The objective of this work was to evaluate the production and chemical constituents of selected genotypes of Artemisia annua, Cordia verbenaceae, Phyllanthus amarus and Mikania laevigata cultivated in Altinópolis, Campinas, Jales and São Carlos. Biomass variations, and qualitative and quantitative differences in plants chemical composition are observed among the locations, with higher values of interesting substances being detected in Jales.O objetivo deste trabalho foi avaliar a produção de biomassa e a composição química de genótipos selecionados de Artemisia annua (artemisia), Cordia verbenacea (erva-baleeira), Phyllanthus amarus (quebra-pedra) e Mikania laevigata (guaco), nos municípios de Altinópolis, Campinas, Jales e São Carlos, no Estado de São Paulo. Ocorrem variações na produção de biomassa, assim como diferenças qualitativas e quantitativas, na composição química das plantas, em função dos locais de cultivo, destacando-se os maiores rendimentos de princípios ativos na região de Jales

Batista, Luiz Alberto Rocha

Figueira, Glyn Mara

Magalhães, Pedro Melillo de

Sartoratto, Adilson

Scaranari, Ciro

Vaz, Ana Paula Artimonte

Portuguese

Embrapa: Sistema Eletrônico de Editoração de Revistas

Pesq. agropec. bras., Brasília, v.41, n.5, p.869-872, maio 2006Biomassa e composição química de espécies medicinais 869Notas CientíficasBiomassa e composição química de genótipos melhoradosde espécies medicinais cultivadas em quatro municípios paulistasAna Paula Artimonte Vaz(1), Ciro Scaranari(1), Luiz Alberto Rocha Batista(2), Glyn Mara Figueira(3),Adilson Sartoratto(3) e Pedro Melillo de Magalhães(3)(1)Embrapa Transferência de Tecnologia, Av. Anchieta, no 173, CEP 13015-100 Campinas, SP. E-mail: ana@campinas.snt.embrapa.br,ciro@campinas.snt.embrapa.br (2)Embrapa Pecuária Sudeste, Rod. Washington Luis, Km 234, CEP 13560-970 São Carlos, SP. E-mail:lbatista@cppse.embrapa.br (3)Universidade Estadual de Campinas, Centro Pluridisciplinar de Pesquisas Químicas, Biológicas e Agrícolas,Av. Alexandre Cazelatto, no 999, CEP 13081-970 Paulínia, SP. E-mail: glyn@cpqba.unicamp.br, adilson@cpqba.unicamp.br,pedro@cpqba.unicamp.brResumo – O objetivo deste trabalho foi avaliar a produção de biomassa e a composição química de genótiposselecionados de Artemisia annua (artemisia), Cordia verbenacea (erva-baleeira), Phyllanthus amarus (quebra-pedra) e Mikania laevigata (guaco), nos municípios de Altinópolis, Campinas, Jales e São Carlos, no Estado deSão Paulo. Ocorrem variações na produção de biomassa, assim como diferenças qualitativas e quantitativas, nacomposição química das plantas, em função dos locais de cultivo, destacando-se os maiores rendimentos deprincípios ativos na região de Jales.Termos para indexação: Artemisia annua, Cordia verbenacea, Mikania laevigata, Phyllanthus amarus, produ-ção, variabilidade química.Biomass and chemical composition of improved genotypes of medicinal plantspecies cultivated in four cities of São Paulo State, BrazilAbstract – The objective of this work was to evaluate the production and chemical constituents of selectedgenotypes of Artemisia annua, Cordia verbenaceae, Phyllanthus amarus and Mikania laevigata cultivated inAltinópolis, Campinas, Jales and São Carlos. Biomass variations, and qualitative and quantitative differences inplants chemical composition are observed among the locations, with higher values of interesting substancesbeing detected in Jales.Index terms: Artemisia annua, Cordia verbenacea, Mikania laevigata, Phyllanthus amarus, production, chemicalvariability.A produção de plantas medicinais representa uma alter-nativa inovadora e interessante para o agronegócio brasi-leiro (Lourenzani et al., 2004). No entanto, os compostosde interesse são metabólitos secundários, cuja produção econcentração são influenciadas por fatores ambientais efisiológicos – principais obstáculos ao seu processamentonas indústrias de fitomedicamentos e cosméticos (Zaroniet al., 2004).As espécies Artemisia annua L. (Asteraceae), Cordiaverbenacea DC. (Boraginaceae), Phyllanthus amarusSchum. & Thonn. (Euphorbiaceae) e Mikania laevigataSprengel (Asteraceae) são objetos de estudos de melhoramentono Centro Pluridisciplinar de Pesquisas Químicas, Biológicase Agrícolas – Unicamp, tendo sido selecionados genótiposinteressantes