La voltamperometría cíclica (VC) y voltamperometría diferencial de pulso (VDP) se usaron para caracterizar electroquímicamente la guanina y adenina usando un electrodo de carbón vítreo (GCE). En este trabajo se propone cuantificar la cantidad de guanina y adenina basados en una curva de calibración, previo a la cuantificación se analiza el comportamiento electroquímico de las bases a través de VC. A partir de este estudio se encontró que el rango de concentración lineal de adenina fue de 2-28 μM cuyo límite de detección (LD) y cuantificación (LC) determinado fue de 1.54 ±0.18 μM y 5.12 ±0.183 μM, respectivamente, con una sensibilidad de 0.1673 μAV-¹, mientras que para guanina, el rango de concentración lineal fue de 1-30 μM con un LD y LC de 1.64 ± 0.27 μM y 5.22 ± 0.274 μM, respectivamente, con una sensibilidad de 0.15 μAV-¹. Se reporta una metodología sencilla y reproducible para cuantificar las bases púricas del ácido desoxirribonucleico (ADN).Cyclic voltammetry (CV) and differential pulse voltammetry (DPV) were used to electrochemically characterize guanine and adenine behaviour using a glassy carbon electrode (GCE). In this work, we aim to quantify the amount of guanine and adenine based on a calibration curve. Before quantification, we study electrochemical behaviour of both purine bases using CV. The analyzed linear range of adenine was 2-28 μM, obtaining a limit of detection (LOD) and quantification (LOQ) of 1.54 ±0.18 μM and 5.12 ±0.183 μM, respectively, as well as a sensitivity of 0.1673 μAV-¹. For guanine, the linear range was 1-30 μM with a LOD and LOQ of 1.64 ± 0.27 μM, and 5.22 ± 0.274 μM, respectively, as well as a sensitivity of 0.15 μAV-¹. We report a simple and reproducible methodology to quantify purine bases of DNA

Alarcón Ángeles, Georgina

De la Cruz Morales, Karla

Gómez Hernández, Martín

Hurtado y de la Peña, Marcela

Medina López, José Raúl

Spanish

Zaloamati

Revista Tendencias en Docenciae Investigación en Química2017Universidad Autónoma Metropolitana, Ciudad de MéxicoQV659Año 3Número 3Caracterización y cuantificación electroquímica de las bases púricas de ADN sobre un electrodo de carbón vítreoDe	la	Cruz	Morales	Karla,	Gómez	Hernández	Martín,	Hurtado	Y	De	la	Peña	Marcela, Medina	López	José	Raúl,	Alarcón	Ángeles	Georgina* Universidad	Autónoma	Metropolitana	Xochimilco,	Departamento	de	Sistemas	Biológicos.	Calzada	del	Hueso	1100,	Coyoacán,	Ciudad	de	México,	04960,	México.	*Autor	para	correspondencia:	galarcon@correo.xoc.uam.mx Recibido: 19/julio/2017Aceptado: 25/octubre/2017Palabras claveElectrodo	de	carbón	vítreo,	cuantificación,	bases púricas	del	ADNKeywordsGlassy	carbon	electrode,	quantification,	purine	bases	of	DNA   RESUMENLa	 voltamperometría	 cíclica	 (VC)	 y	 voltamperometría	 diferencial	 de	pulso	(VDP)	se	usaron	para	caracterizar	electroquímicamente	la	guanina	y	adenina	usando	un	electrodo	de	carbón	vítreo	(GCE).	En	este	trabajo	se	 propone	 cuantificar	 la	 cantidad	 de	 guanina	 y	 adenina	 basados	en	 una	 curva	 de	 calibración,	 previo	 a	 la	 cuantificación	 se	 analiza	 el	comportamiento	electroquímico	de	las	bases	a	través	de	VC.	