bitstream/item/65449/1/COT-59-Classificacao-de-embrioes.pd

VIANA, J. H. M.

Infoteca-e

Portuguese

Classificação de embriões bovinos produzidos in vivo.

Classificação de embriões bovinos produzidos in vivoJoão Henrique Moreira Viana159ISSN 1678-3131Juiz de Fora, MGNovembro, 2009Técnico1João Henrique Moreira Viana - Médico-Veterinário, D.Sc. – Pesquisador da Embrapa Gado de Leitejhmviana@cnpgl.embrapa.brComunicadoIntroduçãoOs procedimentos de indução de ovulações múlti-plas (superovulação), coleta e transferência de em-briões tem sido largamente utilizadas como biotéc-nicas reprodutivas em bovinos. Durante o processo, os embriões são recuperados do útero das doado-ras, identificados e classificados. Esta classificação é realizada em função do estádio de desenvolvimen-to e da qualidade morfológica, e a avaliação final da eficiência do processo superovulatório e a definição do destino dos embriões (transferência direta, con-gelação ou descarte) devem levar em consideração estes dois parâmetros.Na avaliação do estádio, são consideradas carac-terísticas associadas à progressão do desenvolvi-mento embrionário, como número, tamanho e grau de compactação dos blastômeros (células embrio-nárias), formação da blastocele (cavidade embrio-nária), espaço ocupado pelo embrião e espessura da zona pelúcida (envoltório externo). Para cada dia após a ovulação, é esperado um determinado es-tádio de desenvolvimento. Em bovinos, os embriões chegam ao útero em torno do 5o dia após a ovula-ção, e eclodem em torno do 8o dia, de forma que a coleta de embriões pela técnica não cirúrgica de lavagem (flushing) uterina deve ser realizada entre o 6o e o 7o dias. Como as ovulações em bovinos su-perovulados ocorrem em um intervalo relativamen-te curto (75% nas primeiras 4h após o início das ovulações), pode ocorrer uma pequena variação no estádio entre embriões da mesma coleta. Embriões em estádio de desenvolvimento incompatível com o momento da coleta (6o – 7o dias), ou ocorrência de discrepâncias significativas entre embriões recupe-rados em um mesmo lavado sugerem retardo ou bloqueio no desenvolvimento embrionário e conse-quente comprometimento do potencial de desenvol-vimento pós-transferência.A classificação morfológica de qualidade considera a presença e a magnitude de imperfeições como 2 Classificação de embriões bovinos produzidos in vivopresença de blastômeros de tamanhos irregulares, em extrusão (separação da massa celular), apresen-tando vacuolização, morte ou fragmentação, altera-ções de cor ou tamanho da massa celular, ausência de compactação e danos na zona pelúcida. A ava-liação dos embriões é feita em função do percentual da massa celular comprometida pelas alterações. A sobrevivencia embrionária pós-transferência, princi-palmente no período do reconhecimento materno da gestação, requer um número mínimo de blastômeros viáveis, consequentemente quanto maior o compro-metimento da massa celular por defeitos morfológicos menor a chance de estabelecimento de gestação. No caso da criopreservação, em que a própria técnica causa danos e eventualmente morte de parte das células embrionárias, embriões de classificação mor-fológica regular ou pobre tem uma chance mínima de desenvolverem após a transferência.A Sociedade Internacional de Transferência de Embriões (IETS) normatizou os critérios para classi-ficação morfológica de embriões bovinos produzidos in vivo quanto ao estádio de desenvolvimento e qualidade (IETS, 1998). A classificação do estádio de desenvolvimento da IETS usa códigos numéricos que vão de 1 (oócito não fecundado) até 9 (blas-tocisto eclodido e expandido). A classificação da qualidade dos embriões usa códigos que vão de 1 (embriões de qualidade excelente ou boa) até 4 (em-briões mortos ou degenerados). Os quadros a seguir foram compilados de forma a auxiliar os profissio-nais na realização desta classificação, oferecendo uma referência de acesso rápido, comparativa e comentada, e ainda trazendo alguns exemplos de dúvidas mais comuns.A utilização dos critérios descritos pode auxiliar na redução da subjetividade da classificação dos embri-ões recuperados após a superovulação, mas a acu-rácia e a consistência dependem da experiência do técnico. É recomendável, principalmente para quem está iniciando na atividade, procurar utilizar óptica (lupa ou estereomicroscópio) de qualidade, e que forneça um aumento mínimo de 40x, assim como realizar a classificação após a remoção do embrião do meio de coleta, no qual podem estar presentes muco e debris celulares, e procurar observar o em-brião em diferentes ângulos. É importante lembrar também que a classificação morfológica é apenas indicativa do potencial de desenvolvimento dos embriões. Alterações funcio-nais que podem comprometer o desenvolvimento embrionário não são necessariamente refletidas imediatamente na morfologia, ou seja, um embrião aparentemente perfeito pode