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CORDEIRO, I. M. C. C.

LAMEIRA, O. A.

Infoteca-e

•eDesenvolvimento ISSN 1676-5265Dezembro, 2005Efeito de Reguladores de Crescimentona Micropropagação de Paricá por Meiode Segmento NodalBoletim de Pesquisae Desenvolvimento 52Osmar Alves LameiraIracema Maria Castro Coimbra CordeiroEfeito de Reguladores deCrescimento na Micropropagaçãode Paricá por meio de SegmentoNodalBelém, PA2005ISSN 1676-5265Dezembro, 2005Empresa Brasileira de Pesquisa AgropecuáriaCentro de Pesquisa Agroflorestal da Amazônia OrientalMinistério da Agricultura, Pecuária e AbastecimentoExemplares desta publicação podem ser adquiridos na:Embrapa Amazônia OrientalTrav. Dr. Enéas Pinheiro, s/nCaixa Postal, 48 CEP: 66095-100 - Belém, PAFone: (91) 3204-1000Fax: (91) 3276-9845E-mail: sac@cpatu.embrapa.brComitê Local de Editoração:Presidente – Gladys Ferreira de SouzaSecretário-Executivo: Francisco José Câmara FigueirêdoMembros: Izabel Cristina D. Brandão    José Furlan Júnior    Lucilda Maria Sousa de Matos    Moacyr Bernardino Dias Filho    Vladimir Bonfim Souza    Walkymário de Paulo LemosRevisores TécnicosAlexandre Moraes do Amaral - CenargenJoão Batista Teixeira - CenargenMaria das Graças Ferreira - Embrapa RondôniaSupervisor editorial: Regina Alves RodriguesSupervisão Gráfica: Guilherme Leopoldo da Costa FernandesRevisor de texto: Marlúcia Oliveira da CruzNormalização bibliográfica: Célia Maria Lopes PereiraEditoração eletrônica: Francisco José Farias Pereira1a edição1a impressão (2005): 300 tiragemTodos os direitos reservados.A reprodução não-autorizada desta publicação, no todo ou em parte,constitui violação dos direitos autorais (Lei no 9.610).Lameira, Osmar AlvesEfeito de reguladores de crescimento na micropropagação de paricá pormeio de segmento nodal / por Osmar Alves Lameira e Iracema Maria Cas-tro Coimbra Cordeiro. - Belém: Embrapa Amazônia Oriental, 2005.15 p.; 21 cm. - (Embrapa Amazônia Oriental. Boletim de Pesquisa eDesenvolvimento, 52).ISSN 1676 –52651. Cultura de Tecido. 2. Paricá. 3. Propagação in vitro. 4. SegmentoNodal. 5. Regulador de crescimento. 6. Micropropagação. I. Cordeiro, Ira-cema Castro Coimbra. II. Título. III. Série.CDD - 635.05© Embrapa 2005SumárioResumo ......................................................... 5Abstract ........................................................ 7Introdução ..................................................... 9Material e Métodos ....................................... 10Resultados e Discussão ................................. 10Conclusão.................................................... 14Referências Bibliográficas .............................. 14Resumo O trabalho teve como objetivo testar concentrações de reguladores de crescimentona indução de brotações de paricá (Schizolobium amazonicum Huber ex Ducke)utilizando explantes provenientes de plântulas obtidas de germinação in vitro, coma finalidade de micropropagar a espécie. Explantes foram excisados e inoculadosem meio MS, com a concentração de nitrato de amônio reduzido à ¼,suplementado com 0; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 e 3,0 mg.L-1 de BAP e KIN. Foramadicionados ao meio de cultura 3% de sacarose e 0,1% de ácido ascórbico. Acultura foi mantida em sala de crescimento, sob condições de 26°C + 1°C,fotoperíodo de 16 horas de luz branca fria e intensidade luminosa de 25 mmol.m-2.s –1 de irradiância. Os resultados demonstraram que o BAP foi mais eficiente quea KIN em média, no número e comprimento de brotos por explante in vitro deparicá, respectivamente, nas concentrações de 3 e 2 mg.L-1.Palavras-chave: Cultura de tecidos, Schizolobium amazonicum, propagação invitro.Efeito