Los datos de estudios Europeos indican que en humanos, genoespecies particulares de Borrelia burgdorferi pueden asociarse con las manifestaciones clínicas específicas de la enfermedad de Lyme. Las infecciones por B. burgdorferi sensu stricto tienden a conducir a síntomas artríticos, mientras que las infecciones por B. garinii parecen ocasionar complicaciones neurológicas.
Las manifestaciones cutáneas tardías (acrodermatitis) parecen estar asociadas con B. afzelii (1).
Las manifestaciones clínicas mixtas han sido también descritas (2). Recientemente se ha demostrado, mediante el uso de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), que el DNA de más de una de las tres especies de Borrelia asociadas con la enfermedad de Lyme en Europa estaban presentes en los fluidos biológicos de los pacientes de enfermedad Lyme (3). Estos datos generan la pregunta en lo que concierne al crecimiento relativo de especies de Borrelia después de una mordedura por una garrapata dualmente infectada, la importancia clínica de la infección humana ocasionada por más de una de las especies de Borrelia, y el origen de estas infecciones múltiples. Este último punto evoca la siguiente pregunta: ¿Estas infecciones resultan de las mordeduras consecutivas por dos garrapatas infectadas o desde una única mordedura por una garrapata infectada por más de una especie?Facultad de Ciencias Veterinaria

Bollen, Alex

Godfroid, Edmond

Hoyois, Bernard

Pichon, Bruno

Pérez-Eid, Claudine

Rodhain, Francois

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SEDICI - Repositorio de la UNLP

