Comparación de algunos métodos de procesamiento para Fonsecaea pedrosoi al microscopio electrónico de rastreo

Abstract

Some conventional procedural methods were evaluated for the ultrastructural study of fungi by scanning electron microscope (SEM). Microcultures of Colombian strains of Fonsecaea pedrosoi isolated from patients injuries from the Federico Lleras Acosta Dermatological Institute, Santafé de Bogotá, Colombia, were used. The results showed alterations, distortions or artifacts on the processed fungi by three of the methods used, probably dueto physical or chemical effects during the processing. Fixation with pure acrolein vapors and Os0,crystals with dehydration and high vacuum drying, avoided the loss of come structures and characteristic arrangements, was also fast, provided easy manipulation of the specimen and needed less reagents. The importance of the SEM is emphasized by the morphological, structural and taxonomical study of the fungi: the use of acrolein vapors for fixation and high vacuum drying as methodological alternatives for the processing of biological samples which are difficultto manipulate or that present easy alteration due to their high hydrophillic composition.Se evaluaron cuatro métodos de procesamiento para el estudio ultra estructural de hongos al microscopio electrónico de rastreo (MER). Se utilizaron microcultivos de cepas colombianas de Fonsecaea pedrosoi aisladas de lesiones de pacientes en el Instituto Dermatológico Federico Lleras Acosta, Santafé de Bogotá. Los resultados mostraron alteraciones, distorsiones o artificios en los hongos procesados por tres de los métodos utilizados, debido probablemente a los efectos físicos o químicos durante el procesamiento. Se propone el método de fijación con vapores de acroleína pura y cristales de OSO. con deshidratación y secado en alto vacío que evitó la pérdida de estructuras y conservo los arreglos característicos, presentando rapidez, fácil manipulación del espécimen y disminución de reactivos. Se destaca la importancia del MER en el estudio morfológico, estructural y taxonómico de los hongos y el uso de los vapores de acroleína para la fijación y el alto vacío para el secado, como alternativas metodológicas para el procesamiento de especímenes biológicos de difícil manipulación o que presentan fácil alteración por su composición higrófila