A	partir	de	este	estudio	se	encontró	que	el	rango	de	concentración	lineal	de	adenina	fue	 de	 2-28	 µM	 cuyo	 límite	 de	 detección	 (LD)	 y	 cuantificación	 (LC)	determinado	fue	de	1.54	±0.18	μM	y	5.12	±0.183	µM,	respectivamente,	con	una	sensibilidad	de	0.1673	μAV-1,	mientras	que	para	guanina,	el	rango	de	concentración	 lineal	 fue	de	1-30	µM	con	un	LD	y	LC	de	1.64	±	0.27	μM	y	5.22	±	0.274	µM,	respectivamente,	con	una	sensibilidad	de	0.15	μAV-1. Se	reporta	una	metodología	sencilla	y	reproducible	para	cuantificar	las	bases	púricas	del	ácido	desoxirribonucleico	(ADN).ABSTRACT Cyclic	voltammetry	(CV)	and	differential	pulse	voltammetry	(DPV)	were	used	to	electrochemically	characterize	guanine	and	adenine	behaviour	using	a	glassy	carbon	electrode	(GCE).	In	this	work,	we	aim	to	quantify	the	amount	of	guanine	and	adenine	based	on	a	calibration	curve.	Before	quantification,	we	study	electrochemical	behaviour	of	both	purine	bases	using	CV.	The	analyzed	linear	range	of	adenine	was	2-28	μM,	obtaining	a	 limit	 of	 detection	 (LOD)	 and	 quantification	 (LOQ)	 of	 1.54	 ±0.18	 μM and	5.12	±0.183	µM,	respectively,	as	well	as	a	sensitivity	of	0.1673	μAV-1.	For	guanine,	the	linear	range	was	1-30	μM	with	a	LOD	and	LOQ	of	1.64	±	0.27	μM,	and	5.22	±	0.274	μM,	respectively,	as	well	as	a	sensitivity	of	0.15	μAV-1.	We	report	a	simple	and	reproducible	methodology	to	quantify	purine	bases	of	DNA.Universidad Autónoma Metropolitana, Ciudad de MéxicoRevista Tendencias en Docenciae Investigación en Química2017Año 3Número 3QV660Introducción El	 ácido	 desoxirribonucleico	 (ADN),	 juega	 un	 papel	importante	 en	 el	 proceso	 de	 vida	 debido	 a	 que	 lleva	consigo	la	información	hereditaria	y	las	instrucciones	para	la	 síntesis	 biológica	 de	 proteínas	 y	 enzimas,	 cada	 hebra	está	 compuesta	 por	 bases	 púricas:	 guanina,	 adenina,	 y	pirimídicas:	timina	y	citosina;	todas	electroactivas.	Debido	a	 la	 relativa	 facilidad	 con	 la	 que	 se	oxidan,	 la	 guanina	 y	adenina	son	las	más	estudiadas	(Gilmartin	y	Hart,	1992).La	 oxidación	 de	 los	 ácidos	 nucleicos	 pertenece	 a	 uno	de	 los	 tipos	 de	 daño	 al	 ADN	más	 común	 por	 especies	reactivas	 de	 oxígeno	 (ROS)	 (Zitka	 et	 al.,	 2013).	 Debido	a	 la	 existencia	 de	 un	 parecido	 entre	 las	 reacciones	electroquímicas	y	las	biológicas	se	puede	asumir	que	la	oxidación	que	se	lleva	a	cabo	en	la	superficie	del	electrodo	y	en	sistemas	biológicos	sigue	principios	similares.	En	 años	 recientes,	 muchos	 estudios	 han	 tenido	 por	objetivo	 el	 desarrollar	 métodos	 suficientemente	selectivos,	 sensibles,	 precisos,	 exactos	 y	 baratos	 para	la	 detección	 rápida	 de	 analitos.	 Entre	 las	 técnicas	analíticas,	 destacan	 los	 métodos	 electroquímicos,	 los	cuales	proveen	resultados	confiables	y	rápidos,	mientras	que	 consumen	 pequeñas	 cantidades	 de	 reactivos	 y	generalmente	 se	 disminuye	 la	 complicada	 preparación	de	la	muestra.	Además	las	técnicas	electroquímicas	son	capaces	 de	 detectar	 y	 cuantificar	 la	 interacción	 entre	un	 producto	 de	 reducción	 y	 su	 blanco	 (por	 ejemplo	 la	interacción	 fármaco-metabolito-ADN)	 debido	 a	 que	la	 interacción	 generará	modificaciones	 en	 la	 respuesta	corriente-voltaje	(Tocher	y	Edwards,	1994).	