In the present study evidence is presented concerning the investigation of the intracellular mecahnism with which apoB assembles with lipids to form lipoprotein and clarification of the role of secondary and tertiary structure of the protein and possibly of enzymatic activities in the formation of LDL. Two complementary experimental approaches were followed. The first dealt with expressing and analyzing hybrid proteins consisting of almost all of apoAI protein and consecutive overlapping fragments of apoB inserted at the corboxyl terminal end of apoAI between the residues 212-233, and analysis of the resulting proteins for their ability to form lipoprotein. The second approach dealt with expressing aminoterminal fragemnts of apoB (B29, B43 and B47) and analyzing them for their ability to form lipoprotein. The experimental data lead us to conclude that the ability of apoB48 for intracellullar assembly into lipoprotein is not due to specific sequences present on dinstict fragments of apoB48 and that the length of apoB required for lipoptotein formation in C217 is more than 29% and equal or less that 41% of its molecule. Our conclusions are in agreement with a model in which apoB after its synthesis assumes the correct tertiary structure that allows (enzymatic or not) intracellular assemly with lipids. In addition lopoprotein formation in non hepatic C217 cells signifies that possible enzymatic activities or other protein required for lipoprotein assembly are not tissue specific.Στην παρούσα μελέτη παρουσιάζονται στοιχεία που αφορούν στη διερεύνηση του ενδοκυτταρίου μηχανισμού με τον οποίο η αποΒ συνδέεται με λιπίδια για το σχηματισμό λιποπρωτεϊνης και την εξακρίβωση του ρόλου της δευτεροταγούς και τριτοταγούς δομής της πρωτεϊνης και πιθανώς ενζυμικών ενεργοτήτων για την συναρμολόγηση της LDL. Ακολούθησαν δύο αλληλοσυμπληρούμενες πειραματικές προσεγγίσεις. Η πρώτη συνίστατο στην έκφραση και ανάλυση υβριδικών πρωτεϊνών που αποτελούνται από το σύνολο σχεδόν της αποΒ και διαδοχικά αλληλεπικαλυπτόμενα τμήματα της αποΒ παρεμβεβλημένα στο καρβοξυτερματικό άκρο της αποΑΙ μεταξύ καταλοίπων 212-233, και ανάλυση αυτών ως προς την ικανότητά τους να σχηματίσουν λιποπρωτεϊνικά συμπλέγματα. Τα πειράματα δεδομένα οδηγούν στα συμπεράσματα ότι η ιδιότητα της αποΒ48 να συνδέεται ενδοκυττάρια με λιπίδια για το σχηματισμό λιποπρωτεϊνης δεν προσδίδεται από ειδικές ακολουθίες που υπάρχουν σε επιμέρους τμήματα της αποΒ48 και ότι το ελάχιστο μήκος της αποΒ48 που απαιτείται για το σχηματισμό λιποπρωτεϊνης σε κύτταρα C127 είναι μεγαλύτερο από το 29% και μικρότερο ή ίσο με το 41% του μορίου της. Τα αποτελέσματα μας είναι συμβατά με ένα μοντέλο σύμφωνα με το οποίο μετά τη σύνθεσή της η αποΒ αποκτά την κατάλληλη τριτοταγή δομή που της επιτρέπει (ενζυμική ή μη) ενδοκυττάρια σύνδεση με λιπίδια. (περικοπή περίληψης
