'Ege Universitesi Turk Dunyasi Incelemeleri Dergisi'
Abstract
Üreaz, ürenin amonyak ve karbondiokside hidrolizini katalizleyen bir enzimdir. Daha önce pek çok polimerik materyal üreaz immobilizasyonu için kullanılmış olup analitik ve biyomedikal alanlarda kullanımı açıklanmıştır. İmmobilize üreazın başlıca biyomedikal uygulamalarından biri detoksifikasyon için direk kandan veya yapay böbrek makinelerinin diyaliz sistemlerinden üre atılımıdır. Alanin dehidrogenaz (AlaDH), NAD+ varlığında L-alaninin piruvat ve amonyağa dönüşümlü deaminasyonunu katalizleyen bir enzimdir. Üreaz reaksiyonu sonucu oluşan amonyak, başlıca toksik metabolik ürünlerden biridir ve AlaDH reaksiyonu ile alanine dönüşmektedir. AlaDH’ın çeşitli kaynaklardan saflaştırılmasına ve özellikleri araştırılmasına rağmen, immobilizasyon çalışmaları sınırlıdır. Bu çalışmada, farklı yöntemler kullanılarak üreaz ve Üreaz/AlaDH enzim çiftinin immobilizasyonu gerçekleştirildi. Üreaz, glisidil metakrilat (GMA) aşılanmış naylon-6-membrana, kalsiyum-aljinat boncuklara ve poli-L-lizin (PLL) kaplı kalsiyum-aljinat boncuklarda immobilize edildi. Üreaz/AlaDH ise PLL kaplı kalsiyum-aljinat boncuklara immobilize edildi. İmmobilize ve serbest enzimlerin aktivitesine bazı parametrelerin (inkübasyon süresi, pH, sıcaklık, substrat konsantrasyonu) etkisi incelenerek kararlılık testleri (termal, pH, depo kararlılığı ve tekrar kullanılabilirlik) yapıldı. Seçilen immobilizasyon metodu ile uygun reaktör tasarımı yapıldı
