The most appropriate conditions for in vitro nitrato reductase activity (NRA) assay in leaf tissue of two sugarcane varieties (NA 56 - 79 and CB 47 - 355) were studied. Above 50 mM NO-3, the NRA declined considerably. Such effect of high KNO3 levels on NRA was probably not related to the osmotic potential of the medium. In the absence of exogeneous NO-3, the NRA was negligible. Maximal NRA was obtained at pHs 7,5 and 8,5 for the varieties CB 47-355 and NA 56- 79, respectively. Maximal reduction of nitrate to nitrite was observed at 32° C for NA 56-79 and between 32°C and 37° C for CB 47 - 355. The maximal NRA occurred in the +3, +4 and +5 leaf (fully expanded leaves).Neste trabalho foram determinadas as condições mais apropriadas de ensaio in vitro da redutase de nitrato em tecidos foliares de plantas de duas variedades de cana-de-açúcar (NA 56-79 e CB 47-355). Concentrações de nitrato no meio de reação superiores a 50 mM induziram uma queda na atividade enzimática. A inibição no processo e redução de nitrato por altas concentrações de KNO3 parece não ser decorrente da diminuição do potencial osmótico do meio de reação. Não foi observada qualquer atividade da redutase de nitrato quando os tecidos foliares foram ensaiados em meio de reação sem nitrato exógeno. As atividades máximas da redutase de nitrato foram alcançadas nos pHs 7,5 e 8,5, respectivamente, para as variedades CB 47-355 e NA 56-79. A taxa máxima de redução de nitrato a nitrito foi determinada nas temperaturas de 32°C, para a variedades NA 56-79, e entre 32°C a 37°C, para a variedade CB 47-355. A atividade da enzima atingiu seu valor máximo nas folhas + 3, +4 e +5 (folhas completamente expandidas)