quanto aos seus aspectos agronômicos e àcomposição química relacionada com sua atividade.Artemisia annua é uma espécie nativa da China, cujoprincípio ativo, a artemisinina, tem propriedade anti-malárica bem estabelecida, enquanto seu óleo essencialtem características de produto sanitário (Magalhãeset al., 1997).A Cordia verbenacea, erva-baleeira, é uma espécienativa do litoral brasileiro, tradicionalmente usada no tra-tamento de hematomas e contusões. Seu óleo teve suaspropriedades antiinflamatórias confirmadas, e é utiliza-do na elaboração de medicamentos.A espécie Mikania laevigata, popularmente conhe-cida no Brasil como guaco, é extensivamente utilizadanos tratamentos de afecções respiratórias, associada àatividade da cumarina e outros compostos (Moura et al.,2002).Pesq. agropec. bras., Brasília, v.41, n.5, p.869-872, maio 2006A.P.A. Vaz et al.870Phyllanthus é um gênero com mais de 550 espécies,cuja diversidade se reflete na composição química, epossibilita diferentes aplicações medicamentosas.Das plantas de P. amarus, popularmente conhecidocomo quebra-pedra, são extraídos os compostos filantinae hipofilantina, cuja ação anti-viral, nos tratamentos dehepatite B e outras doenças crônicas do fígado, tem sidoextensivamente estudada (Wongnawa et al., 2005).O objetivo deste trabalho foi avaliar a produção debiomassa e a composição química de genótipos selecio-nados de A. annua, C. verbenacea, M. laevigata eP. amarus, nos municípios paulistas de Altinópolis, Cam-pinas, Jales e São Carlos.As mudas foram formadas a partir de sementes, embandejas de isopor de 72 células e 120 cm3, comsubstrato enriquecido de adubo orgânico, exceção feitaàs plantas de M. laevigata, obtidas por meio de estaquia.Efetuou-se o plantio de 51 mudas de A. annua(1,0x0,6 m), 20 mudas de C. verbenacea  e deM. laevigata (1,0x2,0 m), e 200 mudas de P. amarus(0,4x0,2 m), nos campos experimentais de Altinópolis(produtor privado), Campinas (Unicamp), Jales (Esta-ção Experimental de Viticultura Tropical) e São Carlos(Embrapa Pecuária Sudeste).Após 80 dias de cultivo, foram coletados os ramos efolhas de A. annua e a parte aérea de P. amarus; emseguida, o material vegetal foi submetido à secagem emestufa, com ventilação forçada (45°C), para aquantificação de biomassa. A colheita de M. laevigatae C. verbenacea foi realizada após 1 ano de cultivo emcampo, e o material fresco foi pesado e submetido àextração de seus óleos essenciais.Das plantas de A. annua extraiu-se a artemisinina, apartir de 100 mg de material seco e moído, em 5 mL desolução de acetonitrila, durante 1 minuto. O extrato foicentrifugado durante 6 minutos a 1.673 g, e alíquotasde 1 mL foram transferidas para tubos de reação de25 mL, para derivatização com solução de NaOH 0,2%,a 40°C, durante 15 minutos. Depois do resfriamento, assoluções foram neutralizadas com 4 mL de HOAc 0,1 M(Zhao & Zeng, 1986).Das plantas de P. amarus foram obtidas a hipofilantinae filantina, a partir de 200 mg de material seco e moído,em 5 mL de MeOH, durante 1 minuto. Apóscentrifugação por 6 minutos a 1.673 g, o sobrenadantefoi filtrado em algodão e o precipitado re-extraído em5 mL de MeOH, para posterior filtragem e ajuste devolume (Souza et al., 2002).Das plantas de M. laevigata extraiu-se a cumarina,a partir de 200 mg de folhas secas e moídas, em 30 mLde MeOH, durante 2 minutos. O sobrenadante foi fil-trado sobre funil de placa sinterizada, e o precipitado re-extraído em 20 mL de MeOH. O extrato foi secado emrotoevaporador, e o precipitado ressuspenso em solu-ção de acetonitrila:água (40:60 v/v) e submetido ao fil-tro Millex 0,45 µm (Celeghini et al., 2001).As quantificações de artemisinina, hipofilantina,filantina e cumarina foram realizadas em cromatógrafolíquido Shimadzu (coluna C-18, 250,0x4,6 mm), com osrespectivos eluentes: tampão fosfato:acetonitrila(80:20 v/v); ácido acético 3%:metanol (40:60 v/v); eacetonitrila:água (40:60 v/v).Os óleos essenciais foram obtidos por hidrodestilaçãode 100 g de planta fresca, em sistema Clevenger, em ba-lão de 1 L, adicionado de 700 mL de água destilada, du-rante 3 horas. A fase aquosa foi extraída com diclorometano(três vezes 50 mL), e a fase orgânica foi submetida à se-cagem com sulfato de sódio anidro, filtrada com algodão, eo solvente foi evaporado até a secura. O material resul-tante