UJI SITOTOKSISITAS, ANTIPROLIFERATIF, DAN PENGARUHNYA TERHADAP EKSPRESI P53 DAN BCl2 DARI FRAKSI ETANOL INFUSA DAUN TEH (Camellia sinensis (L.) O.K.) TERHADAP SEL HeLa
Tea (Camellia sinensis (L.) O.K.) is one of medical plant traditionally used by society as anticancer. The aim of this research is to evaluate the citotoxic and antiproliferative effect of ethanolic fraction of tea (Camellia sinensis (L.) O.K.) and its effect on P53 and bcl-2. Tea were collected and extracted by infundation and fractioned with ethanol as solvent. Citotoxicity test was done by incubating HeLa cell at a density of 2.104 with treatment using extract in concentration of 250; 125 ; 62,5; 31,25; 15,63; and 7,81 µg/mL during 24 hours. Antiproliferative test were done by calculating doubling time which was equaling a life cell on treatment sample concentration 31,25 µg/mL; 15,63 µg/mL; 7,81 µg/mL; and 3,91 µg/mL with cell control at 24, 48 and 72 hours. Imunohistochemistry assay was used in LC50 with p53 and bcl-2 antibody. P53 and bcl-2 expression is compared to control. The result indicated that ethanol fraction of tea (Camellia sinensis (L.) O.K.) leaf infuse has citotoxicity effect on HeLa cell with LC50 of 24,45 µg/mL. The result of doubling time test indicated that doubling time value for a solvent control is 74,11 hours and a cell control is 78,22 hours. While, with treatment 31,25 µg/mL; 15,63 µg/mL; 7,81 µg/mL; and 3,91 µg/mL resulted on negative slope then did not produce doubling time. The extract can induce p53 expression and inhibit bcl-2 expression compared to control.Daun teh (Camellia sinensis (L.) O.K.) merupakan salah satu bahan alam yang digunakan masyarakat untuk pengobatan tradisional sebagai antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek sitotoksisitas, antiproliferatif, dan mekanisme terhadap p53 dan bcl-2 dari fraksi etanol infusa daun teh (Camellia sinensis (L.) O.K.). Daun teh yang diperoleh, diekstraksi dengan cara infundasi dan difraksinasi dengan pelarut etanol. Uji sitotoksisitas dilakukan dengan menginkubasi sel HeLa dengan kepadatan 2.104 dengan perlakuan ekstrak kadar 250 µg/mL; 125 µg/mL; 62,5; 31,25; 15,63; dan 7,81 µg/mL selama 24 jam. Uji antiproliferatif dilakukan dengan menghitung jumlah sel hidup pada perlakuan sampel kadar 31,25; 15,63; 7,81; dan 3,91 µg/mL setelah diinkubasi pada jam ke-24, 48 dan 72. Uji imunositokimia dilakukan pada konsentrasi sebesar 24,45 µg/mL dengan antibodi p53 dan bcl-2. Ekspresi p53 dan bcl-2 dibandingkan dengan kontrol. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sampel fraksi etanol dari infusa daun teh (Camellia sinensis (L.) O.K.) bersifat sitotoksik terhadap sel HeLa dengan harga LC50 sebesar 24, 45 µg/mL. Hasil uji doubling time diperoleh doubling time kontrol pelarut 74,11 µg/mL dan kontrol sel 78,22 µg/mL. Sedangkan pada perlakuan kadar 31,25; 15,63; 7,81; dan 3,91 µg/mL diperoleh harga slope yang negatif sehingga tidak diperoleh harga doubling time. Ekstrak tersebut dapat memacu ekspresi p53 dan menghambat ekspresi bcl-2 dibandingkan dengan kontrol
