壳聚糖/siRNA纳米粒的制备与性能研究

Abstract

利用静电自组装法制备了壳聚糖/siRNA纳米粒,建立了SYBR -old核酸染料法测定siRNA复合率（CR）,并系统性考察了n（N）/n（P）比,壳聚糖分子量（Mw）、脱乙酰度（DD ）及制备环境pH 值、缓冲液浓度（Bc）对纳米粒siRNA 复合率、粒径及表面电位的影响规律. 结果表明,siRNA 复合率由n（N）/n（P）0.5时的（18.6±4.0）%快速增大至n（N）/n（P）为2时的（92.9±2.0）%,但随n（N）/n（P）增大复合率不再升高;n（N）/n（P）〈2时,难以形成稳定纳米粒,复合物表面电位为负,n（N）/n（P）由5升至150时,纳米粒粒径由（179.3±5.7）nm 增大至（235.5±8.3）nm,表面电位由（17.2±1.3）mV 升高至（23.6±0.9）mV.另外,n（N）/n（P）150时,CR 随DD 升高而升高,随Bc升高而降低;纳米粒粒径随Mw 增大而增大,随DD及缓冲液浓度（Bc）升高而减小;纳米粒表面电位随DD 升高而升高,随pH 值及Bc 升高而降低.n（N）/n（P）比对纳米粒特性及siRNA 复合率影响最为显著,调整n（N）/n（P）、Mw、DD 、pH 值及离子强度可得到siRNA 复合率在90% 以上,粒径100-300nm,表面电位15-25mV 的纳米粒