planta fue recolectada en el Cerro de la Punta  a una altitud de 2.700 m.s.n.m Municipio de Tenjo Cundinamarca, el ejemplar fue determinado taxonòmicamente en el Herbario Nacional de Colombia y registrado bajo el número COL 511466. El material                                                 [1] GARCIA H. Flora Medicinal de Colombia. Botánica Médica. Instituto de Ciencias Naturales U.N. 285-289 p. Bogota. D.E, 1974.  vegetal seco, molido y pesado (869.5g de hojas y 785.3g de tallos) se sometió a extracción en soxhlet, con los solventes Etrer de  Petróleo, AcOEt y EtOH. Los extractos obtenidos se concentraron  en un rotaevaporador, se fraccionaron por percolación  en columna cromatográfica empacada con Sílica Gel utilizando solventes de polaridad creciente (Eter de Petróleo, CH2Cl2, AcOEt, MeOH, EtOH-H2O). Los extractos etanolicos se fraccionaron por medio de cromatografía en fase reversa   RP-18.  Los microorganismos se seleccionaron teniendo en cuenta su facilidad de desarrollo en medios de cultivo convencionales y su empleo en ensayos de susceptibilidad a antibióticos. Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC 7002, Pseudomona aeruginosa ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 25923.  Cada una de las cepas se mantuvieron bajo refrigeración a 4 ºC, se sembraron por estrías en placas con (AMH) y se incubaron a 37ºC por 24 horas, al cabo de las cuales se tomó una colonia y se sembró en 5ml de caldo Mueller Hinton; se incubo a 37ºC por 18 horas, se realizaron resiembras sucesivas en el mismo caldo para asegurar que los microorganismos se encontraban en fase de crecimiento exponencial 107 y 108 UFC. Se  realizaron 5 perforaciones equidistantes de 6mm de diámetro sobre cajas de petri con  (AMH), con un hisopo se sembró el inoculó bacteriano sobre la superficie del agar  en 3 direcciones y el reborde de la placa, dejando secar por 5 minutos, luego se agregaron las muestras para análisis: En la perforación central el control (-) DMSO (50µl); en otra perforación  el control (+) (Cefalotina: E. coli, P. mirabilis, S. aureus; Ceftriaxona: P. aeuroginosa), y las tres concentraciones de Extractos y/o fracciones, en otras Scientia et Technica Año XIII, No 33, Mayo de 2007. UTP   260tres perforaciones; para ello se tomaron 40mg de extracto seco ó fracción y se diluyeron en 1ml de DMSO, obteniéndose una dilución principal de la cual se tomaron: 40µl  (1,6 mg/ml), 20µl  (0,8mg/ml) y 10µl (0,4mg/ml).  Se dejó en predifusión durante 30 minutos a temperatura ambiente, incubándose a 37ºC. A las 20 hrs, se realizaron medidas de los diámetros de inhibición. Se graficó el logaritmo natural (Ln) de las concentraciones de empleadas contra el cuadrado de los diámetros de inhibición (X2),   se ajusto por mínimos cuadrados y por extrapolación de la recta se halló el punto de intersección sobre la ordenada, valor que corresponde a la concentración critica (C.C.) expresada en µg/µl que representa una medida de la susceptibilidad de un microorganismo prueba. [3]  2.2 Resultados Se  evidenció  disminución del crecimiento bacteriano con los extractos etanólicos de hojas y tallos. (Tabla 1 Figura 2).  Extr. 3b (µg/µl) Microorganismos  C.C  Patrón 1600 800 400 E. coli 148 33mm 25mm 21mm 16mm P. mirabilis 134 35mm 30mm 25mm 20mm P. aeuroginosa 245 45mm 33mm 25mm 18mm S. aureus 200 35mm 27mm 33mm 15mm Tabla 1. Diámetros de inhibición de crecimiento en mm con el  extracto etanólico de hojas                      Figura 2. Actividad antimicrobiana del extracto etanólico de hojas frente a Escherichia coli (a) Pseudomona aeruginosa (b).  La concentración critica del extracto  Extr.3b  frente a E. coli  es igual a 148µg/µl;  (Figura 3).  0123456780 200 400 600 800X2 (mm)Ln concentracion Figura 3. Concentración Critica del Extr. 3b frente a Escherichia coli.                                                  [3] KONEMAN E. Diagnostico Microbiológico, Editorial Médica Panamericana, Argentina, 1999.  Se realizó una siembra múltiple de cada uno de los microorganismos de ensayo con una concentración de 1,6mg/ml para Extr.3b y una fracción obtenida de ella Fr. 3b1, se   determino así la inhibición del crecimiento de cada uno de los microorganismos desde el centro hacia la periferia, tal como se muestra en la figura 4.     a                       b Figura 4. Siembra múltiple por estrías de los microorganismos de ensayo con  extractos Extr. 3b (a) Fr. 3b1 (b).  2. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES  Teniendo en cuenta los resultados se puede concluir  que los extractos etanólicos, de la especie vegetal  Cuphea ciliata Ruiz & Pav,  presentan actividad antibacterial significativa frente a microorganismos causantes de varias infecciones urinarias tomando como referencia cefalosporinas de amplio espectro antimicrobiano; lo anterior nos conduce a sugerir futuras investigaciones para identificar el principio activo responsable de dicha actividad y otros estudios como son actividad citotóxica, actividad antioxidante, actividad antiinflamatoria  y actividad antiparasitaria.  4. BIBLIOGRAFÍA   [1] GARCIA H. Flora Medicinal de Colombia. Botánica Médica. Instituto de Ciencias Naturales U.N. 285-289 p. Bogota. D.E, 1974.  [2] GRAHAM, S. A. Gall Makers on Flowers of Cuphea (Lythraceae). Biotropica. 1995.  [3] KONEMAN E. Diagnostico Microbiológico, Editorial Médica Panamericana, Argentina, 1999. [4] SANABRIA Antonio, Actividad Antimicrobiana In Vitro de Angiospermas Colombianas. Revista Colombiana de Ciencias Químico-Farmacéuticas. No. 27.1998. 

Actividad antimicrobiana de cuphea ciliata ruiz y pav. (lythraceae)

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