Resistência de bactérias lácticas, isoladas de fezes de suínos e sua capacidade antagônica frente a microrganismos indicadores

Abstract

Lactic acid bacteria (LAB) were isolated from the faeces of nearly 40 healthy pigs, with different ages. The isolates were selected previously, based on the coloration in All Purpose Tween (APT) agar modified by the addition of 0,004% of purple bromocresol and 0,5% of calcium carbonate, on their morphology and on the coloration in gram and catalase activity. Approximately 50% of the isolated colonies presented morphology of Gram-positive cocos/bastonetes, negative catalase and yellow colonies when cultivated in modified APT agar, being classified as LAB. These isolates of pig faeces were compared by their ability to resist the pH 3.0, to grow in the presence of bile salts for 3 hours and by their antagonistic capacity against the indicative microrganisms (Salmonella typhi ATCC 6539, Campylobacter jejuni ATCC 29428, Escherichia coli ATCC 11229, Staphylococcus aureus ATCC 6538 and Enterococcus faecalis ATCC 19433). Only 18% of the isolates presented less than 1 Decimal Reduction (DR) when cultivated in the presence of pH 3.0. Nearly 36.5% reduced from 1 to 2 DR and 45.5% had more than 2 DR. No isolate had the capacity to grow in specific means with the adjusted pH for 3.0. About 36.5% of the isolates grew in cultivation medim modified with the addition of 0.3% of bile salts, 59% of isolates had decimal reduction smaller or equal to 2 and 4.5% presented decimal reduction larger than 2 DR. The 12 isolates that presented larger resistance to the pH 3.0 and resisted in cultivation medium added of bile salts were selected for the antagonism analysis. No inhibition halo was detected among the isolates, indicating a possible simultaneous growth to produce a probiotic. All the evaluated isolates produced an inhibition halo on at least two of the tested indicative microrganisms.Bactérias do ácido lático (BAL) foram isoladas das fezes de aproximadamente 40 suínos sadios e em diferentes idades. Os isolados foram previamente selecionados com base na coloração das colônias em ágar All Purpose Tween (APT) modificado pelo acréscimo de 0,004% de púrpura de bromocresol e 0,5% de carbonato de cálcio, morfologia, coloração em Gram e atividade de catalase. Das bactérias lácticas isoladas, aproximadamente 50% das colônias apresentaram morfologia de cocos/bastonetes Grampositivo, catalase negativa e colônias amareladas quando cultivadas em ágar APT modificado, sendo, portanto, classificadas como BAL. Estes isolados foram comparados pela sua habilidade em resistirem a pH 3,0, crescerem na presença de sais biliares por 3 horas e pela sua capacidade antagônica frente a microrganismos indicadores (Salmonella typhi ATCC 6539, Campylobacter jejuni ATCC 29428, Escherichia coli ATCC 11229, Staphylococcus aureus ATCC 6538 e Enterococcus faecalis ATCC 19433). Apenas 18% dos isolados obtiveram menos que 1 Redução Decimal (RD) quando cultivados na presença de pH 3,0. Cerca de 36,5% reduziram entre 1 e 2 RD e 45,5% tiveram mais que 2 RD. Nenhuma das cepas avaliadas teve capacidade de crescer em meios específicos com o pH ajustado para 3,0. Cerca de 36,5% dos isolados cresceram em meio de cultivo adicionado de 0,3% de sais biliares, 59% tiveram redução decimal menor ou igual a 2 e 4,5% maior que 2 RD. Os 12 isolados que apresentaram maior resistência ao pH 3,0 e que responderam melhor em meio de cultivo acrescido de sais biliares foram selecionados para análise de antagonismo. Nos teste de antagonismo entre os próprios lactobacilos isolados nenhum halo de inibição foi detectado, indicando a possibilidade de serem cultivados simultaneamente para produção de um probiótico. Todas as cepas avaliadas levaram a formação de halo de inibição sobre pelo menos dois dos microrganismos indicadores testados

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