ter um baixo poten-cial de desenvolvimento em função de fatores intrínsecos como, por exemplo, defeitos genéticos, ou extrínsecos, como contaminações ou fontes de estresse no dia da coleta. Neste sentido, avalia-ções dinâmicas, em que se observa a progressão dos estádios de desevolvimento após um período de cultivo, ou técnicas auxiliares de avaliação, como coloração para contagem de blastômeros e identificação de células apoptóticas, podem auxiliar na determinação do potencial real dos embriões. Estas avaliações, contudo, nem sempre são com-patíveis com a dinâmica ou os objetivos da prática comercial da atividade.Por outro lado, a taxa de gestação após a transfe-rência de embriões é determinada não apenas pela qualidade embrionária, mas também pelos critérios utilizados na manipulação das estruturas, da habili-dade do técnico responsável pela transferência, pelo grau de sincronia entre o estádio de desenvolvimen-to embrionário e a fase do ciclo das receptoras, e pela condição sanitária e nutricional das mesmas. O registro criterioso da classificação dos embriões transferidos, e também de parâmetros como quali-dade do corpo lúteo, escore corporal da receptora, dificuldade na execução do procedimento, etc., são de grande valia no momento de interpretar os resul-tados da TE.ReferênciasSTRINGFELLOW, D.A.; SEIDEL, S.M. Manual da So-ciedade Internacional de Transferência de Embriões. IETS, p. 112-113, Illinois, 19983Classificação de embriões bovinos produzidos in vivoClassificação de embriões bovinos produzidos de acordo com o estádio de desenvolvimentoin vivoMórulaCódigo IETS: 3Mórula CompactaCódigo IETS: 4Blastocisto InicialCódigo IETS: 5BlastocistoCódigo IETS: 6Mórula CompactaFase esperada: dias 6,0 a 6,5 do cicloCaracterísticas: Compactação torna amassa de células coesa, dificultandoindividualização dos blastômeros, e causaretração do embrião em relação à zonapelúcida, com aumento do espaçoperivitelínico. Formação de junções deadesão e de oclusão entre as células,preparando o embrião para a formação dablastocele.Blastocisto InicialFase esperada: dias 6,5 a 7,0 do cicloCaracterísticas: Blastômeros criamgrãdiente osmótico que atrai água para oespaço intercelular, iniciando a formaçãode uma cavidade denominada blastocele.Perda da totipotência, com a formação deduas populações celulares distintas: otrofoblasto, que re veste a blastocele, e amassa celular interna (MCI), lateral àblastocele.BlastocistoFase esperada: dias 7,0 a 7,5 do cicloCaracterísticas: Blastocele aumenta detamanho, tornando -se proporcionalmentemaior que a massa celular interna eocupando gradualmente todo o espaçoperivitelínico. Trofoblasto sofrediferenciações morfológicas e funcionaisassociadas à captação de nutrientes,enquanto as cél ulas da MCI mantémpotencialidade.Blastocisto ExpandidoFase esperada: dias 7,5 a 8,0 do cicloCaracterísticas: Expansão da blastocelecausa aumento de tamanho do embrião eprogressiva redução na espessura dazona pelúcida (ZP). Maiordesenvolvimento do trofoblasto, a MCI évisível depende ndo da posição doembrião. Rompimento da ZP car acteriza aeclosão, com o e mbrião entrando emcontato direto com os tecidos maternos.MórulaFase esperada: dias 5,5-6,0 do cicloCaracterísticas: Blastômeros aindaevidentes, porém não é mais possíveldeterminar número exato. Massa decélulas ocupa maior parte do espaçodentro da zona pelúcida. Períodocaracterizado pelo fim da fase decelularização e da trans ição maternozigótica e início do processo decompactação.Blastocisto ExpandidoCódigo IETS:Blastocisto EclodidoCódigo IETS: 88 – 12 CélulasCódigo IETS: 24 Classificação de embriões bovinos produzidos in vivoExemplares desta edição podem ser adquiridos na:Embrapa Gado de LeiteRua Eugênio do Nascimento, 610 – Bairro Dom Bosco – 36038-330 Juiz de Fora/MGFone: (32) 3311-7400Fax: (32) 3311-7401E-mail: sac@cnpgl.embrapa.br1a edição1a impressão (2009): 150 exemplaresComunicado Técnico, 59 Presidente: Rui da Silva VernequeSecretária-Executiva: Inês Maria RodriguesMembros: Alexandre Magno Brighenti dos Santos, Alziro Vasconcelos Carneiro, Carla Christine Lange, Carlos Renato Tavares de Castro, Francisco José da Silva Lédo, Juliana de Almeida Leite, Luiz Sérgio de Almeida Camargo, Marcelo Dias Muller, Marcelo Henrique Otênio, Marcos Cicarinni Hott, Maria Gabriela Campolina Diniz Peixoto, Marlice Teixeira Ribeiro, Sérgio Rustichelli Teixeira, Wadson Sebastião Duarte da RochaSupervisão editorial: João Henrique Moreira VianaTratamento das ilustrações e editoração eletrônica: Carlos Alberto Medeiros de Moura Comitê de publicaçõesExpedienteClassificação de embriões bovinos produzidos de acordo com a qualidademorfológicain vivo

http://www.infoteca.cnptia.embrapa.br/infoteca/bitstream/doc/853312/1/COT59Classificacaodeembrioes.pdf

Classificação de embriões bovinos produzidos in vivo.

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Infoteca-e

Infoteca-e