Se estudió la capacidad de tres hongos filamentosos para degradar el colorante Verde de Malaquita (VM), previamente desarrollados a diferentes tiempos, antes de ser expuestos al colorante. Las cepas de los hongos utilizados se denominaron H1, HA y SA. El VM se probó a una concentración de 6 ppm. Para el primer tratamiento, el colorante se agregó al mismo tiempo que el inóculo. Para el segundo y tercer tratamiento, el colorante se agregó a los biorreactores después de una semana y después de dos semanas de incubación, respectivamente. El proceso de decoloración se realizó en cultivo estático, a temperatura ambiente durante 15 días. Los resultados indican que el tiempo de crecimiento de los hongos previo a la exposición con el VM, es un factor importante para mejorar su actividad degradativa.The study was focused on three filamentous fungi to degrade Malachite Green dye (MG), previously grown at different times, before being exposed to the dye. The fungi strains used were named H1, HA and SA. The MG was probed at a 6 ppm concentration. For the first treatment, the dye was added with the inoculum. For the second and third treatments, the dye was added to the biorreactors one and two weeks after incubation, respectively. The decoloration process was executed on a static crop at room temperature for 15 days. The results show that the growing time of the fungi prior the MG exposition is an important factor in order to improve its degrading activity

Castañeda Briones, María Teresa

Chávez Martínez, Margarita

Cruz Colín, María del Rocío

Espinoza-Castañeda, Marisol

González Arias, Erika

Ávila Jiménez, Miguel

Spanish

Zaloamati

Revista Tendencias en Docenciae Investigación en Química2017Universidad Autónoma Metropolitana, Ciudad de MéxicoQV676Año 3Número 3Efecto del tiempo previo de crecimiento sobre la biodegradación fúngica del verde de malaquita Ávila Jiménez Miguel*,	González	Arias	Erika,	Castañeda	Briones	María	Teresa,	Cruz	Colín	María	del	Rocío,	Chávez	Martínez	Margarita,	Espinoza-Castañeda	MarisolUniversidad	 Autónoma	 Metropolitana,	 Departamento	 de	 Ciencias	 Básicas.	 Av.	 San	 Pablo	 No.	 180,	 Azcapotzalco,	Ciudad	de	México.	C.P.	02200.	México.*Autor	para	correspondencia:	miaj@correo.azc.uam.mx Recibido: 27/julio/2017Aceptado: 2/agosto/2017Palabras claveVerde	de	Malaquita, hongos	filamentosos, proceso	de	decoloraciónKeywordsMalachite	Green, filamentous	fungi, decoloration	process	RESUMEN Se	 estudió	 la	 capacidad	 de	 tres	 hongos	 filamentosos	 para	 degradar	el	 colorante	 Verde	 de	 Malaquita	 (VM),	 previamente	 desarrollados	 a	diferentes	 tiempos,	 antes	 de	 ser	 expuestos	 al	 colorante.	 Las	 cepas	 de	los	 hongos	 utilizados	 se	 denominaron	H1,	HA	 y	 SA.	 El	 VM	 se	 probó	 a	una	 concentración	de	6	 ppm.	 Para	 el	 primer	 tratamiento,	 el	 colorante	se	 agregó	 al	 mismo	 tiempo	 que	 el	 inóculo.	 Para	 el	 segundo	 y	 tercer	tratamiento,	el	colorante	se	agregó	a	 los	biorreactores	después	de	una	semana	y	después	de	dos	 semanas	de	 incubación,	 respectivamente.	El	proceso	 de	 decoloración	 se	 realizó	 en	 cultivo	 estático,	 a	 temperatura	ambiente	 durante	 15	 días.	 