Orientador : Manasses Claudino FontelesTese (doutorado) - Universidade Estadualde Campinas, Faculdade de Ciencias MedicasResumo: Este trabalho objetivou avaliar os efeitos nefrotóxicos do veneno de Bothrops jararaca cuja importância se deve a alta frequência dos acidentes ofídicos,que constituem mn sério problema de saúde pública em nossopaís. Omodeloexperimental utilizado foio sistema de perfusão de rim isolado de rato para evitar a interferência de outros fatores sistêmicos.
A análise dos parâmetros funcionais renais foi realizada em perfusões
com solução de Krebs-Henseleit modificada, sendo escolhida a concentração de 6g% de albumina, por apresentar melhores parâmetros quando comparados a outras preparações com 2 e 4g%.Os parâmetros estudados foram: pressão de perfusão (PP), resistência vascular renal (RVR),fluxo urinário (FU), ribno de filtração gromerular (RFG), transporte de sódio (TNa+), transporte de potássio (TJ<:f'), clearance de água livre (CH2Ü),transporte proximal de sódio (pTNa+) , transporte distal de sódio(dTNa+). Os grupos controle se mantiveram constantes durante todo o experimento e apresentaram os seguintes parâmetros: PP=149,17:t 4,03 mmHg, RVR-6,38 :t 0,68 'mmHgImrl.g-l.min -I; FU-O,26:t:0,005ml-l.g-l.min -I; Rro-l,13 :t 0,21mr l.g-l.min -I; TNa+-136,13:t 28,681J.Eq.g-l.min 1;%TNa+-78,53:t1,91. Nos grupos tratados pelo veneno lOJ1glml)obselVamos,aos 30 minutos de perfusão, a diminuição acentuada destes parâmetros em decoITênciado efeito nefrotóxico, com os seguintes dados: PP=I00,50 :t 10,81 mmHg.ml-l.g-l.min-l (45%);RVR-3,92 :t 0,47 mmHglml-l.g-l.min -I (31,10%);FU-0,02 :t 0,05 ml-l.gl. min -1 85%),RFG=O,06:!:0,02 rnl-l.g-l.min -1 (90%);TNa+=5,30:!:2,73 JiEq.g'"
l.min -1(90%).Os dados estatísticos expressama média e o erro padrão da média. Na tentativa de bloquearestes efeitos tóxicos,utilizamoso BN52021e
WEB2086,duas drogas antagonistas do PAF (fator ativador de plaquetas). O BN 52021não apresentou proteção aos efeitos t6xicosdoveneno,exceto o fato de evitar a diminuição de sódio e potássio tissulares, obselV8dacom o uso isolado da peçonha.OWEB 2086além de impedir a diminuiçãodo fluxo urinário e do ribno de filtração glomerular causados pelo veneno, elevou estes parâmetros em relação ao controle, embora a pressão d~ perfusão continuasse baixa. Os outros parâmetros CH~, dTNa+ e %dTNa+ se apresentaram negativos quando comparados ao controle e ao uso isolado do veneno. A outra substância utilizada foi a indometacina que promoveu
antagonismototal aos efeitos tóxicos do veneno no fluxo urinârio, ritmo de
-vifiltração glomerular, resistência vascular renal e bloqueio parcial da pressão de perfusão. A peçonha produziu diminuição de s6dio e potássio teciduais, sendo estes efeitosbloqueadospeloBN52021, WEB2086e Indometacina. Comesta técnica empregada dispomos de um modelo para o estudo de efeitos tóxicos direto de drogas sobre o rim. Podemos concluir que o veneno de Bothrops jllraraca produz alterações de FU, RFG, RVR, PP, TNa+, TK+ e %TK+, com diminuiçãode sódio e potássio no tecido renal, levando a um quadro compatível à insuficiência renal aguda. No estudo histopatológicodos rins, obselvamos que os grupos controle e tratado comoveneno, apresentaram moderada dilatação e tumefação de túbulos
provavelmente decon-ente da técnica utilizada de perfusão com presença de albumina no líquido perfusor. Nos grupos tratados com o veneno detectamos maior intensidade de material proteico nos lúmens tubulares e nos espaços uriníferos dos glomérulos. Outro achado foi a necrose de células tubulares em dois dos rins perfundidoscom o veneno.Abstract: This work evaluates nephrotoxic efTects of the venom of Botluvps
jarll/'8ca , a snake responsible formany snake bite accidents in the Northeast or This work evaluates nephrotoxic efTects of the venom of Botluvps jarll/'8ca , a snake responsible formany snake bite accidents in the Northeast or Brazil and thus is an important public health problem in our counhy. The model used was the isolated perfused rat kidney. Weused a modified Krebs-Henseleit solution with added albmnin at 6g% whichproducedmore reliable than albumin concentrations or 2 and 4g%.
The parameters studied were: perfusion pressure (PP), renal vascular
resistance (RVR), urinary fiow (UF), glomerular filtration rate (GFR), sodium
transport (TNa+), potassium transport (TK+), free water clearance (CH20),
proximal transport of sodi':ffil(pTNa+)and distal transport of sodium(dTNa+).
