Clarimundo, Vanessa Schuck

Farinon, Mirian

Nor, Carolina

Oliveira, Patricia Gnieslaw de

Pedó, Renata Ternus

Teixeira, Vivian de Oliveira Nunes

Xavier, Ricardo Machado

Portuguese

Lume 5.8

36ª SEMANA CIENTÍFICA DO HOSPITAL DE CLÍNICAS DE PORTO ALEGRE              336  Clin Biomed Res 2016; 36 (Supl.)     P 1655 Peptídeo liberador da gastrina diminui a invasão de fibroblastos sinoviais murinos e possivelmente atua via PI3K/Akt Renata Ternus Pedó; Vanessa Schuck Clarimundo; Mirian Farinon; Vivian de Oliveira Nunes Teixeira; Carolina Nor; Ricardo Machado Xavier; Patrícia Gnieslaw de Oliveira - UFRGS  Introdução: Fibroblastos sinoviais (FLS) são as principais células envolvidas no mecanismo da patogênese da artrite reumatoide (AR). Os FLS têm perfil agressivo e invasor, levando a degradação da cartilagem e do osso. Pouco se sabe sobre a capacidade invasora dos FLS, acredita-se estar relacionada com vias intracelulares como a PI3K/AKT. O peptídeo liberador da gastrina (GRP) e o seu receptor (GRPR) estão envolvidos na resposta inflamatória e são encontrados na AR. RC-3095 é um antagonista do GRPR. Objetivo: Avaliar o papel do GRP/GRPR sobre a invasão dos FLS e seu envolvimento na via PI3K/AKT. Métodos: FLS foram isolados de camundongos com CIA. A viabilidade dos FLS foi através de sulforrodamina B após tratamento com LY294002 (1-10µM) e através de MTT após tratamento com GRP (0,1-10µM) e com RC-3095 (0,05-10µM) por 24h. A invasão dos FLS (n=5) foi realizada em kits de matrigel na presença: GRP (10µM), RC-3095 (1µM) e GRP+RC-3095; LY294002 (10µM), GRP (10µM) e LY294002+GRP, em 24 horas. Para determinação dos níveis de AKT e AKT fosforilada (p-Akt) realizamos western blot com lisados proteicos de FLS após uso de GRP (10µM) em diferentes tempos (5-30 min.). Os resultados estão em média±EP. Análise estatística foi realizada em SPSS e considerada significativa quando p≤0,05. Resultados e conclusões: A partir da viabilidade foram selecionadas as doses: 10 µM de GRP, 1 µM de RC-3095 e 10 µM para LY294002. Dados preliminares mostram que o GRP aumenta invasão celular (5356±767), enquanto que RC-3095 diminui (1722±271), quando comparados com controle sem tratamento (2888±386). Quando utilizados juntos, o RC-3095 inibe o efeito do GRP (2670±499). O tratamento com LY294002 diminuiu a invasão celular (6625±1296), quando comparado ao controle sem tratamento (9088±1040) e tratado com GRP (10464±969). Quando as células foram expostas aos tratamentos em conjunto ocorreu uma diminuição na capacidade invasora (7237±1189), quando comparado ao GRP. Adicionalmente, o tratamento com GRP levou a um aumento da expressão proteica de AKT e de p-AKT ao longo do período de tratamento. Dessa forma, sugere-se que o efeito estimulador do GRP sobre a capacidade de invasão dos FLS está relacionado com a via PI3K/AKT, através da ativação da síntese proteica de AKT e da fosforilação da mesma. Portanto, a via do GRP/GRPR apresenta grande potencial como alvo terapêutico para a AR, sendo que o efeito de inibição da invasão dos FLS pode levar à redução da erosão articular progressiva. Unitermos: Fibroblasto sinovial; Peptídeo liberador da gastrina; PI3K/AKT   

Peptídeo liberador da gastrina diminui a invasão de fibroblastos sinoviais murinos e possivelmente atua via PI3K/Akt

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