Los	 resultados	 indican	 que	 el	 tiempo	 de	crecimiento	de	los	hongos	previo	a	la	exposición	con	el	VM,	es	un	factor	importante	para	mejorar	su	actividad	degradativa.	ABSTRACT The	study	was	focused	on	three	filamentous	fungi	to	degrade	Malachite	Green	dye	(MG),	previously	grown	at	different	times,	before	being	exposed	to	the	dye.	The	fungi	strains	used	were	named	H1,	HA	and	SA.	The	MG	was	probed	at	a	6	ppm	concentration.	For	 the	 first	 treatment,	 the	dye	was	added	with	the	inoculum.	For	the	second	and	third	treatments,	the	dye	was	added	to	the	biorreactors	one	and	two	weeks	after	incubation,	respectively.	The	decoloration	process	was	executed	on	a	static	crop	at	room	temperature	for	15	days.	The	results	show	that	the	growing	time	of	 the	 fungi	prior	the	MG	exposition	 is	an	 important	 factor	 in	order	to	improve	its	degrading	activity.Universidad Autónoma Metropolitana, Ciudad de MéxicoRevista Tendencias en Docenciae Investigación en Química2017Año 3Número 3QV677IntroducciónEn	 la	 actualidad	 existen	 más	 de	 100,000	 colorantes	sintéticos	 comerciales	 disponibles	 con	 una	 producción	anual	 de	 más	 de	 7x105	 toneladas/año	 que	 son	 de	importancia	 primordial	 para	 la	 fabricación	 de	 textiles	(McMullan	 et	 al.,	 2001).	 Estos	 colorantes	 están	principalmente	 asociados	 con	 la	 contaminación	 del	agua,	 ya	 que	 se	 estima	 que	 el	 2%	 de	 la	 producción	anual	son	descargados	en	los	efluentes	provenientes	de	operaciones	de	manufactura,	mientras	que	el	10%	de	las	descargas	está	relacionado	con	la	industria	textil	(Allen	y	Koumanova,	2005).Las	aguas	residuales	de	la	industria	textil	son	difíciles	de	tratar	debido	a	que	los	colorantes	contienen	estructuras	moleculares	aromáticas	complejas,	que	los	hacen	estables	en	 el	 ambiente	 y	 difíciles	 de	 degradar.	 Los	 hongos	 de	la	 podredumbre	 blanca	 de	 la	madera	 se	 han	 empleado	para	el	tratamiento	de	efluentes	textiles	debido	a	que	las	enzimas	 inespecíficas	 que	 sintetizan,	 asociadas	 con	 la	degradación	de	lignina,	son	capaces	de	oxidar	una	amplia	variedad	de	compuestos	orgánicos	contaminantes	como	colorantes	 e	 hidrocarburos	 poliaromáticos.	 (Vasdev,	2011;	 Przystas	 et	 al.,	 2015;	 Chmelová	 y	 Ondrejovič,	2016).El	 Verde	 de	 Malaquita	 (VM)	 es	 un	 colorante	 catiónico	soluble	en	agua	que	aparece	como	polvo	cristalino	verde	y	pertenece	a	la	categoría	de	trifenilmetano	(Raval	et	al.,	2016),	este	colorante	es	un	compuesto	orgánico	que	se	utiliza	 extensamente	 para	 colorear	 papel	 y	 productos	de	 cuero,	 teñir	 algodón,	 lana,	 seda	 y	 yute,	 así	 como	 en	impresión,	 en	 destilerías	 y	 otras	 industrias.	 (Khattri	y	 Singh,	 1999;	 Joshi	 y	Mhatre,	 2015).	 	 Entre	 todos	 los	otros	tintes	de	su	categoría,	el	VM	tiene	propiedades	que	hacen	que	sea	difícil	de	eliminar	de	soluciones	acuosas,	sin	 embargo,	 se	 han	 aplicado	 muchas	 tecnologías	 de	tratamiento	para	decolorar	VM	a	partir	de	medio	acuoso,	tales	 como	adsorción	 (Allen	y	Koumanova,	2005;	Raval	et	al.,	2016),	biodegradación	(Du	et	al.,	2013;	Olukanni	et	al.,	2013;	Verma	et	al.,	2017)	y	decoloración	(Daneshvar	et	 al.,	 2007;	 Vasdev,	 2011).	 