Background: the knowledge of health personnel about the prevention of infections associated with health care and the practices of hygienic measures and biosafety can be risk factors for the appearance of these infections that are an indicator of the quality of hospital care.Objective.to determine knowledge level and application of preventive measure about infections associated with health care in a hospital from Cartagena Bolívar. Methods: a cross-sectional descriptive study in a third level hospital in 2012. A survey was applied in 184 health professionals to evaluate knowledge level and application of preventive measure about infections associated with health. Results:98.9 %of health professional had a good knowledge level. Anybody responded correctly how do they wash their hands. 59.8% always used preventive measure with respect to infections associated with health care. Conclusions: Health professional had good knowledge level, but anybody responded correctly how do they wash their hands.Introduccion:el conocimiento del personal de la salud sobre prevención de infecciones asociadas a la atención en salud y las prácticas de medidas higiénicas y bioseguridad pueden ser factores de riesgo para la aparición de estas infecciones que son un indicador de la calidad de atención en hospitales. Objetivo: determinar el nivel de conocimiento y aplicación de medidas preventivas sobre infecciones asociadas a la atención de salud en un hospital de la ciudad de Cartagena Bolívar.Materiales y Métodos: se realizó un estudio descriptivo, transversal en un hospital de tercer nivel de atención en el año 2012. Se aplicó una encuesta a 184 profesionales de la salud de todos los turnos para evaluar nivel de conocimiento y aplicación de medidas preventivas sobre infecciones asociadas a la atención de la salud. Resultados:el 98,9% del personal encuestado tuvo un nivel de conocimiento bueno. Ningún profesional respondió correctamente cual era la secuencia de pasos para el lavado de manos. El 59,8% de los encuestados siempre utilizó medidas preventivas con respecto a las IAAS. Conclusion:los profesionales que laboran en la institución hospitalaria evaluada tienen un nivel de conocimiento bueno pero desconocen cómo realizar un adecuado proceso de lavado de manos