Por	ello,	esta	es	una	alternativa	viable	en	el	desarrollo	de	la	detección	y	cuantificación	de	diversos	analitos	(De	Assis	et	al.,	2014).Por	 lo	 anterior,	 se	 ha	 planteado	 utilizar	 un	 electrodo	 de	carbón	vítreo	(GCE),	que	por	su	bajo	costo,	en	combinación	con	 las	 técnicas	 electroquímicas	 son	 desde	 el	 punto	 de	vista	económico	(Huai-Sheng	et	al.,	2002;	Hongying	et	al.,	2008),	más	accesibles	que	los	métodos	tradicionales,	como	cromatografía	de	alta	resolución.	En	este	trabajo	se	propone	cuantificar	la	cantidad	de	guanina	y	adenina	basados	en	una	curva	de	calibración	de	las	mismas;	previo	a	la	cuantificación	se	analiza	el	comportamiento	electroquímico	de	las	bases	a	través	de	voltamperometría	cíclica	(VC).Metodología La	guanina	y	adenina	se	obtuvieron	de	Sigma	Aldrich.	Las	soluciones	 stock	 se	 prepararon	 en	 agua	 destilada	 libre	 de	iones,	 a	 partir	 de	 las	 cuales	 se	 prepararon	 las	 diferentes	concentraciones	 por	 dilución	 de	 la	 cantidad	 apropiada.	 La	solución	de	electrolito	soporte	fue	preparada	usando	reactivos	de	grado	analítico	y	agua	purificada	de	un	sistema	Millipore	Simpack®	de	Merck.	Los	microvolúmenes	 fueron	medidos	usando	micropipetas	(Transferpette®	de	Brand,	Finnpipette	de	Labsystems,	Epperndorf,	y	Socorex).	La	medición	de	pH	se	llevó	a	cabo	con	un	potenciómetro	Corning	340.	Todos	 los	 experimentos	 se	 realizaron	 a	 temperatura	ambiente	(25	±	1	°C).Los	 experimentos	 se	 realizaron	 en	 un	 equipo	 Autolab	con	 software	Nova	 1.7.	 Las	mediciones	 fueron	 llevadas	a	 cabo	 usando	 un	 electrodo	 de	 trabajo	 (ET)	 de	 carbón	vítreo,	un	electrodo	de	Ag/AgCl	como	referencia	(ER),	y	un	electrodo	de	carbono	como	electrodo	auxiliar	(EA).	Todos	 los	 experimentos	 se	 llevaron	 a	 cabo	 en	 solución	amortiguadora	de	acetatos	100	mM,	pH=	4.3	±	0.1,	y	NaCl	10	mM	como	electrolito	soporte.Caracterización electroquímica de guanina y adenina mediante VC y VDP La	 caracterización	 del	 proceso	 electroquímico	 de	 la	adenina	y	la	guanina	fue	realizada	usando	VC	y	VDP.	La	VC,	se	llevó	a	cabo	mediante	mediciones	de	una	solución	de	guanina	500	μM	y	de	adenina	100	μM,	a	una	velocidad	de	barrido	de	100	mVs-1.	Las	mediciones	de	VDP	de	guanina	y	adenina	se	realizaron	a	una	concentración	de	100	μM	para	ambos	compuestos.El	estudio	de	velocidad	se	llevó	a	cabo	mediante	VC,	bajo	las	siguientes	condiciones	voltamperométricas:	ventana	de	potencial:	iniciando	en	el	potencial	de	corriente	nula	hasta	1.5	V	(para	adenina)	y	a	1	V	(para	guanina).	El	 rango	 de	 las	 velocidades	 de	 estudio	 fue	 de	 10	 a	1000 mVs-1.	 La	 concentración	 analizada	 de	 adenina	 y	guanina	 fue	 de	 100	 μM.	 En	 la	 figura	 1,	 se	 detallan	 los	electrodos	 utilizados	 para	 las	mediciones,	 un	 esquema	del	 funcionamiento	del	electrodo	así	como	la	respuesta	electroquímica	de	la	oxidación	de	una	de	las	bases.Figura 1. A.	 Electrodos:	 auxiliar	 (EA),	 de	 trabajo	 (ET)	 y	 de	referencia	 (ER).	 Celda	 típica	 de	 3	 electrodos	 usados	 en	 las	mediciones,	 ET	 con	 diámetro	 de	 3	 mm.	 