Si	 las	 aguas	 residuales	contaminadas	 con	 el	 colorante	 VM,	 son	 desechadas	 a	las	 aguas	 nacionales	 sin	 ningún	 tratamiento,	 pueden	afectar	 la	 vida	 acuática,	 además	 de	 llegar	 a	 perjudicar	a	 la	 salud	 humana,	 con	 daños	 en	 el	 hígado,	 branquias,	riñón	e	intestino	(Daneshvar	et	al.,	2007),	por	lo	tanto,	es	conveniente	la	eliminación	eficaz	de	este	colorante	de	las	aguas	residuales.Ávila	 y	 colaboradores	 (2014),	 reportaron	 que	 el	 VM	en	 cultivo	 solido	 tuvo	 un	 efecto	 inhibitorio	 sobre	 el	crecimiento	 de	 hongos	 ligninolíticos.	 	 Con	 el	 propósito	de	mejorar	los	procesos	de	decoloración,	en	el	presente	trabajo	se	estudió	el	efecto	del	tiempo	de	crecimiento	de	tres	hongos	previo	a	la	exposición	de	colorante,	sobre	la	capacidad	de	decoloración	del	VM.MetodologíaPreparación del inóculoSe	 utilizaron	 tres	 cepas	 de	 hongos,	 las	 cuales	 fueron	previamente	aisladas	de	bagazo	de	caña	(Sotelo,	2011)	y	se	identificaron	como	H1,	HA	y	SA	(Figura	1).Figura 1. Imagen	de	 las	 cepas	de	 los	 hongos.	De	 izquierda	 a	derecha:	H1,	HA	y	SA.Las	 cepas	 se	mantuvieron	 en	 cultivo	 inclinado	 de	 agar	extracto	 de	 malta	 (AEM).	 Para	 su	 propagación,	 se	 re	inocularon	 en	 botellas	 Roux	 con	 AEM	 y	 se	 dejaron	desarrollar	a	temperatura	ambiente	durante	6	semanas.	Posteriormente,	se	les	agregaron	350	mL	de	medio	salino	estéril	para	obtener	una	suspensión	de	esporas	de	cada	hongo,	la	cual	fue	utilizada	como	inóculo	en	las	pruebas	de	 decoloración	 del	 VM.	 La	 composición	 por	 litro	 del	medio	 salino	 fue:	 5.0	 g	 glucosa,	 2.0	 g	 KH2PO4,	 0.5g	MgSO4·7H2O,	0.1	 g	CaCl2,	 0.5	 g	de	 tartrato	de	 amonio	y	0.04	g	de	MnCl2·4H2O	Efecto del tiempo de incubación Las	 unidades	 de	 experimentación	 fueron	 pequeños	biorreactores	 a	 los	 cuales	 se	 les	 agregaron	 90	 mL	 del	medio	 salino	 más	 10	 mL	 de	 la	 suspensión	 de	 esporas	o	 inóculo	 de	 cada	 uno	 de	 los	 hongos.	 El	 colorante	 VM	a	 una	 concentración	 de	 6	 ppm,	 se	 agregó	 después	de	 tres	 diferentes	 tiempos:	 0,	 1	 y	 2	 semanas	 de	desarrollo	a	temperatura	ambiente	en	cada	biorreactor.	Adicionalmente,	 se	 prepararon	 testigos	 sin	 colorante	y	 testigos	 sin	 inóculo.	 Las	 pruebas	 se	 realizaron	 por	Universidad Autónoma Metropolitana, Ciudad de MéxicoRevista Tendencias en Docenciae Investigación en Química2017Año 3Número 3QV678triplicado.	El	proceso	de	decoloración	se	llevó	a	cabo	en	condiciones	estáticas	y	a	temperatura	ambiente	durante	15	días.	La	concentración	de	colorante	remanente	en	los	biorreactores	 se	 determinó	 espectrofotométricamente	a	 617	 nm	 utilizando	 un	 espectrofotómetro	 Shimadzu UV1800.	 A	 diferentes	 tiempos	 de	 tratamiento	 se	tomaron	muestras	de	1	mL	de	cada	biorreactor	y	previo	a	 la	determinación	de	 la	 concentración	de	 colorante	 se	realizó	un	centrifugado	a	7000	rpm	durante	5	minutos	para	separar	la	biomasa.Cinética de los procesos de decoloraciónLos	datos	experimentales	de	concentración	remanente	de	VM	en	los	biorreactores	y	tiempo	fueron	correlacionados	con	 las	 ecuaciones	 cinéticas	 integradas	 de	 primer	y	 segundo	 orden	 (Fogler,	 2001)	 para	 determinar	 el	orden	 de	 reacción	 del	 proceso	 de	 decoloración	 (Tabla	1).	 