En trabajos anteriores demostramos que la segunda fase de fuerza (SFF) post-estiramiento (efecto Anrep) es la manifestación mecánica de un mecanismo autocrino/paracrino que se inicia con la liberación secuencial de angiotensina II (Ang II) y endotelina (ET) y promueve la fosforilación y consecuente activación del intercambiador Na+ /H+ cardíaco (NHE1). Las quinasas mas frecuentemente involucradas en la fosforilación y activación del NHE1 son ERK 1/2-p90 RSK . Existen evidencias experimentales que demuestran que al menos ciertos efectos de Ang II/ET son mediados por transactivación del RFCE, mecanismo que requiere activación de la tirosina quinasa citosólica SRC.Facultad de Ciencias Médica

Caldiz, Claudia Irma

Casarini, María Jesús

Chiappe de Cingolani, Gladys Ethel

Cingolani, Horacio Eugenio

Ennis, Irene Lucía

Pérez, Néstor Gustavo

Villa Abrille, María Celeste

SEDICI - Repositorio de la UNLP

 
 
 
 
2010 Octubre, 2(1): 1- 
 
1 
 
 
EL EFECTO ANREP POST-ESTIRAMIENTO DEL MIOCARDIO REQUIERE 
TRANSACTIVACIÓN DEL RECEPTOR DEL FACTOR DE CRECIMIENTO EPIDÉRMICO 
(RFCE). 
 
Autores: Villa-Abrille MC, Caldiz CI, Casarini MJ, Ennis IL, Chiappe de Cingolani G, Cingolani HE, Pérez NG. 
Lugar de Trabajo: Centro de Investigaciones Cardiovasculares, UNLP-CCT-La Plata-Conicet 
e-mail de contacto (IMPORTANTE): mcvillaabrille@med.unlp.edu.ar 
 
Introducción 
En trabajos anteriores demostramos que la segunda fase de fuerza (SFF) post-estiramiento 
(efecto Anrep) es la manifestación mecánica de un mecanismo autocrino/paracrino que se 
inicia con la liberación secuencial de angiotensina II (Ang II) y endotelina (ET) y promueve la 
fosforilación y consecuente activación del intercambiador Na+/H+ cardíaco (NHE1). Las 
quinasas mas frecuentemente involucradas en la fosforilación y activación del NHE1 son 
ERK 1/2-p90RSK. Existen evidencias experimentales que demuestran que al menos ciertos 
efectos de Ang II/ET son mediados por transactivación del RFCE, mecanismo que requiere 
activación de la tirosina quinasa citosólica SRC.  
 
Objetivos 
investigar si la transactivación del RFCE está involucrada en la cascada de señalización que 
conduce al desarrollo de la SFF.  
 
Materiales y métodos 
Se utilizaron músculos papilares de gato que fueron estirados del 92 al 98% de su longitud 
máxima. Se midió la fuerza desarrollada, la activación de ERK1/2 utilizando anticuerpos 
específicos que detectan su forma fosforilada y se estimó la fosforilación del NHE1 
inmunoprecipitando la proteína y midiendo la abundancia de Ser 703 fosforilada mediante 
Western blot con un anticuerpo especifico (anticuerpo anti sitio de unión fosforilado para la 
proteina 14-3-3). Paralelamente se midió la producción de anión superóxido (·O2-) en 
respuesta a AngII en cortes de ventrículo izquierdo (dimensiones 1x1x5 mm) por el método 
de quimioluminiscencia con lucigenina. 
 
Resultados 
La SFF fue 123±1% de la fase rápida inicial (n=6, P<0.05) y fue cancelada por bloqueo 
específico del RFCE (1 mol/L AG1478, 98±2%, n=6) o inhibición de la SRC kinasa (1 mol/L 
PP1, 99±1%, n=4). El estiramiento aumentó la fosforilación de ERK1/2 en un 196±17% del 
control (n=7, P<0.05), efecto que se canceló por AG1478 (131±17%, n=4) y PP1 (124±22%, 
n=7). Dado que la activación de ERK1/2 es redox-sensible, quisimos determinar si la 
inhibición del RFCE era capaz de cancelar la producción de anión superóxido inducida por 
Ang II. Ang II (1nmol/L) aumentó la producción de anión superóxido alcanzando 146±14% 
(n=9, P<0.05), efecto que fue cancelado por AG1478 (94±5%, n=12) y PP1 (100±4.41% 
n=6). Finalmente, en concordancia con los resultados de fosforilación de ERK1/2, 
observamos que el estiramiento aumentó la fosforilación del NHE-1 (172±24% del control, 
n=4, P<0.05) y que este incremento fue cancelado en presencia del AG1478 (94±17%, n=4).  
 