de Reguladores deCrescimento naMicropropagação de Paricápor meio de SegmentoNodalOsmar Alves Lameira1Iracema Maria Castro Coimbra Cordeiro21Eng. Agr. Doutor , Pesquisador da Embrapa Amazônia Oriental,2Eng. Ftal, Doutoranda da Universidade Federal Rural da AmazôniaEffect of Growth Regulatorsin Micropropagation ofParica by Nodal SegmentsAbstractThe objetctive of this paper was to test concentrations of growth regulators in theinduction of shoots of parica (Schizolobium amazonicum former Huber Ducke)using explants of plantlets obtained by germination in vitro, with themicropropagation purpose the species. Explants were excised and inoculated onMS medium, with the concentration of nitrate of ammonium reduced to ¼,supplemented with 0; 1.0; 1.5; 2.0; 2.5 and 3.0 mg.L-1 of BAP and KIN. It wasadded to the culture medium 3% of sucrose and 0,1% of ascorbic acid. Theculture was maintained in growth room, under conditions 26°C + 1°C,photoperiod of 16 hours of light white cold and a luminous intensity of 25mmol.m-2.s-1 of irradiance. The results demonstrated that BAP was more efficientthan KIN on average, in the number and length of shoots for explant in vitro ofparica, respectively, in the concentrations of 3 and 2 mg.L-1.Key - words: Tissue culture, Schizolobium amazonicum, in vitro propagation.9Efeito de Reguladores de Crescimento na Micropropagação de Paricá por meio deSegmento NodalIntroduçãoA espécie Schizolobium amazonicum (Huber) Ducke é conhecida vulgarmentecomo Paricá, Pinho Cuiabano, Faveira, entre outros. Pertence à classeDicotiledonea, família Leguminosae tribo Caesalpinieae (Vidal e Vidal, 2000). Éuma árvore de floresta primária e secundária que ocorre naturalmente na AmazôniaBrasileira e no Peru em mata primária e secundária tanto em solos de terra firmecomo em várzea alta (Pereira et al., 1982). Pelo rápido crescimento, diversidade deuso e por se apresentar relativamente imune ao ataque de pragas e doenças, estásendo bastante utilizada em diferentes sistemas de plantios, como homogêneos,consorciados, enriquecimento de capoeiras e recuperação de áreas degradadas.Em plantios de reflorestamento apresenta idade de rotação prevista para 14 anos,entretanto, a seleção de material genético de qualidade pode reduzir este tempo derotação para oito anos ou menos. Em vista do exposto, a utilização de técnicasbiotecnológicas apresenta-se como uma alternativa para multiplicação deste mate-rial de qualidade, livre de patógenos e vírus. Dentre essas técnicas, amicropropagação é a que apresenta aplicação mais difundida e concreta, visto quejá está sendo utilizada em nível comercial em diversos países, inclusive no Brasil(Grattapaglia e Machado, 1998).Na literatura, a maioria dos protocolos desenvolvidos em cultura de tecidos deespécies florestais envolve espécies de Pinus e Eucalyptus, entretanto, instituiçõesde pesquisa e empresas comerciais vêm desenvolvendo estudos com espéciestropicais para obtenção em massa de plantas com características de interesse. Ocultivo in vitro da espécie possibilita a produção de plantas uniformes que venhamsuprir a demanda futura e ao mesmo tempo dar suporte a projetos debiotecnologia.No contexto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de reguladoresde crescimento na indução de brotações a partir de segmentos nodais de plântulasassépticas de S. amazonicum germinadas in vitro, com a finalidade demicropropagar a espécie.10Efeito de Reguladores de Crescimento na Micropropagação de Paricá por meio deSegmento NodalMaterial e MétodosAs atividades foram realizadas no Laboratório de Recursos Genéticos eBiotecnologia da Embrapa Amazônia Oriental, Belém-Pará, utilizando-se explantesde plântulas