23Revista de Enfermedades Infecciosas Emergentes, vol.1 n.3. Setiembre 1997 (Versión Electrónica)
Infección Simultánea de Ninfas de Ixodes ricinus por dos espe-
cies de Borrelia burgdorferi Sensu Lato: posibles implicaciones
de las manifestaciones de clínicas
Treinta de las 249 ninfas fueron positivas
para B. burgdorferi cuando fueron usados los
primers SL universales. La prueba adicional de 5
de 30 ninfas por PCR, usando conjuntos de
primers genoespecíficos y el análisis de restric-
ción, no confirmó los resultados preliminares con
los primers universales. Esto puede haber sido
debido o a la variabilidad genotípica de B.
burgdorferi sensu lato o a la existencia de otro
subgrupo distinto o especies genómicas inclui-
das en B. burgdorferi sensu lato, como otros da-
tos parecen indicar (4). De las otras 25 ninfas, 22
fueron analizadas por ambas formas: análisis de
restricción y primers específicos, y tres por la
análisis de restricción sola. (El material disponi-
ble de garrapata no era suficiente para realizar
PCR con primers genoespecíficos) Diecinueve
ninfas estaban infectadas por especies únicas de
Borrelia (cuatro por B. garinii, 15 por B. afzelii), y
seis estaban infectadas por más de una (dos por
ambos B. burgdorferi sensu stricto y B. garinii,
tres por B. garinii y B. afzelii, uno por B. burgdor-
feri sensu stricto y B. afzelii).
A partir de estos resultados, parece que
cuando las ninfas están infectadas con una espe-
cie, B. afzelii es la más frecuente. Estas especies
pueden realmente ser prevalentes en esta área
de estudio o pueden tener un mayor tropismo
para el tejido dérmico y/o para el sistema circu-
latorio periférico del vertebrado que las otras dos
especies. En ninfas infectadas, la presencia si-
multánea de más de una genoespecie en ninfas
no alimentadas de I. ricinus no fue excepcional
(24%), y todas las combinaciones de las dos es-
pecies fueron observadas. La asociación de tres
genoespecies no ha sido aún detectada. Las in-
fecciones simultáneas en ninfas sin alimentarse
podrían tener diferentes explicaciones. La primera
es una comida larval sobre un hospedador infec-
tado por más de una especie. Recientemente,
Apodemus speciosus (el ratón de campo) infec-
tado por dos especies diferentes se han encon-
trado (5). Una segunda posibilidad es por comi-
das infecciosas interrumpidas sucesivas. Una ter-
cera posibilidad es una comida larval infecciosa
por una larva infectada anteriormente transova-
riamente. La cuarta posibilidad es una infección
mixta adquirida transovariamente.
Los datos de estudios Europeos indican
que en humanos, genoespecies particulares de
Borrelia burgdorferi pueden asociarse con las ma-
nifestaciones clínicas específicas de la enferme-
dad de Lyme. Las infecciones por B. burgdorferi
sensu stricto tienden a conducir a síntomas artrí-
ticos, mientras que las infecciones por B. garinii
parecen ocasionar complicaciones neurológicas.
Las manifestaciones cutáneas tardías (acroder-
matitis) parecen estar asociadas con B. afzelii (1).
Las manifestaciones clínicas mixtas han sido tam-
bién descritas (2). Recientemente se ha demos-
trado, mediante el uso de la reacción en cadena
de la polimerasa (PCR), que el DNA de más de
una de las tres especies de Borrelia asociadas