B.	 Representación	esquemática	 del	 funcionamiento	 del	 electrodo.	 C.	 VDP	 de	 la	respuesta	electroquímica	de	la	oxidación	de	guanina.Universidad Autónoma Metropolitana, Ciudad de MéxicoRevista Tendencias en Docenciae Investigación en Química2017Año 3Número 3QV661Cuantificación de bases púricas mediante VDPCurva de calibración de adeninaSe	 realizó	 una	 curva	 de	 calibración	 de	 adenina	 y	guanina	 en	 un	 rango	 de	 concentraciones	 de	 2	 μM	 a	28	 µM	 y	 1	 a	 30	 µM	 respectivamente.	 Las	 condiciones	experimentales	 fueron	 las	siguientes:	potencial	 inicial,	0	V;	potencial	final,	1.2	V	y	1	V,	para	adenina	y	guanina	respectivamente;	 velocidad	 de	 barrido	 12	mVs-1	 para	ambos	compuestos.Resultados y discusiónCaracterización electroquímica de guanina y adenina mediante VC y VDP El	voltamperograma	cíclico	de	adenina	se	muestra	en	la	figura	2.	En	el	gráfico	se	puede	observar	un	pico	anódico	a	 1.29	V	 con	 una	 corriente	 de	 pico	 de	 9.36	 μA,	 la	 cual	corresponde	a	la	oxidación	de	la	adenina.	Debido	a	que	no	se	observó	un	pico	con	corrientes	negativas	cuando	se	 invirtió	 el	 potencial,	 se	 considera	 como	 un	 proceso	irreversible.	Figura 2. VC de adenina 100 µM	en	 solución	 amortiguadora	pH=	4.3	±	0.1	con	NaCl	10	mM	como	electrolito	soporte.	Velocidad	de	barrido:	100	mV	mVseg-1Por	otro	lado,	el	voltamperograma	cíclico	de	guanina,	en	figura	3,	muestra	un	pico	anódico	a	0.68	V,	y	una	corriente	de	1.64	μA.	No	se	observó	pico	de	reducción	cuando	se	invirtió	el	potencial,	por	lo	que	la	oxidación	tiene	características	de	un	proceso	irreversible.Figura 3. VC	de	guanina	500	µM	en	solución	amortiguadora	pH=	 4.3	 ±	 0.1	 con	 NaCl	 10	 mM	 como	 electrolito	 soporte.	Velocidad	de	barrido:	100	mVs-1La	 caracterización	 electroquímica,	 tambien	 se	 realizó	mediante	 VDP.	 Para	 adenina,	 figura	 4A,	 el	 potencial	 de	pico	anódico	relacionado	con	su	oxidación	fue	de	1.17 V con	una	corriente	de	pico	de	6.52	μA.	Por	otra	parte,	el	VDP	de	guanina	que	se	observa	en	la	figura	4B,	muestra	que	 la	posición	del	pico	en	0.87	V	con	una	corriente	de	pico	de	11.37	µA.Estudio de VelocidadSe	 realizaron	 estudios	 con	 el	 objetivo	 de	 conocer	 el	comportamiento	 electroquímico	 de	 la	 adenina	 usando	VC.	 Para	 las	 respuestas	 obtenidas,	 se	 observó	 que	 la	corriente	incrementa	con	la	raíz	cuadrada	de	la	velocidad	de	barrido,	como	se	muestra	en	la	figura	5.	De	 acuerdo	 a	 la	 ecuación	 de	 Randles-Sevcik,	 para	 una	reacción	 irreversible,	 la	 ecuación	 encontrada	 fue	 la	siguiente:	Ipc=0.8514v1/2(mVs-1)+1.1821;	R2 =0.9901Universidad Autónoma Metropolitana, Ciudad de MéxicoRevista Tendencias en Docenciae Investigación en Química2017Año 3Número 3QV662Figura 4. A.	VDP	de	adenina	100	µM	en	solución	amortiguadora	pH=	4.3	±	0.1	con	NaCl	10	mM	como	electrolito	soporte	y	B. VDP	de	una	solución	de	guanina	100	µM.	Así	como	sus	respectivos	blancos	(color	negro).Figura 5.	Estudio	de	velocidad	mediante	VC	de	adenina	100	µM en	solución	amortiguadora	pH=	4.3	±	0.1	con	NaCl	10	mM	como	electrolito	soporte.	