Avaliação da expressão gênica de tecidos intestinais neoplásicos de ratos tratados com dibenzotiofeno e naftaleno.
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Abstract
Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.O objetivo do presente estudo foi investigar a expressão gênica em intestino delgado de ratos Wistar submetidos aos regimes crônicos de administração de dibenzotiofeno e compará-los ao naftaleno. Ratos Wistar foram divididos em seis grupos experimentais: CON-12 – Controle, 12 semanas; CON-18 – Controle, 18 semanas; DBT-12 – Dibenzotiofeno, 12 semanas; DBT-18 – Dibenzotiofeno, 18 semanas; NAF-12 – Naftaleno, 12 semanas; NAF-18 – Naftaleno, 18 semanas. Os animais dos grupos NAF-12 e DBT-12 foram tratados durante 12 semanas com 0,7 mmols/Kg, dos respectivos compostos carcinógenos. Os grupos NAF-18 e DBT-18 foram tratados durante 18 semanas e submetidos a 8 semanas de latência, com 0,7 mmols/Kg, dos respectivos compostos. Os ratos do grupo controle foram submetidos aos mesmos procedimentos, porém sem a aplicação dos carcinógenos. Foram avaliadas a expressão gênica de 87 genes envolvidos com o processo da carcinogênese. Com o objetivo de quantificar os níveis de mRNA dos genes selecionados, foi realizada técnica de qPCR, seguido da análise pelo método de quantificação relativa da expressão gênica (ΔCq). Os genes alvos foram normalizados pelo gene 18S, 2-ΔCq e escore Z. Para a análise de enriquecimento dos genes foi utilizada ferramenta de bioinformática “The Rat Genome Database 2015”. Os resultados obtidos demonstram 81 regulações positivas e 4 negativas para o NAF-12; 83 regulações positivas e 4 negativas para o DBT-12; 69 regulações positivas e 6 negativas para NAF-18; 36 regulações positivas e 43 negativas para DBT-18. Identificou-se um perfil de expressão gênica que é característico para o DBT e naftaleno consistentes com a indução de neoplasia e câncer. O perfil da regulação dos genes envolvidos na progressão tumoral após a interrupção do estímulo permite concluir, que em ratos, as exposições ao naftaleno mantem por mais tempo, em maior parte dos marcadores, uma resposta mais intensa no sentido da evolução do câncer quando comparado ao DBT. Por outro lado, alguns genes muito importantes na avaliação do câncer apresentaram uma regulação exclusiva para o tratamento com DBT em relação ao naftaleno e consistente com a manutenção dessa patologia após a latência.The aim of the present study was to investigate a gene expression in small intestine of Wistar rats undergoing chronic regimes of dibenzothiophene administration and to compare them to naphthalene. Wistar rats were divided into six experimental groups: CON-12 - Control, 12 weeks; CON-18 - Control, 18 weeks; DBT-12-Dibenzothiophene, 12 weeks; DBT-18-Dibenzothiophene, 18 weeks; NAF-12 - Naphthalene, 12 weeks; NAF-18 - Naphthalene, 18 weeks. Animals of the NAF-12 and DBT-12 groups were treated for 12 weeks with 0.7 mmol / kg of the respective carcinogenic compounds. The NAF-18 and DBT-18 groups were treated for 18 weeks and subjected to 8 weeks of latency, 0.7 mmol / kg, of the composite data. The control groups are submitted to the same procedures, but without an application of the carcinogens. A gene expression of 87 genes involved in the carcinogenesis process was evaluated. In order to quantify the mRNA levels of the selected genes, qPCR technique was performed, followed by analysis by relative quantification of the gene expression (ΔCq). The target genes were normalized by the 18S, 2-ΔCq gene and Z score. For an enrichment analysis of the genes for the "The Rat Genome Database 2015" bioinformatics tool. The results obtained demonstrate 81 positive and 4 negative regulation for NAF-12; 83 positive and 4 negative regulation for DBT-12; 69 positive and 6 negative regulation for NAF-18; 36 positive and 43 negative for DBT-18. A genetic expression profile was identified that is characteristic for DBT and naphthalene consistent with an induction of neoplasia and cancer. The profile of the regulation of the genes involved in the tumor progression after the interruption of the stimulus allows to conclude that in rats, as exposures to the birth, in most of the markers, a more intense response towards the evolution of the cancer when compared to the DBT. On the other hand, some very important genes in the evaluation of cancer presented an exclusive rule for treatment with DBT in relation to naphthalene and consistent with a maintenance of this pathology after a latency