BISCEGLI, C. I.

HERRMANN, P. S. P.

MACEDO, A.

RABELLO, L. M.

Infoteca-e

N” 3, nov/96, p.1-7CUIDADOS B`SICOS COM MICROSCÓPIOS ÓPTICOS`lvaro Macedo1Clóvis Isberto Biscegli2Ladislau Marcelino Rabello3Paulo S. P. Herrmann3INTRODU˙ˆOEsse Comunicado TØcnico Ø fruto dos conhecimentos e da experiŒnciaadquiridos pelos tØcnicos da Embrapa - Instrumentaçªo AgropecuÆria, atravØs doscursos ministrados pelas empresas citadas ao final do documento e dos serviços demanutençªo em microscópios, ao longo dos 11 anos de existŒncia da `rea deManutençªo de Equipamentos Laboratoriais desse Centro.As recomendaçıes desse documento referem-se a um microscópio standard,conforme ilustrado na Figura 1, representando a maioria dos modelos existentes nosCentros da Embrapa e laboratórios em geral. Para os demais modelos, em quediferenças fundamentais venham a surgir, e para açıes que extrapolem a orientaçªodeste comunicado tØcnico, especialistas deverªo ser consultados.Ao caminho que a luz percorre desde a lâmpada do sistema de iluminaçªo,passando pelos centros de diafragmas, condensador, objetivas, prismas e oculares,dÆ-se o nome de eixo óptico ou caminho óptico. Ver Figura 1. Para que se possaobter o mÆximo desempenho de um microscópio óptico, cuidados especiais devemser tomados, para que a luz, ao percorrer o esse caminho, tenha suas característicasalteradas o mínimo possível.Algumas perdas na transmissªo da luz sªo inerentes às característicasconstrutivas do aparelho e para se evitar que outras perdas sejam a estas adicionadas,as devidas precauçıes devem ser observadas no que diz respeito à sua boaconservaçªo.O objetivo deste documento Ø permitir que o usuÆrio comum, atravØs demedidas bÆsicas, evite que a qualidade do eixo óptico do microscópio, por ele utilizado,se deteriore. Estas medidas vªo desde a simples limpeza de lentes atØ os cuidadoscom o armazenamento, transporte e a troca de lâmpadas. Maiores detalhes tØcnicossobre os microscópios podem ser vistos em Biscegli et al. (1997).1 Engenheiro EletrotØcnico, MSc, EMBRAPA-CNPDIA, Caixa Postal 741, Sªo Carlos, SP2 Físico, PhD, EMBRAPA-CNPDIA, Caixa Postal 741, CEP 13560-970 Sªo Carlos, SP3 Eng. Eletrônico MSc, EMBRAPA-CNPDIA, Caixa Postal 741, CEP 13560-970 Sªo Carlos,   SPCT/3, CNPDIA, nov/96, p.2PROCEDIMENTOLimpezaA limpeza da parte óptica deve ser criteriosa, uma vez que dela depende operfeito funcionamento do microscópio. Cuidados especiais devem ser tomados comlentes, filtros e espelhos.O material ncessÆrio à limpeza das partes citadas Ø composto de:Figura 1 - Partes componentes de ummicroscópio óptico.• Algodªo;• Soluçªo de limpeza (50%Øter sulfœrico PA, 50%clorofórmio PA);• Cotonete caseiro ou palitoisento de ferpas, com pontaenvolvido com algodªo;• Borrifador;• Panos limpos, de um tecidomacio que nªo solte fiapos(por exemplo, morim);• Lupa de bolso, com aumentode 2,5X.Na Figura 1, podem-se ver ummicroscópio e suas principais partescomponentes, como: oculares (1); tubobinocular (2); parafuso de fixaçªo (3);revólver porta-objetivas com objetivas(4); cabeçote (5); estativa (6); platina(7); condensador (8); diafragma docondensador (9); manipuladorda lente do condensador (10);parafusos de centralizaçªo docondensador (11); porta-filtros (12);suporte  para  lente auxiliar (13); controle de focalizaçªo macro e micro (14); suporteda lâmpada (15); diafragma de iluminaçªo (16); base (17).Antes de se iniciar a limpeza da parte óptica do microscópio, os seguintescuidados devem ser tomados:• Observar se as lentes possuem fungos (ver Figura 2).   •    Observar se a camada de filme fino anti-reflexiva, nªo estÆ deteriorada.        Isto pode ser observado atravØs da diferença de coloraçªo entre o vidro e        o filme. EstÆ deterioraçªo pode ser causada por fungos, por soluçıes deCT/3, CNPDIA, nov/96, p.3limpeza inadequadas ou poragressªo mecânica, como o uso depalha de aço, papel impróprio,objetos pontiagudos, entre outros.Após estas observaçıes, inicia-se alimpeza de baixo para cima, ou seja, limpam-seos vidros e espelhos da base, da lâmpada, atØchegar-se ao topo, nas oculares.  Para a limpeza de fungos utiliza-se Æguaoxigenada a 10 volumes. O procedimento paraaplicaçªo Ø o seguinte:Figura 2 - Desenho de uma lentecontendo fungos.segura-se o cotonete sem tocÆ-lo, para evitar depositar gordura das mªos no algodªo.Segura-se a lente, pela lateral, limpando as duas superfícies. Inicia-se a aplicaçªopelo centro, fazendo-se um movimento em espiral, conforme indicado na Figura 3. Omesmo procedimento Ø utilizado na limpeza de espelhos.Para a limpeza das lentes com manchasde gorduras ou outras que nªo fungos, executa-se o mesmo procedimento anterior, porØm coma soluçªo de limpeza.Os filtros e lentes de plÆstico ou acríliconªo podem ser limpos com a soluçªo declorofórmio e Øter sulfœrico, pois isto danificariaa sua superfície tornando-os opacos. Utiliza-separa isto Ælcool etílico.   A limpeza das partes mecânicas, mesmoas mais bÆsicas, nªo fazem parte doescopo   deste   documento,   pois   apesar  deFigura 3 - Esquema de limpeza,mostrando o movimento docotonete.simples, requer um treinamento prØvio, de forma a evitar acidentes que possamcausar graves danos ao microscópio. Esta limpeza estÆ descrita em Biscegli et al.(1997).Durante o trabalho de limpeza as peças desmontadas devem ser deixadassobre os panos citados e cobertas para que nªo haja depósito de poeira.O microscópio, quando nªo estÆ em uso, merece cuidados especiais, para se evitara formaçªo de fungos. O ideal Ø que seja mantido em sala com ar condicionado, poiseste auxilia a manutençªo de uma umidade relativa baixa. Caso isto nªo seja possível,deve-se confeccionar uma caixa, como a indicada na Figura 4. A caixa pode serconstruída em madeira, acrílico ou qualquer material que suporte o calor gerado pelalâmpada. A lâmpada deverÆ permanecer ligada durante o tempo em que o microscópioestiver armazenado em seu interior.ArmazenamentoEm caso de utilizaçªo de capas protetoras, estas nªo deverªo ser de plÆstico,pois este retØm a umidade, mas sim de pano ou qualquer outro tecido que permita aaeraçªo do microscópio e que nªo solte fiapos.CT/3, CNPDIA, nov/96, p.4Figura 4 - Caixa para armazenamento do microscópio, quando nªo estÆ em uso.Acondicionamento para transporteQuando for necessÆrio transportar um microscópio, devem-se tomar cuidadosespeciais na embalagem, para garantir que nªo sejam causados danos ao equipamentodurante a viagem. As oculares e objetivas devem ser embaladas individualmente sepossível em plÆstico bolha e protegidas dentro da caixa por isopor ou bolas de jornal.O tubo binocular tambØm deve ser desconectado da estativa, para se evitar que osoquete de engate seja quebrado. Quaisquer outras peças desmontÆveis, em nívelde usuÆrio, devem merecer a mesma atençªo. A caixa da embalagem deverÆ ser,preferencialmente, de madeira reforçada.Troca de lâmpadasAo se trocar a lâmpada de um microscópio, cuidados especiais devem sertomados para garantir a correta incidŒncia da luz pelo eixo óptico. Fotomicroscópiose microscópios aos quais possam ser