A microdissection technique for the « en face » visualisation of the human enteric nervous system

Abstract

Les auteurs recommandent une méthode de visualisation "en face" de l'innervation intramurale du tractus digestif humain. La méthode comporte les étapes suivantes : fixation, microdissection, coloration des tissus nerveux et examen microscopique. Les échantillons d'organe entier, de segment tubulaire, ou de biopsie de petite taille obtenus par prélèvement chirurgical ou autopsie au départ de foetus, de nouveau-nés, et d'adultes sont manipulés « in toto » sans pratiquer de coupe. Après un étalement correct, ils sont fixés dans le fixateur de Pearson. Les différentes couches tissulaires de la paroi intestinale sont séparées par une microdissection précise sous contrôle stéréomicroscopique. Différentes méthodes de coloration des tissus nerveux peuvent être appliquées à ces feuillets tissulaires : histochimie enzymatique (acétylcholinestérases, NADPH-diaphorases), imprégnation argentique, et immunohistochimie (protéine S-100, protéine des neurofilaments, myéloprotéine basique). La topographie et la microanatomie des tissus colorés peuvent être investiguées par la stéréomicroscopie: les plexus ganglionnaires d'Auerbach, d'Henle et Meissner, les réseaux réticulaires des nerfs correspondant aux couches interne et externe de la muscutaris propria, la muqueuse musculaire, le tissu conjonctif de la sous-séreuse, la sous-muqueuse et la lamina propria. Après coloration des feuillets tissulaires,les structures neuromusculaires ayant un intérêt particulier et les éléments rares peuvent être enlevés et traités par les techniques de routine de la microscopie optique