con la enfermedad de Lyme en Europa estaban
presentes en los fluidos biológicos de los pacien-
tes de enfermedad Lyme (3). Estos datos gene-
ran la pregunta en lo que concierne al crecimien-
to relativo de especies de Borrelia después de
una mordedura por una garrapata dualmente in-
fectada, la importancia clínica de la infección
humana ocasionada por más de una de las espe-
cies de Borrelia, y el origen de estas infecciones
múltiples. Este último punto evoca la siguiente
pregunta: ¿Estas infecciones resultan de las mor-
deduras consecutivas por dos garrapatas infec-
tadas o desde una única mordedura por una ga-
rrapata infectada por más de una especie?
Para investigar si las garrapatas están in-
fectadas por especies diferentes del complejo B.
burgdorferi a la vez, llevamos a cabo un mues-
treo del vector Ixodes ricinus durante la primave-
ra de 1994, en Rambouillet Forest cerca de Pa-
rís. Un total de 249 ninfas no alimentadas, reco-
lectadas de la vegetación, fueron analizadas por
PCR. Las garrapatas se aplastaron en buffer de
fosfatos salino, solubilizado en 0,5 % de Tween
20, y hervidas por 10 min. El lisado resultante
fue usado como una templado para las reaccio-
nes de amplificación por los primers ospA uni-
versales basados en SL o en aquellos basados
en los tres pares de primers genoespecíficos (3).
Estos últimos primers distinguen las tres espe-
cies asociadas a la enfermedad de Lyme B.
burgdorferi sensu lato p. ej., B. burgdorferi sensu
stricto, B. garinii, y B. afzelii. En algunos casos,
los productos amplificados de DNA fueron digeri-
dos con enzimas de restricción específicas para
confirmar la tipificación de la cepa de Borrelia.
ACTUALIDAD
24 Revista de Enfermedades Infecciosas Emergentes, vol.1 n.3. Setiembre 1997 (Versión Electrónica)
 Bruno Pichon,* Edmond Godfroid,# Bernard
Hoyois,# Alex Bollen,# Francois Rodhain,* y
Claudine Pérez-Eid*
* Unite’ d’Ecologie des Systèmes Vectoriels,
Institut Pasteur 75724 Paris, France
# Laboratoire de Genetique Applique’,
Universite’ Libre de Bruxelles, Rue de
l’Industrie 24, B-1400 Nivelles, Belgium
Este trabajo fue apoyado por subsidios de
Recherche & Partage Association, la Gould
Fundation, y el Conseil du Departement du Val
d’Oise. E. Godfroid, B. Hoyois, y A. Bollen, fue-
ron apoyados por un subsidio del Walloon Region
of Belgium (Convención UIB, Región Wallonne No.
2267).
Referencias
1. Assous MV, Postic D, Paul G, Nevot P, Baranton G. Western
blot analysis of sera from Lyme borreliosis patients according
to the genomic species of the Borrelia strain used as antigens.
Eur J Clin Infect Dis 1993;12:261-8.
2. Wienecke R, Neubert U, Volkenandt M. Cross-immunity
among types of Borrelia burgdorferi. Lancet 1993;341:830-1.
3. Demaerschalck I, Ben Messaoud A, De Kesel M, Hoyois B,
Lobet Y, Hoet P, et al. Simultaneous presence of different Bo-
rrelia burgdorferi genospecies in biological fluids of Lyme
disease patients. J Clin Microbiol 1995;33:602-8.
4. Nohlmans LMKE, De Boer R, Van Den Boggard AEJM, Van
Boven CPA. Genotypic and phenotypic analysis of Borrelia
burgdorferi isolates from the Netherlands. J Clin Microbiol 1995;
33:119-25.
5. Nakao M, Miyamoto K. Mixed infection of different Borrelia
species among Apodemus speciosus mice in Hokkaido, Japan.
J Clin Microbiol 1995;33:490-2.


