Teniendo en cuenta que los lípidos neutros nucleares pueden representar pooles alternativos de ácidos grasos y lípidos de señalización celular, el objetivo de este trabajo fue dilucidar un modelo de organización de estos lípidos neutros.Facultad de Ciencias Médica

García de Bravo, Margarita María

González, P. N.

Layerenza, Juan Pablo

Polo, Mónica Patricia

Sisti, María Susana

Ves Losada, Ana

El Servicio de Difusión de la Creación Intelectual

 
 
 
 
2010 Diciembre, 2(2): 1-1 
 
 
LAS GOTAS LIPÍDICAS NUCLEARES CONSTITUYEN UN NUEVO DOMINIO NUCLEAR  
Layerenza JP1, Gonzalez P2, García de Bravo M1, Polo M1, Sisti MS1, Ves-Losada A1,3 
 
1INIBIOLP (CCT-La Plata-CONICET-UNLP); 2Cát. Patol., Fac. Cs. Médicas, UNLP & CIC-BsAs; 3Dpto. Cs. Biol, 
Fac. Cs. Exactas, UNLP 
 
e-mail: juanlayerenza@gmail.com 
 
Introducción 
El núcleo celular (N) es la adquisición evolutiva que define a las células eucariotas, y es 
donde se lleva a cabo la replicación, la transcripción, el splicing del pre-RNAm y el 
ensamblaje de los ribosomas, entre otros procesos celulares. El N es una estructura 
altamente dinámica, formada por distintos compartimentos y dominios funcionales 
intranucleares que, a diferencia de los citoplasmáticos, no están rodeados por membranas, 
como el nucléolo, los Cuerpos de Cajal, los compartimentos de splicing-factor (Speckles), 
cuerpos de “promyelocytic leucemia oncoproteins” y los cuerpos nucleares entre otros.  
Hemos determinado que los lípidos representan el 16% de los componentes nucleares, a su 
vez el 84% corresponde a fosfolípidos (PL) y el 16% a lípidos neutros. Los PL se encuentran 
principalmente en la envoltura nuclear mientras que los lípidos endonucleares se encuentran 
enriquecidos en lípidos neutros. 
 
Objetivo 
Teniendo en cuenta que los lípidos neutros nucleares pueden representar pooles alternativos 
de ácidos grasos y lípidos de señalización celular, el objetivo de este trabajo fue dilucidar un 
modelo de organización de estos lípidos neutros. 
 
Materiales y métodos 
Con este fin se aislaron núcleos enteros (N) de células de hígado de rata y núcleos 
desprovistos de la doble membrana nuclear (Mx). La pureza de las fracciones se determinó 
por microscopía electrónica y por proteínas marcadoras. Se aplicó la técnica de aislamiento 
de gotas lipídicas (ultracentrifugacion en gradiente de sacarosa) a núcleos aislados. 
Las composiciones de lípidos se analizaron por métodos enzimáticos y charring de FeCl3-
H2SO4. 
Las composiciones de ácidos grasos se estudiaron por cromatografía gas-líquido de los 
ésteres metilícos derivados de los mismos. 
Se realizaron observaciones al microscopio electrónico por tinción negativa con ácido 
fosfotúngstico; al microscopio de campo claro con Rojo Sudán y OsO4; y al microscopio 
confocal de fluorescencia con DAPI y BODIPY 493/503. 
 
Resultados 
Se logró aislar una única banda a partir del gradiente de sacarosa. Su composición refleja 
una alta proporciónde lípidos neutros: 37% de TAG (triacilglicéridos), 34% de CE (ésteres de 
colesterol), 28% de Cho (colesterol) y 3,5% de PL. 
Las composiciones de ácidos grasos fueron las siguientes: TAG: saturados > polinosaturados 
(n-6, n-3) > monoenoicos; y CE: saturados > monoenoicos > polinosaturados (n-6, n-3). 
El contenido de la banda aislada reveló, por microscopía electrónica, la presencia de 
estructuras esféricas. 
Las observaciones al microscopio óptico (campo claro y fluorescencia) de preparados de 
núcleos con los distintos colorantes específicos para lípidos revelaron la presencia de 
dominios lipídicos nucleares. 
 