Con	 base	 en	 lo	 anterior,	 se	 confirmó	 que	 la	 adenina	presenta	 un	 proceso	 controlado	 por	 la	 difusión	 y	 que	no	hay	evidencia	de	un	proceso	adsortivo,	 la	oxidación	tiene	 características	de	un	proceso	 irreversible,	 debido	a	 la	 ausencia	 de	 picos	 catódicos	 cuando	 se	 invierte	el	 potencial.	 Por	 tanto,	 la	 velocidad	 de	 la	 oxidación	electroquímica	de	la	adenina	es	controlada	por	la	difusión	de	las	especies	electroactivas.Los	 resultados	 obtenidos	 del	 estudio	 electroquímico	de	guanina	mediante	VC	se	muestran	en	 la	 figura	6;	de	esta	se	observa	que	 la	corriente	 incrementa	con	 la	 raíz	cuadrada	de	la	velocidad	de	barrido.	De	acuerdo	a	la	ecuación	de	 Randles-Sevcik,	 para	 una	 reacción	 irreversible,	 la	ecuación	 que	 describe	 el	 aumento	 de	 la	 corriente	 en	función	de	la	velocidad	es	la	siguiente:	Ipc=0.0899v1/2(mVs-1)-0.3653,	R2 =0.97Figura 6.	Estudio	de	velocidad	mediante	VC	de	guanina	500	µM en	solución	amortiguadora	pH=	4.3	±	0.1	con	NaCl	10	mM	como	electrolito	soporte.	Este	 comportamiento	 es	 atribuido	 a	 un	 proceso	controlado	por	 la	difusión	de	 la	guanina,	por	 lo	que	no	hay	evidencia	de	un	proceso	adsortivo.	Linealidad de bases púricas para su cuantificación durante la interacción con especies reactivas de oxígeno mediante VDPA	 partir	 de	 los	 VDP	 obtenidos	 de	 la	 variación	 de	concentración	 de	 las	 bases	 púricas,	 adenina	 y	 guanina,	se	 encontró	 que	 las	 corrientes	 de	 pico	 aumentan	linealmente	con	el	incremento	en	la	concentración.Curva de calibración de adeninaLos	 VDP	 obtenidos	 al	 incrementar	 la	 concentración	de	adenina	muestran	un	rango	 lineal	de	2	µM a 28 µM,	como	 se	 muestra	 en	 la	 figura	 7.	 Se	 obtuvo	 un	 límite	de	detección	y	 cuantificación	1.54	±	0.18	μM	y	5.12	±	0.183	µM,	respectivamente,	así	como	una	sensibilidad	de	0.1673	μAV-1.	La	relación	lineal	está	dada	por	la	siguiente	ecuación:	Ipa	(μA)=	0.1673c	(μM)+0.0117;	R2=0.9988Universidad Autónoma Metropolitana, Ciudad de MéxicoRevista Tendencias en Docenciae Investigación en Química2017Año 3Número 3QV663Tabla1.	Comparación	de	 las	principales	características	de	diferentes	 técnicas	para	 las	que	se	ha	reportado	 la	 cuantificación	de	adenina	y	guanina.Analito Técnica Electrodo Sensibilidad Linearidad LD ReferenciaAVDP Funcionalizado	con	grafeno0.0075 M0.5–200M50 nMKe-Jing	et	al.,	2011G 0.0065M 25 nMAVDP PTH/NPAu/MWNTs0.5796 µM 0.01-10 µM 8.0 nMHongying	et	al.,	2008G 0.1253	µM 0.05–5	µM 1 nMASWV pretratado	1.96 µM 0.08–2.72	µM3	nM Huai-Sheng		et	al.,	20021.02 µM 1 µMG1.96 µM 0.08-1 µM1.18 µM 1-2.72 µMASWV poly(negro	de	ericromo	T)15817 µM 0.05–1.00	μM 0.017μMYouli	et	al.,	2013G 23421	µM 0.025–1.00	μM 0.008 µMASWV polimelamina NR0.1–60	µM 0.07 µMXiao	et	al.,	2012G 0.1–50	µM 0.08 µMAHPLC -0.173	mg/L5–50	mg/L1.75	mg/L García	del	Moral	et	al.,	2005G 0.292	mg/L 1.17	mg/LAGC - NR 	0.5–50	μmol/	L		0.08	μmol/LBrohi		et	al.,	2016G 	0.01	μmol/LVDP:	Voltamperometría	diferencial	de	pulso,	SWV:	voltamperometría	de	onda	cuadrada,	HPLC:	cromatografía	de	líquidos	de	alta	resoluciónn,	GC:			GC:	Cromatografía	de	gases,	A:	Adenina,	G:	Guanina,		PTH/NPAu/MWNTs	Nanopartículas	de	poliuretano	/	oro	/	nanotubos	de	carbono	multicapa.	