Posteriormente,	 se	 calculó	 el	 valor	 de	 la	 constante	cinética	a	partir	del	 ajuste	de	 los	datos	experimentales	con	la	respectiva	ecuación	cinética	integrada.Tabla 1. Dependencia	de	la	concentración	con	la	constante	de	velocidad.Resultados y discusiónEfecto del tiempo de incubación En	 la	 Figura	 2,	 se	 presentan	 los	 resultados	 de	 la	decoloración	 del	 VM	 por	 las	 cepas	 cuando	 la	 adición	del	 colorante	 y	 la	 inoculación	 se	 realizaron	 al	 mismo	tiempo.	 Se	 observa	 una	 clara	 decoloración	 del	 VM	 con	la	cepa	de	hongo	H1,	el	proceso	se	llevó	a	cabo	hasta	la	casi	 completa	 eliminación	 del	 colorante	 en	 un	 periodo	de	 15	 días,	 obteniéndose	 un	 95.0%	 de	 decoloración.	Por	 el	 contrario,	 los	 hongos	HA	y	 SA	prácticamente	no	mostraron	 capacidad	 para	 realizar	 la	 decoloración	 del	VM	en	estas	condiciones.Con	 una	 semana	 de	 incubación	 previa	 a	 la	 adición	 del	colorante	(Figura	3)	se	observa	la	decoloración	del	VM	con	las	 tres	 cepas,	 encontrando	 la	mayor	decoloración	 con	 el	hongo	H1,	seguido	del	hongo	SA	y	finalmente	con	el	hongo	HA,	 que	 fue	 el	 que	 presentó	 la	menor	 decoloración.	 El	proceso	con	el	hongo	H1	comparado	con	el	observado	en	la	figura	2,	mostró	una	mayor	velocidad	de	decoloración	de	 tal	 forma	que	 se	 alcanzó	 un	 95.7%	decoloración	 en	un	periodo	de	11	días	de	tratamiento	y	la	casi	completa	eliminación	 del	 colorante	 a	 los	 15	 días	 (99.3%).	 La	eliminación	del	VM	que	se	alcanzó	con	los	hongos	SA	y	HA,	después	de	15	días	fue	del	95.8	y	65.7%,	respectivamente.En	 la	 figura	 4	 se	 presentan	 los	 procesos	 de	 la	eliminación	 del	 colorante	 cuando	 las	 cepas	 tuvieron	2	 semanas	 de	 crecimiento	 antes	 de	 su	 exposición	 al	colorante.	 Los	 porcentajes	 de	 decoloración	 que	 se	obtuvieron	con	los	hongos	H1,	SA	y	HA	fueron	de	98.8,	82.6	 y	 69.8%,	 respectivamente,	 en	 el	mismo	 periodo	de	15	días.Los	 resultados	 anteriores	 indican	 que	 el	 tiempo	 de	crecimiento	 de	 los	 hongos	 previo	 a	 la	 exposición	 con	el	 colorante	 es	 un	 factor	 importante	 a	 considerar	 para	mejorar	 su	 actividad	 decolorante	 (Tabla	 2).	 Con	 1	 y	 2	semanas	 de	 crecimiento	 previo	 a	 la	 adición	 de	VM,	 los	tres	 hongos	 mejoraron	 su	 capacidad	 para	 eliminar	 el	colorante,	hecho	que	no	sucedió	con	 las	cepas	SA	y	HA	cuando	el	colorante	 fue	agregado	al	mismo	tiempo	que	el	inóculo.Figura 2. Decoloración	del	VM	por	las	cepas	con	la	adición	de	colorante	al	mismo	tiempo	que	el	inóculo.Universidad Autónoma Metropolitana, Ciudad de MéxicoRevista Tendencias en Docenciae Investigación en Química2017Año 3Número 3QV679Figura 3. Decoloración	del	VM	por	las	cepas	con	1	semana	de	crecimiento	previo	a	la	adición	de	colorante.Figura 4. Decoloración	del	VM	por	las	cepas	con	2	semanas	de	crecimiento	previo	a	la	adición	de	colorante.El	hongo	H1	mostró	la	mejor	capacidad	para	llevar	a	cabo	la	decoloración	del	VM	con:	95.0,	99.3	y	98.8%,	seguido	por	 el	 hongo	 SA	 con	 8.3,	 95.8	 y	 82.6%	 y	 el	 hongo	 HA	presentó	la	menor	capacidad	para	realizar	este	proceso	con	2.0,	65.7	y	69.8%	de	decoloración,	a	los	tiempos	de	0,	1	y	2	semanas	de	incubación	al	momento	de	agregar	el	colorante,	respectivamente.	