Conclusión 
Nuestros resultados muestran que la transactivación del RFCE es un paso necesario en la 
ruta de señalización que desencadena el efecto Anrep. Es posible especular que esta misma 
vía de señalización esté también involucrada en el desarrollo de hipertrofia cardíaca inducida 
por estiramiento miocárdico. 
 


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El efecto Anrep post-estiramiento del miocardio requiere transactivación del receptor del factor de crecimiento epidérmico (RFCE)

Servicio de Difusión de la Creación Intelectual

    2010 Octubre, 2(1): 1-  1   EL EFECTO ANREP POST-ESTIRAMIENTO DEL MIOCARDIO REQUIERE TRANSACTIVACIÓN DEL RECEPTOR DEL FACTOR DE CRECIMIENTO EPIDÉRMICO (RFCE).  Autores: Villa-Abrille MC, Caldiz CI, Casarini MJ, Ennis IL, Chiappe de Cingolani G, Cingolani HE, Pérez NG. Lugar de Trabajo: Centro de Investigaciones Cardiovasculares, UNLP-CCT-La Plata-Conicet e-mail de contacto (IMPORTANTE): mcvillaabrille@med.unlp.edu.ar  Introducción En trabajos anteriores demostramos que la segunda fase de fuerza (SFF) post-estiramiento (efecto Anrep) es la manifestación mecánica de un mecanismo autocrino/paracrino que se inicia con la liberación secuencial de angiotensina II (Ang II) y endotelina (ET) y promueve la fosforilación y consecuente activación del intercambiador Na+/H+ cardíaco (NHE1). Las quinasas mas frecuentemente involucradas en la fosforilación y activación del NHE1 son ERK 1/2-p90RSK. Existen evidencias experimentales que demuestran que al menos ciertos efectos de Ang II/ET son mediados por transactivación del RFCE, mecanismo que requiere activación de la tirosina quinasa citosólica SRC.   Objetivos investigar si la transactivación del RFCE está involucrada en la cascada de señalización que conduce al desarrollo de la SFF.   Materiales y métodos Se utilizaron músculos papilares de gato que fueron estirados del 92 al 98% de su longitud máxima. Se midió la fuerza desarrollada, la activación de ERK1/2 utilizando anticuerpos específicos que detectan su forma fosforilada y se estimó la fosforilación del NHE1 inmunoprecipitando la proteína y midiendo la abundancia de Ser 703 fosforilada mediante Western blot con un anticuerpo especifico (anticuerpo anti sitio de unión fosforilado para la proteina 14-3-3). Paralelamente se midió la producción de anión superóxido (·O2-) en respuesta a AngII en cortes de ventrículo izquierdo (dimensiones 1x1x5 mm) por el método de quimioluminiscencia con lucigenina.  Resultados La SFF fue 123±1% de la fase rápida inicial (n=6, P<0.05) y fue cancelada por bloqueo específico del RFCE (1 mol/L AG1478, 98±2%, n=6) o inhibición de la SRC kinasa (1 mol/L PP1, 99±1%, n=4). El estiramiento aumentó la fosforilación de ERK1/2 en un 196±17% del control (n=7, P<0.05), efecto que se canceló por AG1478 (131±17%, n=4) y PP1 (124±22%, n=7). Dado que la activación de ERK1/2 es redox-sensible, quisimos determinar si la inhibición del RFCE era capaz de cancelar la producción de anión superóxido inducida por Ang II. Ang II (1nmol/L) aumentó la producción de anión superóxido alcanzando 146±14% (n=9, P<0.05), efecto que fue cancelado por AG1478 (94±5%, n=12) y PP1 (100±4.41% n=6). Finalmente, en concordancia con los resultados de fosforilación de ERK1/2, observamos que el estiramiento aumentó la fosforilación del NHE-1 (172±24% del control, n=4, P<0.05) y que este incremento fue cancelado en presencia del AG1478 (94±17%, n=4).   Conclusión Nuestros resultados muestran que la transactivación del RFCE es un paso necesario en la ruta de señalización que desencadena el efecto Anrep. Es posible especular que esta misma vía de señalización esté también involucrada en el desarrollo de hipertrofia cardíaca inducida por estiramiento miocárdico.  

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El efecto Anrep post-estiramiento del miocardio requiere transactivación del receptor del factor de crecimiento epidérmico (RFCE)

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