acoplados equipamentos fotogrÆficos exigemque o filamento da lâmpada esteja perfeitamente centralizado, em relaçªo ao espelhodifusor. A Figura 5 mostra um esquemÆtico simples da maioria dos sistemas deiluminaçªo de microscópios.Nesse sistema, sªo necessÆrios ajustes para a correçªo da centralizaçªo dalâmpada, que determinarÆ o grau de luminosidade.CT/3, CNPDIA, nov/96, p.5Figura 5 - Esquema de iluminaçªo de microscópio.Para o ajuste da centralizaçªo, deve-se utilizar o filtro colocado na saída dodiafragma de iluminaçªo (ver Figura 1). Nªo hÆ necessidade do uso de lâminas. Coma ajuda das objetivas de ganho 6,3 ou 10, observa-se a imagem do filamento dalâmpada, atravØs das oculares. Se ele estiver desregulado, ou seja, se a imagemestiver fora do padrªo normal, a lâmpada deverÆ ser centralizada, utilizando-se osdois parafusos de ajuste, que fazem os deslocamentos vertical e horizontal. A imagemcorreta pode ser vista na Figura 6.Figura 6 - Imagem do filamento de uma lâmpada de halogŒneo de 12 V, 100 W,devidamente centralizado.Esse procedimento deve ser executado com muita cautela, pois tanto os parafusosde ajuste da lâmpada quanto a base desta sªo muito frÆgeis.Alinhamento do eixo ópticoO eixo óptico, ou caminho que a luz deve percorrer, Ø composto das seguintespartes (ver Figura 1):• Espelho côncavo (*)• Lâmpada (*)• Jogos de lentes (*)• Espelho plano (*)• Diafragma de iluminaçªo(*)• Condensador• Objetivas• Tubos binoculares, contendo divisor de luz e prisma de desvio(*) Partes localizadas na base do microscópio.CT/3, CNPDIA, nov/96, p.6Um correto alinhamento do eixo óptico faz com que o campo visual permaneça,uniformemente, iluminado, com a imagem brilhante, sem reflexos, permitindo umanitidez adequada do objeto a ser analisado.   Na Figura 7 pode ser visto o procedimento de alinhamento do eixo óptico.Figura 7 - Procedimento para alinhamento do eixo óptico.CT/3, CNPDIA, nov/96, p.7OBSERVA˙ÕES FINAISEmbora jÆ mencionados anteriormente, alguns aspectos merecem ser frisados,no cuidado com os procedimentos acima, quais sejam:• Nªo tentar solucionar problemas que estejam alØm do escopo destecomunicado tØcnico sem antes consultar especialistas;• Na rotina de limpeza, ater-se apenas às partes de fÆcil acesso, que nªonecessitem o uso de ferramentas para serem abertas. Oculares e objetivasnªo deverªo ser desmontadas, mesmo as que sªo montadas apenas porsistema de rosca;• Dedicar especial cuidado na limpeza das lentes;• Nªo utilizar a soluçªo de clorofórmio e Øter em plÆsticos, pois isto irÆdanificÆ-los. Alguns microscópios possuem filtros e lentes de plÆstico ouacrílico;• Nªo utilizar solventes orgânicos tais como xilol, toluol e acetona, entreoutros, pois esses podem infiltrar-se entre as lentes e dissolver o vernizutilizado para colÆ-las;• Nªo desmontar o controle de foco macro e micro do equipamento;• Nªo desmontar a base do microscópio.Agradecimentos às empresas Carl Zeiss Jena, Wilder-Leitz, Carl Zeiss do Brasil,Lamedid, Wilder-Leitz do Brasil, pelos cursos de manutençªo em microscópiosministrados aos tØcnicos da Embrapa - Instrumentaçªo AgropecuÆria.REFER˚NCIAS BIBLIOGR`FICASBISCEGLI, C.I.; RABELLO, L.M.; CRUVINEL, P.E.; SELUQUE, W.; HERRMANN, P.S.P.Introduçªo à manutençªo de instrumentos laboratoriais utilizados na pesquisaagropecuÆria. Brasília: EMBRAPA-SPI, 1997.  (no prelo).

Cuidados básicos com microscópios ópticos.

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Cuidados básicos com microscópios ópticos.

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