Los	resultados	obtenidos	muestran	una	mejora	en	la	capacidad	de	decolorar	al	VM	de	 los	tres	hongos	cuando	hay	un	tiempo	de	desarrollo	previo	a	la	adición	del	VM	comparado	con	el	tratamiento	en	el	cual	se	adiciona	el	colorante	al	mismo	tiempo	que	se	inocula.Tabla	2.	Efecto	del	tiempo	de	crecimiento	previo	a	la	adición	de	colorante	sobre	el	%	de	decoloración.Tiempo de crecimiento previo/semana% de decoloración de VMH1 SA HA0 95.0 8.3 2.01 99.3 95.8 65.72 98.8 82.6 69.8Cinética de los procesos de decoloraciónLa	 correlación	 de	 los	 datos	 experimentales	 con	 las	ecuaciones	cinéticas	integradas	de	primer	y	segundo	orden	mostró	un	mejor	ajuste	con	la	ecuación	de	primer	orden	para	todos	los	procesos	de	decoloración	observados.	En	la	figura	5	se	observa	el	ajuste	de	los	datos	experimentales	de	cada	una	de	las	cepas	con	la	ecuación	integrada	de	primer	orden	para	 los	procesos	 con	una	 semana	de	 crecimiento	previo	a	 la	 adición	del	 colorante.	Los	 coeficientes	de	 correlación	del	ajuste	de	 los	datos	experimentales	con	 la	ecuación	de	primer	 orden	 fueron:	 0.9808,	 0.9803	 y	 0.6909	 para	 los	procesos	con	las	cepas	H1,	SA	y	HA,	respectivamente.En	 la	 figura	 6	 se	 presentan	 los	 ajustes	 de	 los	 datos	experimentales	de	las	tres	cepas	con	la	ecuación	integrada	de	 primer	 orden	 para	 los	 procesos	 con	 dos	 semanas	de	 crecimiento	 previo	 a	 la	 adición	 del	 colorante.	 Los	coeficientes	 de	 correlación	 que	 resultaron	 del	 ajuste	 de	los	datos	experimentales	con	la	ecuación	de	primer	orden	fueron:	0.9633,	09815	y	0.6658	para	 los	hongos	H1,	SA	y	HA,	respectivamente.	El	valor	del	coeficiente	de	correlación	calculado	 para	 la	 cepa	 HA	 resultó	 menor	 debido	 al	comportamiento	de	una	réplica	notoriamente	diferente.Figura 5.	 Ajuste	 de	 datos	 experimentales	 con	 la	 ecuación	cinética	 integrada	 de	 primer	 orden,	 cuando	 el	 colorante	 se	agrega	después	de	una	semana	de	crecimiento.Universidad Autónoma Metropolitana, Ciudad de MéxicoRevista Tendencias en Docenciae Investigación en Química2017Año 3Número 3QV680Figura 6.	 Ajuste	 de	 datos	 experimentales	 con	 la	 ecuación	cinética	 integrada	 de	 primer	 orden,	 cuando	 el	 colorante	 se	agrega	después	de	dos	semanas	de	crecimiento.Las	constantes	de	velocidad	que	resultaron	de	los	ajustes,	así	como	los	coeficientes	de	correlación	para	cada	uno	de	los	hongos	cuando	se	adiciona	el	colorante	con	una	y	dos	semanas	de	crecimiento,	pueden	observarse	en	las	tablas	3	y	4,	respectivamente.	En	estas	condiciones	el	hongo	H1	fue	el	que	mostró	mejor	capacidad	para	llevar	a	cabo	la	decoloración	del	VM	(k	=	0.3439	y	0.4018	días-1),	seguido	por	el	hongo	SA	(k	=	0.1995	y	0.1157	días-1),	y	el	hongo	HA	presentó	la	menor	capacidad	para	realizar	este	proceso	(k	=	0.0777	y	0.0986	días-1).	Los	valores	de	la	constante	cinética	 calculados	 con	 la	 ecuación	 de	 primer	 orden	confirman	que	 el	 tiempo	de	 crecimiento	de	 los	 hongos	antes	de	la	adición	del	colorante	es	un	factor	importante	para	mejorar	el	proceso	de	decoloración.	Los	valores	de	la	 constante	 cinética	 del	 proceso	 de	 decoloración	 son	mayores	 cuando	 se	 da	 un	 tiempo	 de	 crecimiento	 a	 los	hongos	antes	de	ser	expuestos	al	colorante.	Tabla 3.	 