Análisis inmunohistoquímico de mediadores moleculares implicados en angiogénesis LDH5 y VEGFR2/pKDR en pacientes con cáncer colorrectal avanzado: determinación de su valor como biomarcadores

Abstract

Tema. El esquema de tratamiento de primera línea estándar más utlizado para los pacientes diagnosticados de adenocarcinoma colorectal avanzado es en la actualidad la combinación de Oxaliplatino, Fluoropirimidinas y Bevacizumab. No todos los pacientes se benefician de igual manera, siendo necesarios identificar marcadores moleculares capaces de predecir el pronóstico y la posibilidad de respuesta. Objetivos. El objetivo de nuestro estudio es determinar el papel pronóstico y predictivo de la expresión inmunohistoquímica de dos proteínas implicadas en la angiogénesis y adaptación metabólica a la hipoxia tumoral: LDH5 y VEGFR/pKDR, en pacientes tratados con Oxaliplatino y Fluoropirimidinas con o sin Bevacizumab. Como objetivos secundarios pretendemos analizar el valor pronóstico de las mutaciones de RAS en estos pacientes, así como su valor predictivo de respuesta en pacientes tratados con fármacos antiangiogénicos, y realizar un análisis de las características clínico-patológicas asociadas con peor pronóstico en estos pacientes. Metodología. Estudio retrospectivo de la cohorte de pacientes diagnosticados de CCR avanzado y tratados con combinación de quimioterapia con Fluoropirimidinas, y Oxaliplatino, asociados o no a Bevacizumab en cuatro hospitales de la Comunidad Valenciana. Se analizarán la expresión inmunohistoquímica de las proteínas VEGFR/pKDR y LDH5, así como la presencia de mutaciones en la vía RAS (KRAS y NRAS), y estudiaremos la correlación que pudiera existir entre la sobreexpresión de dichas proteínas o la presencia de dichas mutaciones con el pronóstico de los pacientes y la eficacia del tratamiento recibido. Para el análisis inmunohistoquímico se realizó una matriz de tejido con bloques de tumor representativos de cada paciente, utilizándose el anticuerpo anti-pKDR 34a, y el anticuerpo anti-LDH5 Abcam-9002, y se analizaron utilizando un sistema de clasificación semicuantitativa. Para el objetivo secundario del estudio en el que se pretende analizar la importancia de las mutaciones de la familia RAS como marcador pronóstico en CCR avanzado, se llevó a cabo un análisis de genotipificación de las muestras. Resultados Encontramos un total de 112 pacientes que cumplían los criterios de inclusión del estudio en nuestras bases de datos. Todos los pacientes fueron diagnosticados de CCR avanzado entre enero de 2010 y diciembre de 2013 y fueron tratados con un esquema de quimioterapia que incluía Fluoropirimidinas y Oxaliplatino (XELOX o FOLFOX) con o sin bevacizumab. El análisis Inmunohistoquímico fue valorable en 84 pacientes para pKDR (75%) y en 87 pacientes para LDH5 (77,6%). Siete pacientes (8,3%) presentaban expresión leve o indetectable; mientras que los 77 restantes (91,7%) presentaban expresión moderada o intensa. Dieciséis pacientes (18,3%) presentaban baja expresión; mientras setenta y un pacientes (81,7%) mostraron una fuerte expresión de LDH 5. 93 pacientes con material histológico disponible para el análisis de N-RAS y K-RAS. Cuarenta y nueve pacientes (52,6%) presentaban tumores con mutaciones de RAS, 47 mutaciones de K-RAS y 2 de N-RAS. La baja expresión de VEGFR/pKDR se asoció con mayor tasa de respuesta (100% vs 46,3%, p= 0,019), así como con una tendencia favorable pero no significativa en términos de SG (28 vs 22 meses, p= 0.09) y SLP (15 vs 12 meses, p=0,4); La baja expresión de LDH5 no se asoció con características clínicas de mejor pronóstico, y tampoco se asocia con una mayor tasa de respuesta (56,2 vs 60,8%, p= 0.47), ni con una mejor SG (20 vs 24 meses, p= 0.17) ni SLP (11 vs 12 meses, p= 0.28). El estado mutacional de RAS no se asoció con un peor pronóstico (SG; RASmut 20 meses vs RASwt 24 meses, p= 0,63), y fue predictivo de la respuesta al tratamiento (TR RASmut 48,9% vs RASwt 59,9%, p= 0.12). La Carcinomatosis Peritoneal y la afectación multiorgánica al diagnóstico de pacientes con CCR avanzado son factores pronósticos que se relacionan independientemente con peor SG y peor SLP. Conclusiones La sobreexpresión inmunohistoquímica de VEGFR/pKDR y LDH5 se observa en un alto porcentaje de pacientes con CCR avanzado. No hemos observado diferencias significativas en la supervivencia global o la supervivencia libre de progresión de estos pacientes en función de la expresión dichos marcadores moleculares