Conclusiones 
Los lípidos neutros en el interior nuclear se organizan en gotas lipídicas, en la forma de 
dominios nucleares de estuctura esférica, compatibles con las ya conocidas gotas lipídicas 
citosólicas, en las cuales los lípidos neutros conforman un core hidrofóbico y se encuentran 
rodeados por una monocapa de fosfolípidos. Poseen una composición química característica. 
 


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Las gotas lipídicas nucleares constituyen un nuevo dominio nuclear

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    2010 Diciembre, 2(2): 1-1   LAS GOTAS LIPÍDICAS NUCLEARES CONSTITUYEN UN NUEVO DOMINIO NUCLEAR  Layerenza JP1, Gonzalez P2, García de Bravo M1, Polo M1, Sisti MS1, Ves-Losada A1,3  1INIBIOLP (CCT-La Plata-CONICET-UNLP); 2Cát. Patol., Fac. Cs. Médicas, UNLP & CIC-BsAs; 3Dpto. Cs. Biol, Fac. Cs. Exactas, UNLP  e-mail: juanlayerenza@gmail.com  Introducción El núcleo celular (N) es la adquisición evolutiva que define a las células eucariotas, y es donde se lleva a cabo la replicación, la transcripción, el splicing del pre-RNAm y el ensamblaje de los ribosomas, entre otros procesos celulares. El N es una estructura altamente dinámica, formada por distintos compartimentos y dominios funcionales intranucleares que, a diferencia de los citoplasmáticos, no están rodeados por membranas, como el nucléolo, los Cuerpos de Cajal, los compartimentos de splicing-factor (Speckles), cuerpos de “promyelocytic leucemia oncoproteins” y los cuerpos nucleares entre otros.  Hemos determinado que los lípidos representan el 16% de los componentes nucleares, a su vez el 84% corresponde a fosfolípidos (PL) y el 16% a lípidos neutros. Los PL se encuentran principalmente en la envoltura nuclear mientras que los lípidos endonucleares se encuentran enriquecidos en lípidos neutros.  Objetivo Teniendo en cuenta que los lípidos neutros nucleares pueden representar pooles alternativos de ácidos grasos y lípidos de señalización celular, el objetivo de este trabajo fue dilucidar un modelo de organización de estos lípidos neutros.  Materiales y métodos Con este fin se aislaron núcleos enteros (N) de células de hígado de rata y núcleos desprovistos de la doble membrana nuclear (Mx). La pureza de las fracciones se determinó por microscopía electrónica y por proteínas marcadoras. Se aplicó la técnica de aislamiento de gotas lipídicas (ultracentrifugacion en gradiente de sacarosa) a núcleos aislados. Las composiciones de lípidos se analizaron por métodos enzimáticos y charring de FeCl3-H2SO4. Las composiciones de ácidos grasos se estudiaron por cromatografía gas-líquido de los ésteres metilícos derivados de los mismos. Se realizaron observaciones al microscopio electrónico por tinción negativa con ácido fosfotúngstico; al microscopio de campo claro con Rojo Sudán y OsO4; y al microscopio confocal de fluorescencia con DAPI y BODIPY 493/503.  Resultados Se logró aislar una única banda a partir del gradiente de sacarosa. Su composición refleja una alta proporciónde lípidos neutros: 37% de TAG (triacilglicéridos), 34% de CE (ésteres de colesterol), 28% de Cho (colesterol) y 3,5% de PL. Las composiciones de ácidos grasos fueron las siguientes: TAG: saturados > polinosaturados (n-6, n-3) > monoenoicos; y CE: saturados > monoenoicos > polinosaturados (n-6, n-3). El contenido de la banda aislada reveló, por microscopía electrónica, la presencia de estructuras esféricas. Las observaciones al microscopio óptico (campo claro y fluorescencia) de preparados de núcleos con los distintos colorantes específicos para lípidos revelaron la presencia de dominios lipídicos nucleares.  Conclusiones Los lípidos neutros en el interior nuclear se organizan en gotas lipídicas, en la forma de dominios nucleares de estuctura esférica, compatibles con las ya conocidas gotas lipídicas citosólicas, en las cuales los lípidos neutros conforman un core hidrofóbico y se encuentran rodeados por una monocapa de fosfolípidos. Poseen una composición química característica.  

http://sedici.unlp.edu.ar/bitstream/handle/10915/15540/Documento_completo__.pdf?sequence=1

Las gotas lipídicas nucleares constituyen un nuevo dominio nuclear

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