Valores	de	 la	 constante	de	velocidad	para	 la	prueba	cuando	se	adiciona	el	colorante	con	una	semana	de	crecimiento.Hongo k / días-1 Coeficiente de correlación (R)H1 0.3439 0.9808SA 0.1995 0.9803HA 0. 0777 0. 6909Tabla 4.	 Valores	 de	 la	 constante	 de	 velocidad	 para	 la	 prueba	cuando	el	colorante	se	adiciona	con	dos	semanas	de	crecimiento.Hongo k / días-1 Coeficiente de correlación (R)H1 0. 4018 0.	9633SA 0. 1157 0. 9815HA 0.0986 0. 6658ConclusionesLos	resultados	mostraron	que	el	tiempo	de	crecimiento	de	los	hongos	previo	a	la	exposición	con	el	colorante	es	un	factor	importante	para	mejorar	su	actividad	decolorante.	Los	 tres	 hongos	 fueron	 capaces	 de	 eliminar	 la	 mayor	cantidad	 de	 colorante,	 cuando	 tuvieron	 1	 y	 2	 semanas	de	crecimiento	antes	de	la	adición	de	VM,	hecho	que	no	sucedió	 para	 los	 hongos	 SA	 y	 HA	 cuando	 el	 colorante	fue	 agregado	al	mismo	 tiempo	que	el	 inóculo.	En	estas	condiciones	 el	 hongo	 H1	 mostró	 la	 mejor	 capacidad	para	llevar	a	cabo	la	decoloración	del	VM	(99.3	y	98.8%	decoloración),	 seguido	 por	 el	 hongo	 SA	 (95.8	 y	 82.6%	decoloración)	y	el	hongo	HA	presentó	la	menor	capacidad	para	realizar	este	proceso	(65.7	y	69.8%	decoloración).Los	 valores	 de	 las	 constantes	 de	 velocidad	 obtenidos	confirman	 lo	 anterior.	 El	 hongo	 H1	 mostró	 la	 mayor	velocidad	 para	 llevar	 a	 cabo	 la	 decoloración	 del	 VM (k	 =	 0.3439	 y	 0.4018	 días-1),	 seguido	 por	 el	 hongo	 SA (k	=	0.1995	y	0.1157	días-1),	y	el	hongo	HA	presentó	 la	menor	velocidad	para	realizar	este	proceso	(k	=	0.0777	y	0.0986	días-1).ReferenciasAllen	 S.	 J.,	 Koumanova	 B.	 (2005).	 Decolourisation	 of	water/wastewater	 using	 adsorption.	 Journal of the University of Chemical Technology and Metallurgy,	 40:	175–192.	Ávila	J.	M.,	Sotelo	N.	P.	X.,	Castañeda	B.	M.	T.,	Cruz	C.	M.	R.,	 Vázquez	H.	 J.,	 Álvarez	 Z.	 J.	 C.	 (2014).	 Inhibición	 del	crecimiento	 de	 tres	 hongos	 ligninolíticos	 debido	 a	 la	concentración	 de	 Verde	 de	Malaquita.	Contribuciones a las Ciencias Aplicadas en Latinoamérica,	44–49.Universidad Autónoma Metropolitana, Ciudad de MéxicoRevista Tendencias en Docenciae Investigación en Química2017Año 3Número 3QV681Chmelová	 D.,	 Ondrejovič	 	 M.	 (2016).	 Purification	 and	characterization	 of	 extracellular	 laccase	 produced	by	 Ceriporiopsis subvermispora	 and	 decolorization	 of	triphenylmethane	dyes.	Journal of Basic Microbiology, 56:	1173–1182.Daneshvar	 N.,	 Ayazloo	 M.,	 Khataee	 A.	 R.,	 Pourhassan	M.	 (2007).	 Biological	 decolorization	 of	 dye	 solution	containing	 Malachite	 Green	 by	 microalgae	 Cosmarium sp.,	Bioresource Technology,	98:	1176–1182.Du	 L.	 N.,	 Zhao	 M.,	 Li	 G.,	 Xu	 F.	 C.,	 Chen	 W.	 H.,	 Zhao	 Y.	H.	 (2013).	 Biodegradation	 of	 malachite	 green	 by	Micrococcus sp.	 strain	 BD15:	 Biodegradation	 pathway	and	 enzyme	 analysis.	 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Efecto del tiempo previo de crecimiento sobre la biodegradación fúngica del verde de malaquita

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Efecto del tiempo previo de crecimiento sobre la biodegradación fúngica del verde de malaquita

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