CARVALHO, G. A. B.

FERREIRA, E.

HUNGRIA, M

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A importância do controle de qualidade dos inoculantes CARVALHO, G. A. B.1,2; FERREIRA, E.2; HUNGRIA, M.21Universidade Estadual do Norte do Paraná- CLM- Rodovia BR-369 Km 54, Vila Maria, CP261, 86360-000, Bandeirantes, Paraná.2Embrapa Soja, Caixa Postal, 231, 86001-970, Londrina-Paraná. e-mail: gesiele@cnpso.embrapa.brIntroduçãoO nitrogênio é um elemento essencial para se obter uma boa produtividade das culturas e, frequentemente, é o nutriente crítico para o adequado estabelecimento das lavouras. Contudo, embora o N2 constitua 80% dos gases atmosféricos, que também difundem para o espaço poroso do solo, nenhum organismo eucarionte é capaz de absorver o N2 e convertê-lo a uma forma assimilável, devido à tripla ligação que existe entre os dois átomos de N (N N) (MORGANTE, 1997).Dessa forma, as fontes mais utilizadas para suprir a necessidade das plantas em N são os fertilizantes nitrogenados e o processo de fixação biológica de ntrogênio (FBN), resultante da simbiose de plantas, especialmente leguminosas, com bactérias diazotróficas, os rizóbios (HUNGRIA et al., 2001). Entretanto, sabe-se que a síntese dos fertilizantes nitrogenados exige um elevado gasto energético, relacionados ao processo e mão-de-obra envolvidos na produção; gasto com o transporte até o campo; além de que raramente mais de 1/3 do fertilizante nitrogenado aplicado é aproveitado nas culturas, sendo perdido por desnitrificação, nitrificação e lixiviação, podendo causar a poluição de lagos e rios (ARAÚJO; HUNGRIA, 1994). Por outro lado, inoculantes microbianos contendo rizóbios selecionados e eficientes no processo de FBN conseguem suprir as plantas em N, mas com as vantagens de menor custo para o agricultor; diminuição nos problemas ambientais, pois não contaminam o ambiente e, ainda, manutenção da fertilidade do solo (ARAÚJO; HUNGRIA, 1994).  Este trabalho é conduzido visando verificar a qualidade dos inoculantes microbianos, pela determinação dos parâmetros de número mínimo de células e presença de contaminantes, conforme exigido pela legislação brasileira.DesenvolvimentoPor definição, inoculante é todo produto que contenha micro-organismos favoráveis ao crescimento das plantas. Desse modo, os inoculantes representam o veículo de transporte de bactérias selecionadas. No caso do nosso estudo, as bactérias são rizóbios microssimbiontes da cultura da soja.  Atualmente, no mercado brasileiro, existem inoculantes em duas formas físicas: sólidos (em pó, tendo a turfa como suporte para as bactérias) e fluídos (líquidos, com a bactéria estabilizada em seus processos metabólicos por protetores celulares). 65V Jornada Acadêmica da Embrapa SojaA formulação de cada inoculante deve conter apenas as estirpes recomendadas pelo MAPA. Atualmente a legislação brasileira exige uma concentração mínima de 1x109 células viáveis por grama ou mL do produto e ausência de contaminantes na diluição de 1x10-5. Além disso, a pesquisa recomenda, para o caso da soja, que a dose de inoculante aplicada deva fornecer, no mínimo, 1,2 milhões de células viáveis por semente de soja (qUEIROZ, 2005).Assim, antes de serem comercializados, esses insumos devem passar por análises quantitativas e qualitativas realizadas por laboratórios autorizados, para garantir a eficiência da FBN no aumento da produtividade e na redução de custos para o agricultor.MetodologiaA amostra do produto a ser testado deve ser composta por duas subamostras, “A e B”, que deverão ser devidamente identificadas e homogeneizadas. Todos os cuidados normais de assepsia devem ser observados durante o procedimento.O ensaio inicia com a diluição seriada das subamostras em solução salina esterilizada (0,85% de NaCl). As diluições selecionadas, 10-5, 10-6 e 10-7, são semeadas por espalhamento nas placas de Petri contendo o meio de cultura YMA – yeast extract, manitol, agar - (VINCENT, 1970) com vermelho Congo (corante e indicador de contaminantes).Em seguida, as placas são incubadas, em posição invertida, na estufa de crescimento a 28 ± 2°C pelo período de cinco a oito dias (bactérias de crescimento lento, como Bradyrhizobium) ou dois a três dias (bactérias de crescimento rápido, como Rhizobium).Depois desse período, é efetuada a contagem do número de colônias (UFC) das diluições, fazendo, em seguida, uma média de cada diluição. Na próxima etapa, multiplica-se a média do número de UFC pela diluição contada e pelo fator de correção 10 (correção da alíquota de 100 µL para 1 mL), determinando o número de UFC por grama ou mL do produto testado. Levando em consideração que a concentração mínima exigida pela legislação brasileira é de 1x109 células viáveis por g ou mL, os produtos que estiverem dentro dessa concentração poderão ser comercializado.ConclusõesConclui-se que esse controle de qualidade dos inoculantes microbianos é de extrema importância, pois proporciona uma maior segurança ao agricultor em relação à qualidade dos produtos e uma garantia de boa produtividade, com baixos custos, mantendo uma boa qualidade do solo e, ainda, preservando o meio ambiente.ReferênciasARAÚJO, R. S., HUNGRIA, M. Microrganismos de importância agrícola. Brasília: Embrapa SPI, 1994. (Embrapa, Documentos, 44).HUNGRIA, M.; CAMPO, R.J.; MENDES, I.C. Fixação biológica do nitrogênio na cultura da soja. Londrina: Embrapa Soja, 2001. (Embrapa Soja. Circular Técnica 35/ Embrapa Cerrados. Circular Técnica 13). 48p. 66 Embrapa Soja. Documentos, 323MORGANTE, P. G. Fixação biológica e assimilação de nitrogênio. Piracicaba: ESALQ-USP,1997.QUEIROZ, M.A. Fiscalização e registro de inoculantes para a agricultura no Brasil. In: TALLER IBEROAMERICANO SOBRE NORMATIVA Y CONTROL DE CALIDAD DE INOCULANTES PARA LA AGRICULTURA, 1., 2005, Salvador. Programa y resúmenes. Salvador: FIOCRUZ: CYTED: BIOGRAG, 2005. p. 16 Vincent, J.M. 1970. A manual for the practical study of root nodule bacteria. Blackwell Sci. Publ., Oxford, UK.

A importância do controle de qualidade dos inoculantes.

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