NR=	No	reporta.Figura 7.	Curva	de	calibración	de	adenina	en	solución	amortiguadora	pH=	4.3	±	0.1	con	NaCl	10	mM	como	electrolito	soporte.	Curva de calibración de guanina El	rango	de	concentraciones	de	la	curva	analizado	fue	de	1	 a	30	µM,	 el	 cual	 se	observa	 en	 la	 figura	8.	 Se	 obtuvo	un	 límite	 de	 detección	 y	 de	 cuantificación	 de	 1.64	 ±	0.27  μM	y	5.22	±	0.274	µM,	respectivamente,	así	como	una	 sensibilidad	 de	 0.15	 μAV-1.	 La	 relación	 lineal	 está	dada	por	la	siguiente	ecuación:	Ipa(μA)=	0.1526c	(μM)+	0.1959,	R2=0.9932Figura 8. Curva	 de	 calibración	 de	 guanina	 en	 solución	amortiguadora	pH=	4.3	±	0.1	con	NaCl	10	mM	como	electrolito	soporte.	En	la	tabla	1,	se	recopilan	las	características	principales	de	 las	 técnicas	 	 usadas	 para	 realizar	 la	 cuantificación	de	 adenina	 y	 guanina.	 	 La	 comparación	 de	 éstas	 con	nuestro	método,	indica	que		es	rápida		y	presenta	bajos	límites	 de	 detección	 en	 comparación	 con	 las	 técnicas	cromatográficas	(García	del	Moral	et	al.,	2005;	Brohi et al.,	2016),	mientras	que	con	técnicas	electroquímicas,	la	modificación	de	 los	electrodos	sin	 lugar	a	duda	mejora	Universidad Autónoma Metropolitana, Ciudad de MéxicoRevista Tendencias en Docenciae Investigación en Química2017Año 3Número 3QV664sustancialmente	 el	 límite	 de	 detección.	 Para	 fines	prácticos,	 el	uso	del	 electrodo	aquí	 empleado	hace	que	la	 técnica	 sea	 sencilla,	 fácil	 y	 rápida,	 por	 lo	que	 es	una	alternativa	viable	para	la	detección	de	las	bases	púricas	adenina	y	guanina.ConclusionesBasados	 en	 los	 resultados	 de	 VC,	 se	 encontró	 que	 la	velocidad	de	la	oxidación	electroquímica	de	la	adenina	es	controlada	por	la	difusión	de	las	especies	electroactivas	en	la	superficie	del	electrodo	de	carbón	vítreo.	Por	otro	lado,	dadas	las	ventajas	que	presenta	la	técnica	de	VDP,	esta	se	usó	para	la	construcción	de	curvas	de	calibración	de	 las	 bases	 púricas	 y	 establecer	 la	 linealidad	 para	 su	posterior	 cuantificación	 durante	 su	 interacción	 con	especies	reactivas	de	oxígeno.	Cabe	mencionar	que	el	comportamiento	electroquímico	de	estas	bases	en	un	electrodo	de	carbón	vítreo	sin	previa	modificación,	no	se	ha	reportado.	Además	se	reporta	una	metodología	sencilla	y	reproducible	para	cuantificar	los	biomarcadores	de	daño	oxidativo	al	ADN.Agradecimientos Lo	 autores	 agradecen	 PRODEP	 por	 el	 apoyo	 otorgado	durante	la	realización	de	este	proyecto.	KDCM	agradece	al	CONACYT	por	la	beca	otorgada	(beca	número	467906).ReferenciasBrohi	R.	O.	Z.,	Khuhawar	M.	Y.,	Jahangir	T.	M.	(2016).	GC-FID	determination	of	nucleobases	guanine,	adenine,	cytosine,	and	thymine	from	DNA	by	precolumn	derivatization	with	isobutyl	chloroformate.	J. Anal. Sci. 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Caracterización y cuantificación electroquímica de las bases púricas de ADN sobre un electrodo de carbón vítreo

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Caracterización y cuantificación electroquímica de las bases púricas de ADN sobre un electrodo de carbón vítreo

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