The results for the control group were: PP=149,17 :I: 4,03 mmHg,
RVIt-6,38 :t: 0,68 nUl1Hg/ml-1.g-1.min -1; UFaO,26 :t: 0,005 mt1.g-1.min -I;
GFIV=I,13 :I: 0,21 mtl.g-l.min -1; TNa+= 136,13 :I: 28,68 ~Eq.g'"I.min-1;
%TNa+a78,53:t:1,91. In the kidneys treated by the venom (lOmg/ml)we observed, at 30 min or perfusion,a markeddecreasein these arameters:PP=100,50:I:10,81mmHg.mt 1.g-1.min-1 (45%); RV1V=3,92t 0,47 mmHglmrl.g-1.min-1(31,10%);UF=0,02:t: 0,05 mr1.g-1.min -1 (85%),GF1t-0,06t 0,02 mr1.g-1.min -1 (90%);TNa+.5,30 t 2,73 ~Eq.g'"I.min-1 (90%).
In an attempt to block these toxicefTectswehave used BN52021andWEB
2086,two drugs which are platelet activating faetor (PAF) antagunists. BN 52021 did not proteet against the toxic efTectsor the venom, except in block.ingthe decrease in sodimn and potassium in the tissues. WEB2086blocked the urinaIJ' fiow and GFR changes by the venom and even elevated these parameters in relation to the controls. The perfusionpressure was not reversed. CH20, dTNa+ and %dTNa+ alI presented negative values when compared to controls. We also found that indomethacin antagonized the toxic efTectsof the venom foundin UF,GFR,RVR,and partially blocked PP. The venom also produced a decn:ase in tissue Na+ and K+,which in tum blockedbyBN52021,WEB2086and indometbacin. Histopathological study revealed that in both groups, treated and untreated by the venom, there was a tubular dilatation and tumefaction. These efTeetscould be the result of the perfusion itself. However,in the groups treated -with the venom we fOWldgreater amoWlts of protein inside the tubules and in the glomendar spaces. We also fOWlda tubular necrosis in two kidneys. With this technique we now have a model to study nephrotoxic drugs. We
conclude that the venom produces significant alterations of UF, GFR, RVR, PP, TNa+, %TNa+ and %TK+,with a decrease in levels of tissue Na+ and K+. Brazil and thus is an important public health problem in our counhy.
The model used was the isolated perfused rat kidney. Weused a modified Krebs-Henseleit solution with added albmnin at 6g% whichproducedmore reliable than albumin concentrations or 2 and 4g%. The parameters studied were: perfusion pressure (PP), renal vascular resistance (RVR), urinary fiow (UF), glomerular filtration rate (GFR), sodium transport (TNa+), potassium transport (TK+), free water clearance (CH20), proximal transport of sodi':ffil(pTNa+)and distal transport of sodium(dTNa+).
The results for the control group were: PP=149,17 :I: 4,03 mmHg,
RVIt-6,38 :t: 0,68 nUl1Hg/ml-1.g-1.min -1; UFaO,26 :t: 0,005 mt1.g-1.min -I;
GFIV=I,13 :I: 0,21 mtl.g-l.min -1; TNa+= 136,13 :I: 28,68 ~Eq.g'"I.min-1;
%TNa+a78,53:t:1,91. In the kidneys treated by the venom (lOmg/ml)we observed, at 30 min or perfusion,a markeddecreasein these arameters:PP=100,50:I:10,81mmHg.mt 1.g-1.min-1 (45%); RV1V=3,92t 0,47 mmHglmrl.g-1.min-1(31,10%);UF=0,02:t:
0,05 mr1.g-1.min -1 (85%),GF1t-0,06t 0,02 mr1.g-1.min -1 (90%);TNa+.5,30 t
2,73 ~Eq.g'"I.min-1 (90%). In an attempt to block these toxicefTectswehave used BN52021andWEB 2086,two drugs which are platelet activating faetor (PAF) antagunists. BN 52021 did not proteet against the toxic efTectsor the venom, except in block.ingthe decrease in sodimn and potassium in the tissues. WEB2086blocked the urinaIJ' fiow and GFR changes by the venom and even elevated these parameters in relation to the controls. The perfusionpressure was not reversed. CH20, dTNa+ and %dTNa+ alI presented negative values when compared to controls. We also found that indomethacin antagonized the toxic efTectsof the venom foundin UF,GFR,RVR,and partially blocked PP. The venom also produced a decn:ase in tissue Na+ and K+,which in tum
wasblockedbyBN52021,WEB2086and indometbacin. Histopathological study revealed that in both groups, treated and untreated by the venom, there was a tubular dilatation and tumefaction. These efTeetscould be the result of the perfusion itself. However,in the groups treated -viiiwith
the venom we fOWldgreater amoWlts of protein inside the tubules and in the
glomendar spaces. We also fOWlda tubular necrosis in two kidneys.
With this technique we now have a model to study nephrotoxic drugs. We
conclude that the venom produces significant alterations of UF, GFR, RVR, PP, TNa+, %TNa+ and %TK+,with a decrease in levels of tissue Na+ and K+.DoutoradoDoutor em Medicin
