Los modelos de neoplasias hematológicas murinas pueden homologarse a las humanas dadas similitudes anatómicas, inmunológicas y genéticas entre ambas especies, constituyendo una valiosa herramienta para conocer su fisiopatogenia y ensayar nuevas modalidades terapéuticas. Los linfomas murinos pueden desarrollarse espontáneamente o inducirse por radiaciones, retrovirus, químicos o ingeniería genética. Se presentan las características de un linfoma que ha logrado ser establecido como modelo experimental a partir del hallazgo fortuito de un linfoma espontáneo en un ratón de la cepa Balb/c.Facultad de Ciencias Médica

Bergna, Cecilia

González, Pedro Horacio

Maíz, M.

Ponzinibbio, Carlos

Schiffrin, E.

Spanish

El Servicio de Difusión de la Creación Intelectual

DESARROLLO DE UN MODELO MURINO DE LINFOMA
Bergna C., González P.H., Maíz M.,Schiffrin E., Ponzinibbio C.
Cátedra de Patología B 
 cbergna@live.com.ar
Introducción
Los modelos de neoplasias hematológicas murinas pueden homologarse a las humanas dadas similitudes  
anatómicas, inmunológicas y genéticas entre ambas especies, constituyendo una valiosa herramienta 
para conocer su fisiopatogenia y ensayar nuevas modalidades terapéuticas. Los linfomas murinos pueden 
desarrollarse espontáneamente o inducirse por radiaciones, retrovirus, químicos o ingeniería genética. Se 
presentan las características de un linfoma que ha logrado ser establecido como modelo experimental a 
partir del hallazgo fortuito de un linfoma espontáneo en un ratón de la cepa Balb/c.
Objetivos
Desarrollo del modelo experimental de linfoma murino, caracterización histológica e inmunofenotípica.
Metodología Aplicada
Del hallazgo de un linfoma espontáneo en un ratón de la cepa Balb/c, se obtuvieron células neoplásicas 
provenientes de sus ganglios linfáticos inguinales, axilares y cervicales y se procesaron por atrición 
7
mecánica y filtrado por malla metálica. De la suspensión celular obtenida, se inocularon 3x10        
células nucleadas por vía intraperitoneal a ratones machos endocriados de la misma cepa. El modelo se 
mantuvo mediante pasajes sucesivos a ratones sanos que fueron mantenidos en condiciones de 
esterilidad hasta el desarrollo de adenomegalias visibles y palpables. Este protocolo fue aprobado por el 
Comité Institucional del Cuidado de Animales de Laboratorio de la Facultad de Medicina de la UNLP. Se 
determinaron características clínicas y la sobrevida mediante análisis de Kaplan Meier. Se caracterizó su 
histología en cortes parafinados teñidos con hematoxilina-eosina y se realizó el análisis morfométrico 
citohistológico de impronta ganglionar teñida con May Grundwald-Giemsa. Asimismo, se analizó la 
expresión inmunofenotípica del linfoma en muestras parafinadas de ganglio linfático mediante 
inmuhistoquímica utilizando los anticuerpos monoclonales murinos anti CD45R-B220 de rata, como 
marcador linfoide B, y anti-CD3e épsilon de conejo (ThermoFischer Scientific), como marcador linfoide T. 
Según validaciones previas todos estos anticuerpos reaccionan con antígenos murinos. Finalmente, las 
imágenes fueron digitalizadas con el escáner NanoZoomer (Hamamatsu).
Resultados
Los animales desarrollaron adenomegalias generalizadas, esplenomegalia, anemia y erizamiento del pelo 
desde la primer semana de inoculación. En fases avanzadas aparecieron alteraciones del 
comportamiento, postura y signos neurológicos.  La mediana de sobrevida de los ratones que 
desarrollaron el linfoma fue de 25 días, con un rango entre 20 y 29 días. 
En la necropsia se evidenciaron adenomegalias generalizadas y esplenomegalia con presencia de 
punteado blanquecino con tendencia a la coalescencia. Otros parénquimas hígado, riñones, timo se 
afectaron de forma variable haciéndose visibles por agrandamiento difuso del órgano en cuestión. En 
algunos animales se observaron masas tumorales retroperitoneales. 
El análisis morfométrico reveló la presencia de poblaciones celulares de pequeño y mediano tamaño 
2
(promedios de diámetro 8,96 µm y área celular 76,74 µm ), con escaso citoplasma basófilo agranular, 
núcleos indentados de cromatina laxa y nucléolos centrales de aspecto linfoblástico. La ocupación 
histológica demostró afectación difusa en ganglio linfático (100%), bazo (70%) y de médula ósea (100%) 
con afectación focal perivascular en órganos no linfoides (hígado, riñón, sistema nervioso). Se observaron 
aproximadamente 25 figuras mitóticas por campo grande de 400x. La presencia de células atípicas 
circulantes fue variable. La expresión de CD3 fue intensa y difusa en toda la estructura ganglionar  mientras 
que la expresión de CD45R/B220fue débil y limitada a parches periféricos.
Conclusiones
Se presenta un modelo establecido de linfoma murino de células T, de desarrollo espontáneo y 
comportamiento clínico agresivo, conformadas por células de pequeño y mediano tamaño y alto índice 
mitótico. El mismo presentó compromiso difuso en órganos linfoides y afectación focal en órganos no 
linfoides, con presencia inconstante de células atípicas en sangre periférica.
Diciembre 2016 | Vol 6 Nº5
2016 Diciembre, 6(5): 1-1