assépticas cultivadas in vitro. O meio de cultura básico utilizado foiMS (Murashige e Skoog, 1962) com a concentração de nitrato de amônia reduzidoà metade, suplementado com 0; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 e 3,0 mg.L-1 de 6-benzilaminopurina ( BAP) e Cinetina (KIN), solidificado com 0,6% de ágar, acresci-do de 30 g.L-1 de sacarose e 0,1% de ácido cítrico. O pH do meio foi ajustado para5,8 antes da autoclavagem por 15 minutos, à temperatura de 121°C. Em câmarade fluxo laminar, previamente esterelizada com álcool a 70%, segmentos nodaismedindo 10mm de comprimento foram inoculados em tubos de ensaio (20 x 150mm) contendo 15 ml de meio de cultura. A cultura foi mantida em sala decrescimento, sob condições de 26°C + 1°C, fotoperíodo de 16 horas de luzbranca fria e intensidade luminosa de 25 mmol.m-2.s –1 de irradiância.O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com doze tra-tamentos, envolvendo as doses dos reguladores de crescimento e quatro repeti-ções sendo cada unidade experimental constituída de cinco tubos de ensaio comum explante em cada. A coleta dos dados foi efetuada no décimo quinto dia apóso cultivo inicial, com a contagem de número e comprimento de brotações. Aanálise estatística foi feita através das análises de variação e de regressão. Paravariável número de brotos os dados foram transformados para x+5,0  e osdados comprimento dos brotos não sofreram transformação.Resultados e DiscussãoNas Tabelas 1 e 2, os resumos das análises de variância feita para as variáveis,número médio e comprimento de brotações em função das concentrações de BAPe KIN, respectivamente, demonstraram que ocorreu diferença significativa ao nívelde 5% de probabilidade para as duas variáveis analisadas com os seus respectivosreguladores de crescimento.11Efeito de Reguladores de Crescimento na Micropropagação de Paricá por meio deSegmento NodalTabela 1. Resumo da análise da variância para o número e comprimento debrotações de paricá em função das concentrações de BAP. Embrapa AmazôniaOriental. Belém – PA. 2005.Tabela 2 – Resumo da análise de variância para o número e comprimento debrotações de paricá em função das concentrações de KIN. Embrapa AmazôniaOriental, Belém – PA. 2005.Os tratamentos que resultaram em maior número médio de brotações foram os quecontinham concentrações de 3 mg.L-1 de BAP e 2 mg.L-1 de KIN obtendo-se emmédia 2,14 e 1,11 brotos por explante, respectivamente (Figura 1 e Figuras 2A e2B). A baixa taxa de multiplicação obtida no presente trabalho, provavelmente está¹Dados transformados em .x5,0G.L Quadrados Médios FCausas daVariação(mg)N°de brotosComp.de brotosN°de brotos¹Comp.de brotosN°de brotosComp.de brotosConc. BAP 5 5 1,01929015 0,63135914 10,57** 4,15*Resíduo 114 99 0,09643701 0,15219505CV(%) 22,15 58,00Média 1,4 0,67*e ** Significativos a 5 e 1% de probabilidade, respectivamente, pelo teste F.¹Dados transformados em .x5,0G.L Quadrados Médios FCausas daVariação(mg)N° debrotos1Comp.de brotosN°de brotos¹Comp.de brotosN° debrotosComp.de brotosConc. KIN 5 5 0,23677734 0,63135914 1,85* 4,52**Resíduo 114 99 0,12777902 0,15219505CV(%) 31,63 51,93Média 1,13 0,62*e ** Significativos a 5 e 1% de probabilidade, respectivamente, pelo teste F..12Efeito de Reguladores de Crescimento na Micropropagação de Paricá por meio deSegmento Nodalrelacionada à característica genética da própria planta. Estes resultados coincidemcom os registrados, respectivamente por Pasqual e Barros (1992) e Correia e Graça(1995) com segmento caulinar de barbatimão [Strynodendron adstringens (Mart.)]e acácia negra (Acacia mearsii de Wild). Resultados similares foram encontradospor Andrade et al. (2000) na propagação de aroeira (Myracrodrun urundeuva Fr.All), quando conseguiram apenas um broto por explante.Figura 1- Efeito de diferentes concentrações (mg.L-1) de BAP e KIN no número médiode brotos de paricá.Figura 2. Brotações de paricá a partir de segmentos nodais em meio MS suplementadocom 3 mg.L-1 BAP (A) e 2 mg.L-1 KIN (B).Fotos: Osmar Alves Lameira13Efeito de Reguladores de Crescimento na Micropropagação de Paricá por meio deSegmento NodalEmbora na Figura 1 o número médio de brotos obtidos por explante tenha apresen-tado uma tendência de aumento linear à medida que há o aumento da concentraçãode BAP e KIN, através da equação de regressão pode ser observado que napresença de BAP os tratamentos contendo as concentrações 1,0 e 1,5mg.L-1 nãoseguiram essa tendência. Para esta diferença de comportamento deve-se considerarque os explantes utilizados no trabalho foram provenientes de sementes degenótipos variados, podendo ocorrer alta variabilidade do material. Deve-se ressal-tar que a capacidade de regeneração e crescimento in vitro pode estar associadanão apenas ao genótipo, mas também à atividade fisiológica na planta matriz, sobo controle de diversos fatores endógenos e ambientais (Izquierdo e Lopez, 1991).A curva de regressão obtida para o comprimento dos brotos em relação às concentra-ções de BAP e KIN é apresentada na Figura 3. Para o BAP, foi observado que a curvaformou uma parábola chegando ao ponto máximo na concentração de 2 mg.L-1.A curva de regressão formada na presença de KIN mostrou comportamento ascen-dente até o ponto máximo atingido com a concentração de 2,0 mg.L-1. Pode-seobservar ainda que o menor tamanho das brotações ocorreu no tratamento com1,0 mg.L-1 de KIN. Esses resultados demonstram que as citocininas estimulam amaior produção de partes aéreas até determinada concentração, variando de acordocom a espécie, e a partir desta, ocorre um efeito inibidor, caracterizado pela falta dealongamento das brotações (Grattapaglia e Machado, 1998). Usando concentraçõessemelhantes de KIN no meio WPM, Oltramari et al. (2002) obtiveram melhor médiade comprimento das brotações com a espécie Acca sellowiana (Berg).Figura 3. Efeito de diferentes concentrações (mg.L-1) de BAP e KIN no comprimento debrotos de paricá.14Efeito de Reguladores de Crescimento na Micropropagação de Paricá por meio deSegmento NodalOs brotos obtidos foram individualizadas e inoculados em meio MS com a metadedas concentrações de sais e na ausência de regulador de crescimento para manu-tenção da cultura. Posteriormente, aos 45 dias de cultivo, as brotações queapresentavam boa formação da parte aérea foram transferidas para o meio deenraizamento.ConclusãoO BAP é mais eficiente que a KIN em média, no número e comprimento de brotos porexplante in vitro de paricá, respectivamente, nas concentrações de 3 e 2 mg.L-1.Referências BibliográficasANDRADE, M. W. de; LUZ, J. M. Q.; LACERDA, A. S.;  MELO, P. R. A. de.Micropropagação da aroeira (Myracrodrun urundeuva Fr. All). Ciência Agrotécnica,v.24, n.1, p.174-180, jan./mar. 2000.CORREIA, D; GRAÇA, M. E. C. In vitro propagation of black wattle (Acacia mearsiiDe Wild). Piracicaba. IPEF, n. 48/49, p. 117-125, jan./dez.1995.GRATTAPAGLIA, D.; MACHADO, M. A. Micropropagação. In: TORRES, A. C.;CALDAS. L. S.; BUSO, J. A. (Ed.). Cultura de tecidos e transformação genética deplantas. Brasília, DF: Embrapa –SPI: Embrapa-CNPH, 1998. p.183-260.IZQUIERDO, J. A.; LOPEZ F. Y. Análisis e interpretación estadística de laexperimentación in vitro. In: ROCA, W. 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Efeito de reguladores de crescimento na micropropagação de paricá por meio de segmento nodal.

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