foi solubilizado em acetato de etila, e o α-humulenofoi quantificado no óleo essencial de C. verbenacea, emcromatógrafo a gás HP-5890, com detector de ionizaçãode chama, e a análise qualitativa do óleo essencial deA. annua foi realizada em cromatógrafo a gás HP-5890,com detector seletivo de massas HP-5971, nas seguintescondições cromatográficas: coluna capilar HP-5(30,00 m x 0,25 mm x 0,25 µm); 60°C, 3°C por minuto,240°C; temperaturas do injetor e detector, 220 e 250°C;vazão do gás de arraste (He), 1,0 mL por minuto (Adams,1995).Verificou-se correlação negativa entre a produção debiomassa de A. annua (Tabela 1) e os teores deartemisinina, que foram mais elevados em Altinópolis eJales (Tabela 2). O valor médio de produção deartemisinina em plantas de A. annua, relatado na litera-tura, é de 0,01 a 0,4%, atingindo, em alguns clones, oteor de 1% (Delabays et al., 1993); os resultados obti-dos evidenciaram rendimentos superiores (Tabela 2).Baixos teores de óleo essencial foram extraídos das fo-lhas de A. annua (Tabela 2), associados, possivelmen-te, ao estágio vegetativo de desenvolvimento das plan-tas, não adequado para a síntese e acúmulo dessas subs-tâncias (Ferreira & Janick, 1996).É interessante notar a variação na concentração re-lativa dos componentes majoritários do óleo (cânfora,Pesq. agropec. bras., Brasília, v.41, n.5, p.869-872, maio 2006Biomassa e composição química de espécies medicinais 871germacreno-D e trans-cariofileno), destacando-se ummaior teor relativo de cânfora nas plantas cultivadas emJales, enquanto um maior teor de germacreno-D foiobservado no material colhido em São Carlos(Tabela 2).Phyllanthus amarus apresentou pouca variação naprodução de biomassa (Tabela 1), o que indica uma boaadaptabilidade aos ambientes dos municípios estudados.Os teores de hipofilantina e filantina também foram se-melhantes, porém valores discretamente mais elevadosforam identificados nas plantas cultivadas em Jales(Tabela 2).As plantas de M. laevigata, cultivadas em SãoCarlos, apresentaram uma produção de biomassa trêsvezes superior àquela observada em Jales (Tabela 1).Porém, no material colhido neste último Município, o teorde cumarina foi até dez vezes superior ao obtido emAltinópolis – o menor de todas as análises (Tabela 2).O teor mais baixo de cumarina observado em SãoCarlos, quando comparado aos valores de Campinas eJales, pode estar associado ao ciclo de vida mais curtodas plantas, já florescidas na data da colheita, o quepode ter modificado a relação fonte/dreno e, conse-qüentemente, a síntese e acúmulo de metabólitos se-cundários (Vaz et al., 2004).Nos quatro municípios avaliados, as plantas deC. verbenacea atingiram o teor mínimo de 2,3% deα-humuleno, necessário para uso como matéria-primaem medicamentos fitoterápicos, destacando-se o mate-rial vegetal obtido em Jales e São Carlos, com maiorprodução de biomassa (Tabela 1), assim como deα-humuleno e de óleo essencial (Tabela 2).Para as quatro espécies estudadas, as plantas culti-vadas em Jales destacaram-se pelo maior acúmulo demetabólitos secundários de interesse, o que indica o po-tencial da região para o cultivo comercial de plantasmedicinais.AgradecimentosÀ Embrapa Uva e Vinho e ao Dr. Jair Costa Nachtigal;à Fazenda Cruzeiro do Sul e ao Sr. Jean-Ives Rivière eSra. Caroline Rivière, pela colaboração no plantio e con-dução das plantas em campo.ReferênciasADAMS, R.P. Identification of essential oil components by gaschromatography/quadrupole mass spectroscopy. 3rd ed. CarolStream: Allured Pub., 1995. 456p.CELEGHINI, R.M.S.; VILEGAS, J.H.Y.; LANÇAS, F.M. Extractionand quantitative HPLC analysis of coumarin in hydroalcoholicextracts of Mikania glomerata Spreng. (guaco) leaves. Journal ofthe Brazilian Chemical Society, v.12, p.706-709, 2001.DELABAYS, N.; COLLET, G.; BENAKIS, A. Selection and breedingfor high artemisinin (qinghaosu) yielding strains of Artemisia annua.Acta Horticulturae, v.330, p.203-206, 1993.FERREIRA, J.F.S.; JANICK, J. Distribution of artemisinin inArtemisia annua. In: JANICK, J. (Ed.). Progress in new crops.Arlington: ASHS Press, 1996. p.579-584.LOURENZANI, A.E.B.S.; LOURENZANI, W.L.; BATALHA,M.O. Barreiras e oportunidades na comercialização de plantasmedicinais provenientes da agricultura familiar. 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