丁 倫奈

中村 祐介

内田 信彦

堀端 康博

塩原 太一

小池 亮祐

新井 良

杉本 博之

正和 明哲

武政 聡浩

清水 泰生

渡邉 泰治

知花 和行

石井 芳樹

English

Dokkyo Medical University Repository / 獨協医科大学リポジトリ

第45回獨協医学会学術集会
脊髄後角表層ニューロン
の GABAA 受容体機能に対
する末梢神経損傷の影響
1）麻酔科学，2）生理学（生体情報）
安島崇晃 1），加藤永子 2），福島央之 2）， 
山口重樹 1），濱口眞輔 1），堀　雄一 2）
【背景】神経障害性疼痛の発症機序として，脊
髄後角内の GABA 作動性抑制性シナプス伝達の
減弱による脱抑制が考えられている．今回，神経
障害性疼痛マウスを用いて，脊髄後角表層内の
GABA 受容体の機能変化について研究を行った．
【方法】生後 7-8 週齢の雄性 ICR マウスの坐骨
神経を Seltzer 法に準じて半結紮 7 日後に摘出し
た脊髄のスライス標本を作製し，脊髄後角表層の
分布するニューロンからのホールセル記録を行
った．記録下のニューロンの近傍に置いたガラス
管ピペットから GABA を圧投与し，誘発される
膜電流を記録した．また，後根流入部位に加えた
電気刺激で誘発されるシナプス後電流も記録し
た．次いで，ホールセル記録終了後に単一細胞の
real-time PCR を行い，GAD67 および VGluT2 の
発現を検討することによって，ニューロンを
GABA 作動性抑制性とグルタミン酸作動性興奮
性に分類した．さらに，GABAA 受容体 a1，a5
および d サブユニットの発現についても PCR に
よる検討を行った．
【結果】ニューロンの電気刺激によって誘発さ
れた GABAA 受容体を介するシナプス後電流の立
ち下がりに関する時定数 t を検討した結果，坐骨
神経結紮マウス群における t slow（142±7.2 msec）
は Sham マウス群の t slow（117±8.9 msec）に比し
て有意に長かった（t 検定，p＜0.05）．一方，坐
骨神経結紮マウス群の t fast（24.9±1.7 msec）と
Sham マウス群の t fast（24.2±2.2 msec）間に有意
差はみられなかった（p＝0.81）．また，GABAA 受
容体 a1 サブユニットの発現は坐骨神経結紮によ
って有意に減少した（p＜0.05）．
【結論】神経障害性疼痛の発症には，脊髄後角
表層に分布する抑制性ニューロンに対する
GABA 作動性の抑制性入力の減弱（脱抑制）が関
与している可能性が示唆された．
iPS 細胞の血管内皮細胞
分化過程における脂質変
化の解析と疾患モデル作
成への試み
1）内科学（呼吸器・アレルギー），2）生化学講座
中村祐介 1），清水泰生 1），堀端康博 2），内田信彦 1），
丁　倫奈 1），小池亮祐 1），正和明哲 1），渡邉泰治 1），
塩原太一 1），新井　良 1），知花和行 1），武政聡浩 1）， 
杉本博之 2），石井芳樹 1）
【背景】呼吸器・循環器疾患において血管障害が病
態に重要な役割を担うことが報告され，plasmalogen
や sphingomyeline（SM）などのリン脂質も病態形成
に関わることが報告されている．iPS 細胞由来血管内
皮細胞の臨床応用が期待されている．
【目的】iPS 細胞から血管内皮細胞へ分化誘導過程
での脂質変化を明らかにする．脂質，血管内皮を軸
とした呼吸器疾患の病態解析モデルを作成する．
【方法】iPS 細胞から血管内皮細胞に分化誘導させ，
その過程における脂質構成をLC-MS/MSにて解析し
た．血管内皮細胞と肺線維芽細胞を共培養し血管内
皮ネットワーク形成モデルを作成した．共培養モデ
ルに対して，血管内皮を分離させ脂質を測定した．
【結果】iPS 細胞から血管内皮細胞へ分化誘導を行
った．分化誘導過程で plasmalogen phosphatidyletha-
nolamine（pPE），plasmalogen phosphatidylcholine
（pPC），SM を測定した．分化誘導過程で特に pPE
（38：5），pPE（38：4）の優位な増加が認められた．
pPC も同様に分化誘導過程で上昇した脂質を認め
た．SM は分化誘導過程で一過性に低下し，その後改
善した．ネットワーク形成モデルを作成し，血管内
皮細胞を分離させ上記脂質を解析した．
【考察】 plasmalogen の増加と SM の一過性低下は
血管内皮細胞の分化や成熟の指標となり得る．plas-
malogen の不足は正常な脈管形成を障害するという
報告もあり，iPS 細胞由来血管内皮細胞の臨床応用を
考えた際に plasmalogen を評価することは有用であ
る．共培養モデルは脂質，血管内皮を軸とした，呼
吸器疾患の病態解析モデルに応用できると考えられ
た．
【結論】pPE（38：5）並びに pPE（38：4）の上昇
や SM の一過性の低下は血管内皮分化や成熟の指標
となり得ることを明らかにした．血管内皮，肺線維
芽細胞から病態解析に応用可能な共培養モデルを作
成した．
98 獨協医誌
31. 32.


iPS 細胞の血管内皮細胞分化過程における脂質変化の解析と疾患モデル作成への試み

https://dmu.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=2149&item_no=1&attribute_id=22&file_no=1

iPS 細胞の血管内皮細胞分化過程における脂質変化の解析と疾患モデル作成への試み

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Dokkyo Medical University Repository / 獨協医科大学リポジトリ