Bastianel, Marines

Koller, Otto Carlos

Schwarz, Sergio Francisco

Zalamena, Odir Antonio

Lume 5.8

 99  USO DE RAPD (RANDON AMPLIFIED POLYMORPHIC DNA) NA IDENTIFICAÇÃO DE HÍBRIDOS DE TANGERINEIRAS. Marinês Bastianel, Odir A. Zalamena, Sérgio F. Schwarz, Otto C. Koller.(Departamento de Horticultura e Silvicultura, Faculdade de Agronomia, UFRGS). Um dos principais problemas encontrados no melhoramento de tangerineiras é a poliembrionia onde a separação dos embriões zigóticos e nuncelares tem-se mostrado dificultosa. Técnicas moleculares tem sido mais freqüentemente utilizadas para tal, face as vantagens que apresentam em relação as demais. O presente trabalho objetivou a identificação de híbridos resultantes do cruzamento das cultivares ‘Montenegrina’ (Citrus deliciosa) e ‘King’ (Citrus nobilis) utilizando-se do marcador molecular RAPD. Os embriões foram separados com o auxílio de lupa e cultivados em meio de cultura MS (Murashige e Skoog). O DNA genômico foi extraído de folhas dos indivíduos F1, segundo metodologia descrita por Shillitto & Saul (1988), com algumas modificações. As reações foram preparadas em um volume de 12,3 µl contendo 1,0 unidade de Taq-polimerase (Cembiot/RS), 2,0 mM de MgCl2, 0,2 mM dNTP (Boehringer Mannhein), primer randômico (Operon) e DNA (15 ng). As amplificações foram realizadas em termociclador MJ Research. Inc. programado para 36 ciclos de 1 min. a 92ºC, 1 min. a 36ºC e 2 min. a 72ºC acrescidos de 10 min. a 72ºC ao final do último ciclo e visualizadas em gel de agarose (1,4%) corado com brometo de etídeo (0,5 µg/ml) e fotografado sob luz UV. Dos 202 indivíduos testados utilizando-se 4 diferentes primers, aproximadamente 30% mostraram-se híbridos. Análise de dendograma mostrou diferentes graus de similaridade entre híbridos e parentais, sendo estas informações úteis para o direcionamento de programas de melhoramento. (FINEP / CNPq / PROPESP-UFRGS). 343 

Uso de RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) na identificação de híbridos de tangerineiras

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