Desarrollo de un modelo murino de linfoma

Servicio de Difusión de la Creación Intelectual

DESARROLLO DE UN MODELO MURINO DE LINFOMABergna C., González P.H., Maíz M.,Schiffrin E., Ponzinibbio C.Cátedra de Patología B  cbergna@live.com.arIntroducciónLos modelos de neoplasias hematológicas murinas pueden homologarse a las humanas dadas similitudes  anatómicas, inmunológicas y genéticas entre ambas especies, constituyendo una valiosa herramienta para conocer su ﬁsiopatogenia y ensayar nuevas modalidades terapéuticas. Los linfomas murinos pueden desarrollarse espontáneamente o inducirse por radiaciones, retrovirus, químicos o ingeniería genética. Se presentan las características de un linfoma que ha logrado ser establecido como modelo experimental a partir del hallazgo fortuito de un linfoma espontáneo en un ratón de la cepa Balb/c.ObjetivosDesarrollo del modelo experimental de linfoma murino, caracterización histológica e inmunofenotípica.Metodología AplicadaDel hallazgo de un linfoma espontáneo en un ratón de la cepa Balb/c, se obtuvieron células neoplásicas provenientes de sus ganglios linfáticos inguinales, axilares y cervicales y se procesaron por atrición 7mecánica y ﬁltrado por malla metálica. De la suspensión celular obtenida, se inocularon 3x10        células nucleadas por vía intraperitoneal a ratones machos endocriados de la misma cepa. El modelo se mantuvo mediante pasajes sucesivos a ratones sanos que fueron mantenidos en condiciones de esterilidad hasta el desarrollo de adenomegalias visibles y palpables. Este protocolo fue aprobado por el Comité Institucional del Cuidado de Animales de Laboratorio de la Facultad de Medicina de la UNLP. Se determinaron características clínicas y la sobrevida mediante análisis de Kaplan Meier. Se caracterizó su histología en cortes paraﬁnados teñidos con hematoxilina-eosina y se realizó el análisis morfométrico citohistológico de impronta ganglionar teñida con May Grundwald-Giemsa. Asimismo, se analizó la expresión inmunofenotípica del linfoma en muestras paraﬁnadas de ganglio linfático mediante inmuhistoquímica utilizando los anticuerpos monoclonales murinos anti CD45R-B220 de rata, como marcador linfoide B, y anti-CD3e épsilon de conejo (ThermoFischer Scientiﬁc), como marcador linfoide T. Según validaciones previas todos estos anticuerpos reaccionan con antígenos murinos. Finalmente, las imágenes fueron digitalizadas con el escáner NanoZoomer (Hamamatsu).ResultadosLos animales desarrollaron adenomegalias generalizadas, esplenomegalia, anemia y erizamiento del pelo desde la primer semana de inoculación. En fases avanzadas aparecieron alteraciones del comportamiento, postura y signos neurológicos.  La mediana de sobrevida de los ratones que desarrollaron el linfoma fue de 25 días, con un rango entre 20 y 29 días. En la necropsia se evidenciaron adenomegalias generalizadas y esplenomegalia con presencia de punteado blanquecino con tendencia a la coalescencia. Otros parénquimas hígado, riñones, timo se afectaron de forma variable haciéndose visibles por agrandamiento difuso del órgano en cuestión. En algunos animales se observaron masas tumorales retroperitoneales. El análisis morfométrico reveló la presencia de poblaciones celulares de pequeño y mediano tamaño 2(promedios de diámetro 8,96 µm y área celular 76,74 µm ), con escaso citoplasma basóﬁlo agranular, núcleos indentados de cromatina laxa y nucléolos centrales de aspecto linfoblástico. La ocupación histológica demostró afectación difusa en ganglio linfático (100%), bazo (70%) y de médula ósea (100%) con afectación focal perivascular en órganos no linfoides (hígado, riñón, sistema nervioso). Se observaron aproximadamente 25 ﬁguras mitóticas por campo grande de 400x. La presencia de células atípicas circulantes fue variable. La expresión de CD3 fue intensa y difusa en toda la estructura ganglionar  mientras que la expresión de CD45R/B220fue débil y limitada a parches periféricos.ConclusionesSe presenta un modelo establecido de linfoma murino de células T, de desarrollo espontáneo y comportamiento clínico agresivo, conformadas por células de pequeño y mediano tamaño y alto índice mitótico. El mismo presentó compromiso difuso en órganos linfoides y afectación focal en órganos no linfoides, con presencia inconstante de células atípicas en sangre periférica.Diciembre 2016 | Vol 6 Nº52016 Diciembre, 6(5): 1-1

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