Infección simultánea de ninfas de Ixodes ricinus por dos especies de Borrelia burgdorferi Sensu Lato: posibles implicaciones de las manifestaciones de clínicas

Servicio de Difusión de la Creación Intelectual

23Revista de Enfermedades Infecciosas Emergentes, vol.1 n.3. Setiembre 1997 (Versión Electrónica)Infección Simultánea de Ninfas de Ixodes ricinus por dos espe-cies de Borrelia burgdorferi Sensu Lato: posibles implicacionesde las manifestaciones de clínicasTreinta de las 249 ninfas fueron positivaspara B. burgdorferi cuando fueron usados losprimers SL universales. La prueba adicional de 5de 30 ninfas por PCR, usando conjuntos deprimers genoespecíficos y el análisis de restric-ción, no confirmó los resultados preliminares conlos primers universales. Esto puede haber sidodebido o a la variabilidad genotípica de B.burgdorferi sensu lato o a la existencia de otrosubgrupo distinto o especies genómicas inclui-das en B. burgdorferi sensu lato, como otros da-tos parecen indicar (4). De las otras 25 ninfas, 22fueron analizadas por ambas formas: análisis derestricción y primers específicos, y tres por laanálisis de restricción sola. (El material disponi-ble de garrapata no era suficiente para realizarPCR con primers genoespecíficos) Diecinueveninfas estaban infectadas por especies únicas deBorrelia (cuatro por B. garinii, 15 por B. afzelii), yseis estaban infectadas por más de una (dos porambos B. burgdorferi sensu stricto y B. garinii,tres por B. garinii y B. afzelii, uno por B. burgdor-feri sensu stricto y B. afzelii).A partir de estos resultados, parece quecuando las ninfas están infectadas con una espe-cie, B. afzelii es la más frecuente. Estas especiespueden realmente ser prevalentes en esta áreade estudio o pueden tener un mayor tropismopara el tejido dérmico y/o para el sistema circu-latorio periférico del vertebrado que las otras dosespecies. En ninfas infectadas, la presencia si-multánea de más de una genoespecie en ninfasno alimentadas de I. ricinus no fue excepcional(24%), y todas las combinaciones de las dos es-pecies fueron observadas. La asociación de tresgenoespecies no ha sido aún detectada. Las in-fecciones simultáneas en ninfas sin alimentarsepodrían tener diferentes explicaciones. La primeraes una comida larval sobre un hospedador infec-tado por más de una especie. Recientemente,Apodemus speciosus (el ratón de campo) infec-tado por dos especies diferentes se han encon-trado (5). Una segunda posibilidad es por comi-das infecciosas interrumpidas sucesivas. Una ter-cera posibilidad es una comida larval infecciosapor una larva infectada anteriormente transova-riamente. La cuarta posibilidad es una infecciónmixta adquirida transovariamente.Los datos de estudios Europeos indicanque en humanos, genoespecies particulares deBorrelia burgdorferi pueden asociarse con las ma-nifestaciones clínicas específicas de la enferme-dad de Lyme. Las infecciones por B. burgdorferisensu stricto tienden a conducir a síntomas artrí-ticos, mientras que las infecciones por B. gariniiparecen ocasionar complicaciones neurológicas.Las manifestaciones cutáneas tardías (acroder-matitis) parecen estar asociadas con B. afzelii (1).Las manifestaciones clínicas mixtas han sido tam-bién descritas (2). Recientemente se ha demos-trado, mediante el uso de la reacción en cadenade la polimerasa (PCR), que el DNA de más deuna de las tres especies de Borrelia asociadascon la enfermedad de Lyme en Europa estabanpresentes en los fluidos biológicos de los pacien-tes de enfermedad Lyme (3). Estos datos gene-ran la pregunta en lo que concierne al crecimien-to relativo de especies de Borrelia después deuna mordedura por una garrapata dualmente in-fectada, la importancia clínica de la infecciónhumana ocasionada por más de una de las espe-cies de Borrelia, y el origen de estas infeccionesmúltiples. Este último punto evoca la siguientepregunta: ¿Estas infecciones resultan de las mor-deduras consecutivas por dos garrapatas infec-tadas o desde una única mordedura por una ga-rrapata infectada por más de una especie?Para investigar si las garrapatas están in-fectadas por especies diferentes del complejo B.burgdorferi a la vez, llevamos a cabo un mues-treo del vector Ixodes ricinus durante la primave-ra de 1994, en Rambouillet Forest cerca de Pa-rís. Un total de 249 ninfas no alimentadas, reco-lectadas de la vegetación, fueron analizadas porPCR. Las garrapatas se aplastaron en buffer defosfatos salino, solubilizado en 0,5 % de Tween20, y hervidas por 10 min. El lisado resultantefue usado como una templado para las reaccio-nes de amplificación por los primers ospA uni-versales basados en SL o en aquellos basadosen los tres pares de primers genoespecíficos (3).Estos últimos primers distinguen las tres espe-cies asociadas a la enfermedad de Lyme B.burgdorferi sensu lato p. ej., B. burgdorferi sensustricto, B. garinii, y B. afzelii. En algunos casos,los productos amplificados de DNA fueron digeri-dos con enzimas de restricción específicas paraconfirmar la tipificación de la cepa de Borrelia.ACTUALIDAD24 Revista de Enfermedades Infecciosas Emergentes, vol.1 n.3. Setiembre 1997 (Versión Electrónica) Bruno Pichon,* Edmond Godfroid,# BernardHoyois,# Alex Bollen,# Francois Rodhain,* yClaudine Pérez-Eid** Unite’ d’Ecologie des Systèmes Vectoriels,Institut Pasteur 75724 Paris, France# Laboratoire de Genetique Applique’,Universite’ Libre de Bruxelles, Rue del’Industrie 24, B-1400 Nivelles, BelgiumEste trabajo fue apoyado por subsidios deRecherche & Partage Association, la GouldFundation, y el Conseil du Departement du Vald’Oise. E. Godfroid, B. Hoyois, y A. Bollen, fue-ron apoyados por un subsidio del Walloon Regionof Belgium (Convención UIB, Región Wallonne No.2267).Referencias1. Assous MV, Postic D, Paul G, Nevot P, Baranton G. Westernblot analysis of sera from Lyme borreliosis patients accordingto the genomic species of the Borrelia strain used as antigens.Eur J Clin Infect Dis 1993;12:261-8.2. Wienecke R, Neubert U, Volkenandt M. Cross-immunityamong types of Borrelia burgdorferi. Lancet 1993;341:830-1.3. Demaerschalck I, Ben Messaoud A, De Kesel M, Hoyois B,Lobet Y, Hoet P, et al. Simultaneous presence of different Bo-rrelia burgdorferi genospecies in biological fluids of Lymedisease patients. J Clin Microbiol 1995;33:602-8.4. Nohlmans LMKE, De Boer R, Van Den Boggard AEJM, VanBoven CPA. Genotypic and phenotypic analysis of Borreliaburgdorferi isolates from the Netherlands. J Clin Microbiol 1995;33:119-25.5. Nakao M, Miyamoto K. Mixed infection of different Borreliaspecies among Apodemus speciosus mice in Hokkaido, Japan.J Clin Microbiol 1995;33:490-2.

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