Bechara, G. H.

Campebell, R. C.

Massoco, C. O.

Peiró, J. R.

Rosa, P. C. S.

Valadão, C. A. A.

Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science

Portuguese

Cadernos Espinosanos (E-Journal)

Cirurgia de Grandes AnimaisEndotoxemia por lipopolissacarídeo (LPS) deEscherichia coli, em eqüinos: efeitos deantiinflamatórios nas concentrações sérica eperitoneal do fator de necrose tumoral alfa (TNF-a)CampebelJ, R.CI;Peiró, J.Rl;Rosa, P.CS.';Valadão, CA.A.I;Bechara,G.H.';Massoco, Co.l1- Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinária - Universidade Estadual Paulista - Campus de Jaboticabal- SPA endotoxina, presente em altas concentrações no lúmen intestinal, não causa alterações patológicasnormalmente, devido à barreira mucosa intestinal prevenir sua absorção sistêmica. No entanto, aruptura desta barreira permite a absorção, que inicia uma cascata de eventos levando ao choque séptico/endotóxico. Dentre as respostas às injeções de LPS em baixas concentrações, a liberação de citocinas,como o fator de necrose tumoral (fNF-a), é um dos principais deflagradores da seqüência de eventosda resposta inflamatória. Os fármacos antiinflamatórios não esteroidais (AINES) têm sido ampla-mente utilizados por atenuarem os efeitos adversos da endotoxina. Dentre estes, o diclofenaco sódicoinibe a síntese de prostaglandina, por inibir a ciclooxigenase, competindo com o ácido aracdônico, demaneira dose dependente. Os glicocorticóides, entre outras atividades antiinflamatórias, reduzem aprodução de eicosanóides, inibem a síntese e a atividade do TNF-a e interleucina-1 (IL-1) pelosmacrófagos, estabilizam as membranas e previnem da ativação de neutrófilos. Este estudo foi realiza-do para avaliar o efeito do pré-tratamento com dic!ofenaco sódico e dexametasona, sobre os níveis deTNF-a no sangue e líqüido peritoneal, em eqüinos com endotoxemia induzida por dose subletal (0,1mg/kg, i.v.) de LPS de Escherichia coli. A realização deste estudo foi aprovada pelo Comitê de ÉticaAnimal da instituição de origem. Foram utilizados 15 cavalos machos não castrados, da raça MangalargaPaulista, com idade entre 2 a 3 anos. Os eqüinos foram divididos em três grupos de cinco animais cada:controle (C); diclofenaco sódico (DS) e dexametasona (DM). A endotoxemia subletal foi induzida pelainfusão IV de 0,1 mg/kg de endotoxina de E. coli 055:B5 (Sigma Chemical Co, St Louis, USA),administrada em 250 mL de solução de cloreto de sódio a 0,9%, durante 15 minutos. Os cavalos dogrupo C receberam solução de c!oreto de sódio a 0,9% administrada IV, 30 minutos antes da injeção deLPS. Nos animais do grupo DS foi administrado diclofenaco sódico (Farmavida, Bragança Paulista,SP) (2,2 mg/kg) VO, 1 hora antes do LPS. No grupo DM, os eqüinos receberam dexametasona(Schering-Plough, Rio de Janeiro, RJ) (1,1 mg/kg) IV, 30 minutos antes da injeção de endotoxina.Foram efetuadas as colheitas de sangue venoso e líqüido peritoneal de cada animal, antes e 1:15,3 e 6horas após a aplicação do LPS. A mensuração da concentração do TNF-a (pg/mL) no soro e líqüidoperitoneal foi realizada através de ensaio de citotoxicidade, modificando-se um bioensaio in vitro,estabelecido por Flick e Gifford, com células da linhagem L929 de fibrossarcoma murino sensíveis aoTNF-a. Os dados foram apresentados como médias ± erro padrão. Para detectar diferenças das médiasentre os grupos, foi utilizada a análise de variância de uma via (One WlayANOVA) seguida pelo teste deStudent-Newman-Keuls. Para detectar diferenças entre os momentos, dentro de cada grupo, foi utili-zado a análise de variância de repetições múltiplas de uma via (One Wlay-RM ANOVA). As diferençasforam consideradas significativas quando p ~ 0,05. No soro dos eqüinos do grupo C observou-seaumento significativo de TNF-a 1:15 hora após a indução da endotoxemia (Tabela 1), tanto em relaçãoao valor basal, quanto aos dos grupos DS e DM. No líqüido peritoneal não ocorreu nenhuma diferençaestatisticamente significativa. O pico de atividade do T F-a à 1:15 hora, corrobora com os dados daliteratura, que demonstram o aumento da atividade do TNF-a 15 a 30 minutos após indução daendotoxemia, com o pico entre 1 e 2 horas. A quantificação do T F-a foi realizada inicialmente comcélulas da linhagem WlEHI 164 clone 13, mas resultados confiáveis só foram