Dahyot, S

Dubos, C.

Lebeurre, J

Pestel-Caron, M.

French

Archive Ouverte en Sciences de l'Information et de la Communication

HAL Id: hal-02266192
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Caractérisation du système de sécrétion Ess/Type VII
(SST7) chez Staphylococcus lugdunensis
C. Dubos, J Lebeurre, S Dahyot, M. Pestel-Caron
To cite this version:
C. Dubos, J Lebeurre, S Dahyot, M. Pestel-Caron. Caractérisation du système de sécrétion Ess/Type
VII (SST7) chez Staphylococcus lugdunensis. Journée Normande de Recherche Biomédicale, Nov
2017, Caen, France. ￿hal-02266192￿
P128 Caractérisation du système de sécrétion Ess/Type 
VII (SST7) chez Staphylococcus lugdunensis 
Une caractérisation du SST7 a été réalisée pour la première fois chez SL. Deux organisations transcriptionelles différentes des gènes du locus ess 
ont été retrouvées. De plus, le locus ess fait preuve d'une grande diversité génétique chez SL, le transposon recherché au sein du locus ess étant associé à 
certains STs et/ou CCs. Le rôle du SST7 et notamment l'implication du gène essC dans la virulence est en cours d'investigation in vivo et in vitro par 
l'analyse comparée de la virulence de la souche parentale, mutante et complémentée.  
	  
C. Dubos1, J. Lebeurre1, S. Dahyot1,2, M. Pestel-Caron1,2 
1Laboratoire de Bactériologie du Centre Hospitalier Universitaire de Rouen, 2Groupe de Recherche sur  
l’adaptation microbienne (GRAM) EA2656, Normandie Univ, UNIROUEN, UNICAEN, 76000 Rouen, France. 
Introduction - Objectifs 
Comme de nombreux staphylocoques à coagulase négative (SCN), 
Staphylococcus lugdunensis (SL) est une bactérie commensale de la peau et 
des muqueuses de l'homme. Cependant le pouvoir pathogène de cette espèce 
est souvent considéré comme plus proche de celui de Staphylococcus aureus 
(SA) que de celui des autres SCN. Les infections à SL présentent un tel 
caractère agressif et destructeur qu'il est souvent nécessaire de recourir à des 
procédures de drainage ou de chirurgie pour en limiter la mortalite ́. Quelques 
facteurs de virulence ont été décrits, mais aucune donnée moléculaire 
n'explique une telle pathogénicité. L’analyse comparative des génomes 
complets de six souches de SL par le GRAM a mis en évidence la présence 
d’un cluster de gènes homologue au locus ess de SA (Fig. 1). Chez SA, cet 
opéron code le SST7 et s'est révélé essentiel à la virulence (1) (2). 
 
Matériel et Méthodes 
Résultats 
=> Caractérisation du SST7 chez SL : déterminant de la virulence de cette espèce ? 
	  
Fig. 1 : Locus ess identifié chez les six souches de SL séquencées par le GRAM.  
1er volet 
Détermination de l’organisation 
transcriptionnelle du locus ess par RT-PCR 
chez sept souches de SL (DSM4804 et les six 
souches préalablement séquencées) 
2ème volet  
Analyse de la diversité génétique  
du locus ess parmi une collection de 94 souches 
de SL caractérisées par MLST et MVLST : 
Recherche de la présence d’un transposon dans 
le locus ess par PCR 
3ème volet  
Construction et caractérisation de la virulence 
in vitro et in vivo d’un mutant ΔessC  
chez une souche invasive de SL isolée d’un abcès 
de sein (DSM 4804) 
 MLST = MultiLocus Sequence Typing 
MVLST = MultiVirulence Locus Sequence Typing 
	  
1er volet : Organisation transcriptionnelle  
Deux organisations ont été retrouvées chez les sept souches étudiées (Fig. 2) : 
-  DSM4804 : les six gènes étudiés sont sur la même unité transcriptionnelle 
-  SL13, SL29, SL55, SL117, SL118 et SL122 : les six gènes étudiés sont sur 
deux unités transcriptionnelles différentes 
Fig. 2 : Organisation transcriptionnelle du locus ess chez sept souches de SL.   
2ème volet : Diversité génétique du locus ess 
Le transposon a été retrouvé : 
-  Dans le locus ess et en amont du gène cap : chez toutes les 
souches de Sequence-Type (ST) 1 et chez deux souches de ST2  
-  En amont du gène cap seulement : chez la totalité des souches 
de Complexe Clonal (CC) 1 et la majorité des souches de CC2 
-  À aucun endroit du génome : chez les souches de ST3, ST4, 
ST5 et de ST10 
Fig. 3 : Dendrogramme montrant les relations génétiques des 94 isolats de SL basé sur 
l’analyse MLST, et la présence du transposon. 
Conclusion 
3ème volet : Construction du mutant DSMΔessC 
Le gène essC de 5kb a été délété chez la souche pathogène DSM4804. Le rôle 
du SST7 dans la virulence reste à investiguer par des tests de virulence 
comparée de la souche mutée et de la souche parentale : 
In vitro 
-  Test de cytotoxicité cellulaire sur cellule HaCaT (kératinocytes humains) 
In vivo 
-  Test de Fast killing chez Caenorhabditis elegans 
-  Modèle murin d’endocardite 
(1)  Burts M. L. et al. EsxA and EsxB are secreted by an ESAT-6-like system that is required for the pathogenesis of Staphylococcus aureus infections. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102, 1169-1174 (2005).   
(2)  Kneuper H. et al. Heterogeneity in ess transcriptionnal organization and variable contribution of the Ess/Type VII protein secretion system to virulence across closely related Staphylococcus aureus strains. Mol Microbiol. 93, 
928-943 (2014). 


Caractérisation du système de sécrétion Ess/Type VII (SST7) chez Staphylococcus lugdunensis

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