8-(6-氨基己烷)－氨基－NADH的制备和表征

Abstract

采用1,6-己二胺对烟酰胺辅酶（NADH）的腺嘌呤C8位点进行定点修饰，通过DEAE—Sepharose层析分离得到产物8-（6-氨基己烷）-氨基-NADH．经优化制备过程和分离条件，其收率可达60％．在pH2．2-8．0内系统考察了修饰产物的pH稳定性，结果表明在不同种类的缓冲液中，修饰后辅酶的稳定性均有显著提高，在pH6．5的柠檬酸盐和pH8．0的磷酸盐缓冲液中，半衰期分别延长11和5倍．通过利用乳酸脱氢酶（LDH）和谷氨酸脱氢酶（GDH）测定修饰前后辅酶的活性，发现相同反应条件下修饰后辅酶的反应速率分别是天然NADH的3．0-3．8倍（LDH）和1．3-1．4倍（GDH）