obtidos com linhagem de213 Braz J vet Res anim Sei v.41 (supl) 2004célula L929. Barton e Collatos relata-ram que diferenças nas técnicas de en-saios biológicos, tipo de amostra e nadefinição de "aumento" de atividadede TNF-a podem induzir a variaçõesna quantificação da citocina. Foi ob-servado que o diclofenaco sódico ini-biu a síntese de TNF-a e, conseqüen-temente, atenuou os sinais clínicos dehipertermia e hipomotilidade intesti-nal, por reduzir a ativação da cascatainflamatória. Nos animais que rece-beram dexametasona, observou-seausência de febre, provavelmente pela diminuição ou inibição da produção de PGE2 e pela inibição dasíntese de T F-a, devido a redução da transcrição do gene T F e a tradução do TNF RNAm jápresente. Concluiu-se que em endotoxemia por LPS IV em eqüinos, houve aumento nos níveis deTNF-a sé rico, mas não no líquido peritoneal e que o diclofenaco e a dexametasona inibiram a produçãode TNF-a sérico.Cirurgia de Grandes AnimaisTabela 1. Valores médios e erro padrão da média da concentra-ção sérica de TNF-a (pg/mL), após injeção intravenosa de 0,1mg/kg de Iipopolissacarídeo (LPS) de E. co/i nos grupos C (con-trole), DS (diclofenaco sódico) e DM (dexametasona), emeqüinos.GRUPO T_E_M_PO~~~_o_ra_s)~------ __ ---0:00 1:15 3:00 6:00CDSDM20,1 ± 1,65 23,4 ± 0,26*# 21,7 ± 0,53 21,2 ± 0,9320,4 ± 1,56 19,9± 0,97 19,6 ± 0,92 19,9 ± 1,0820,1 ± 1,12 20,2 ± 0,54 19,7 ± 1,06 19,2 ± 1,72*Diferença significante em relação ao valor basal,#Diferença significante entre os grupos no momento indicado.Modelo experimental de neurorrafia em eqüinosDelistoianov,Macoris, D.G.1;Godoy, R.F.';Alessi, A.C.'I.. , 1- Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias - Universidade Estadual Paulista - Campus de Jaboticabal- SPA reparação cirúrgica de nervos tem como principal meta a restauração da função motora e da sensibi-lidade. Com a introdução de novas técnicas microcirúrgicas, várias alternativas têm sido propostas paraa reparação ou reconstrução de feixes nervosos que sofreram injúria. Na espécie eqüina não foramencontradas pesquisas que avaliem a neurorrafia nessa espécie. Dessa forma, o presente trabalho objetivouavaliar um modelo para técnica de neurorrafia, utilizando o nervo digital palmar (NDP), e tambémestabelecendo protocolo de avaliação clínica e anatomopatológica. Foram utilizados seis eqüinos adul-tos clinicamente saudáveis. Os animais foram divididos em três grupos - GI, GIl e GIIl, cada um comdois animais. A medicação pré-anestésica incluiu tranqüilização com xilazina 10%. Decorridos 10 mi-nutos efetuou-se o derrubamento com a administração de éter gliceril guaiacol e a indução da anestesiageral com tiopental sódico. Em seguida os animais foram entubados com sonda orotraqueal e manti-dos sob anestesia geral inalatória pelo halotano vaporizado em oxigênio com circuito semifechado. Osanimais foram posicionados em decúbito lateral direito e, ao final dos procedimentos, em decúbitolateral esquerdo, para a cirurgia no respectivo membro contralateral. Realizou-se a colocação de umabanda de smarch no sentido do casco até o terço distal do terceiro metacarpiano para evacuação desangue daquela região, e a anti-sepsia do campo cirúrgico. A neurectornia do NDP lateral e do medial foirealizada segundo a técnica de guilhotina. Após a neurectomia foi realizada a neurorrafia, utilizando-sea sutura epineural (SE), pela aposição dos cotos com pontos simples separados (quatro pontos) comfio náilon 9-0 em um membro. o membro oposto a neurorrafia foi feita utilizando tubo flexível desilicone (SCS). A retenção da câmara de silicone no nervo foi realizada por sutura do epineuro em suasbordas. A seguir foi realizada uma sutura de reaproximação do subcutâneo e, ao término, a sutura depele com pontos simples separados com fio de náilon. Após a realização da SE e SCS no animal emdecúbito lateral direito no NDP lateral de um membro e no NDP medial do outro membro, o animalfoi colocado em decúbito oposto para ser realizado o mesmo procedimento cirúrgico, tomando-se oBraz J vet Res anim Sei v.41 (supl) 2004 214

Endotoxemia por lipopolissacarídeo (LPS) de Escherichia coli, em equinos: efeitos de antiinflamatórios nas concentrações sérica e peritoneal do fator de necrose tumoral alfa (TNF-a)

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