Boyer, S.

Dahyot, S

Frébourg, N.

Lemée, L.

Lepoittevin, Y

Pestel-Caron, M.

Skalli, S

Soares, A.

French

Archive Ouverte en Sciences de l'Information et de la Communication

HAL Id: hal-02269302
https://hal-normandie-univ.archives-ouvertes.fr/hal-02269302
Submitted on 22 Aug 2019
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Staphylocoques et autres bactéries à gram positif
A. Soares, L. Lemée, Y Lepoittevin, S. Boyer, N. Frébourg, S Skalli, S
Dahyot, M. Pestel-Caron
To cite this version:
A. Soares, L. Lemée, Y Lepoittevin, S. Boyer, N. Frébourg, et al.. Staphylocoques et autres bactéries
à gram positif : Détection de la pénicillinase de Staphylococcus aureus : quand cela paraît flou.. 36ème
Réunion Interdisciplinaire de Chimiothérapie Anti-Infectieuse (RICAI 2016), Dec 2016, Paris, France.
￿hal-02269302￿
Introduction 
Détermination de la sensibilité des souches de Staphylococcus 
aureus vis-à-vis de la pénicilline G (péni G) :  
 méthode de diffusion en milieu gélosé : mesure du diamètre 
d'inhibition et aspect de la bordure  
 automate Vitek-2 mais vérification de l'absence de pénicillinase 
lorsque la CMI de la péni G est ≤0,12 mg/L.  
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Méthodes 
Résultats 
Détection de la pénicillinase de Staphylococcus aureus : quand cela paraît flou. 
A. Soares1,2, L. Lemée1,2, Y. Lepoittevin1, S. Boyer1,2, N. Frebourg1,2, S. Skalli1,2, S. Dahyot1,2, M. Pestel-Caron1,2 
1 Laboratoire de Bactériologie, Centre hospitalier universitaire de Rouen ; 2 Groupe de Recherche sur l'Adaptation Microbienne (EA 2656), Normandie Univ, 
UNIROUEN, IRIB, 76000 Rouen, France 
Staphylocoques et autres 
bactéries à gram positif 
326 
Dr Anaïs Soares 
Service de microbiologie 
CHU de Rouen  
anais.soares@chu-rouen.fr 
Figure 1 : CMI de la pénicilline G (mg/L) obtenues par automate Vitek-2. Figure 2 : Diamètres d’inhibition de la pénicilline G (mm) 
déterminés par méthode de diffusion en milieu gélosé 
Figure 3 : Diamètres d’inhibition de la pénicilline G (mm) en fonction de la 
CMI obtenue par automate Vitek-2 
Les résultats S obtenus par le Vitek-2 pour la péni G nécessitent un contrôle par diffusion en milieu gélosé. La mesure du seul diamètre 
d'inhibition semble être une méthode fiable tandis que l'appréciation de l'aspect de la bordure est parfois difficile entrainant une augmentation 
du nombre de souches catégorisées R à tort. Même si les souches S à la péni G sont encore assez rares, l’amoxicilline reste un recours 
intéressant dans certaines infections sévères. Il parait donc nécessaire de pouvoir détecter ces souches à l’aide de méthodes fiables. 
 
Conclusion 
CA-SFM/EUCAST 2016 
S : diamètre >26 mm et bordure floue ou 
CMI <0,12 mg/L 
R : diamètre <26 mm ou ≥26mm et bordure 
nette ou CMI >0,12 mg/L 
 
50 souches 
consécutives de 
 S. aureus avec une 
CMI péni G ≤0,12 mg/L 
(Vitek-2) 
 
S à la péni G évaluée par diffusion en milieu gélosé 
Méthodologie CA-SFM 2016 : 
Mesure du diamètre d’inhibition  
et aspect de la bordure 
 
Recherche du gène blaZ par PCR 
en temps réel 
 
 
Objectif : confrontation du Vitek-2 à la méthode de diffusion en 
milieu gélosé, avec la PCR temps réel blaZ comme référence, 
pour la détermination de la sensibilité (S) à la péni G 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
13 
32 
5 
0 
5 
10 
15 
20 
25 
30 
35 
≤0,03 0,06 0,12 
N
o
m
b
re
 d
e
 s
o
u
c
h
e
s
 
CMI de la pénicilline G (mg/L) 
0 
2 
4 
6 
8 
10 
12 
17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 
N
o
m
b
re
 d
e
 s
o
u
ch
e
s 
Diamètres d'inhibition de la pénicilline G (mm) 
0 
2 
4 
6 
8 
10 
12 
17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 
N
o
m
b
re
 d
e
 s
o
u
ch
e
s 
Diamètres d'inhibiton de la pénicilline G (mm) 
0,12 
0,06 
0,03 
0 
2 
4 
6 
8 
10 
12 
17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 
N
o
m
b
re
 d
e
 s
o
u
ch
e
s 
Diamètres d'inhibition de la pénicilline G (mm) 
PCR blaZ positive 
PCR blaZ négative 
0 
2 
4 
6 
8 
10 
12 
26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 
N
o
m
b
re
 d
e
 s
o
u
c
h
e
s
 
Diamètres d'inhibition de la pénicilline G (mm) 
floue 
nette 
Figure 4 : Diamètres d’inhibition de la pénicilline G en fonction des 
résultats de la PCR blaZ 
Figure 5 : Diamètres d’inhibition de la pénicilline G et aspect de la 
bordure pour les souches dont le diamètre d’inhibition est ≥26 mm 
 
Diamètre d’inhibition médian = 33 mm 
 
 
 12 souches avec un diamètre ≥26 mm + bordure 
nette observée -> souches catégorisées R  
 PCR blaZ négative  
 27% de résultats faux positifs (« faux R ») par 
l’association diamètre d’inhibition et aspect de la bordure 
CMI50 de la péni G = 0,06 mg/L 
 
5 souches avec un diamètre d’inhibition <26 mm (R) 
pour des CMI égales à 0,06 [n=2] ou 0,12 mg/L [n=3] (S) 
 
 PCR blaZ positive pour 5 souches dont le diamètre 
était <26 mm mais CMI = 0,06 ou 0,12 mg/L 
Toutes les souches avec une CMI ≤0,03 mg/L étaient 
toujours S (PCR blaZ négative) 
10% de faux négatifs (« faux S ») avec le Vitek-2 
 
 Au final, 45/250 souches (18%) de S. aureus avec antibiogramme étaient rendues S à la péni G, au laboratoire, sur la période de recueil.  
 


Staphylocoques et autres bactéries à gram positif: Détection de la pénicillinase de Staphylococcus aureus : quand cela paraît flou.

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Staphylocoques et autres bactéries à gram positif: Détection de la pénicillinase de Staphylococcus aureus : quand cela paraît flou.

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