bitstream/CNPSA/15910/1/publicacao_b0d5u2t.pd

CARDOSO, M.

KICH, J. D.

RAMENZONI, M. L. F.

SCHWARZ, P.

TRIQUES, N.

VIZZOTTO, R.

Infoteca-e

IntroduçãoA contaminação do alimento, porqualquer sorovar de Salmonella é consideradapotencialmente patogênica para o consumidor,sendo que os produtos de origem animal,historicamente, representam o maior risco. Nadécada de 90, lançando mão de ferramentasde rastreabilidade, foi comprovada aassociação  entre a ingestão de carne suína  esurtos de salmonelose humana na Europa(Wegener e Baggensen, 1996) e, a partir deentão, foram implementados programasespecíficos de controle em vários países.Atualmente, a produção de alimentosseguros envolve uma discussão complexa deâmbito internacional, abrangendo agendas depesquisa, operacionalização de programas decontrole, rastreabilidade e certificação quepermeiam todas as etapas da cadeiaprodutiva. No Brasil, não existe um programaoficial de monitoria ativa da contaminação decarcaças suínas por salmonelas. Porém, comoos lotes vendidos são testados por várioscompradores, as agroindústrias possuemprotocolos de monitoria interna, e a avaliaçãoda contaminação e o controle de salmonelasvem tomando espaço dentro dos programasde boas práticas de produção. Na produção desuínos, esta infecção caracteriza-se por doisproblemas: a presença de sorovarespatogênicos que provocam gastroenterites esepticemias e a presença de sorovares quenão causam doença nos animais, mas são asprincipais fontes de contaminação dascarcaças nos abatedouros e que podeminfectar humanos.Com o objetivo de oferecer ferramentaspara programas de controle, o grupo depesquisa da Embrapa Suínos e Aves eDepartamento de Medicina VeterináriaPreventiva da UFRGS adaptou testesbacteriológicos, desenvolveu teste de ELISA(Kich et al., 2003), otimizou PCR (Castagna etal., 2005) e eletroforese em campo pulsado -PFGE (Bessa, 2006), e estudou a prevalência(Bessa et al., 2004), fatores de risco (Kich etal., 2005a) e a distribuição e dinâmica dainfeção entre os rebanhos (Silva et al., 2003;Schwarz et al., 2006). As informações estãodisponibilizadas ao setor produtivo sob a formade publicações.As metodologias de identificação erecuperação da Salmonella, bem como demarcadores da infecção possuem papéisdistintos dentro de um programa de controle,dependentes do custo, mão de obra e tipo deinformação necessária. Porém, na fase dedesenvolvimento dos métodos é necessáriorelacioná-los a fim de validar seu uso. Entre asmetodologias utilizadas, a sorologia é aquelaque melhor se adapta à avaliação derebanhos, por ser mais rápida, barata eoferecer um dado histórico da granja.1 Méd. Vet., D.Sc., Embrapa Suínos e Aves, Cx. Postal 21, CEP 89.700-000, Concórdia, SC, e-mail: jalusa@cnpsa.embrapa.br2 Méd. Vet., M.Sc., doutoranda, Medicina Veterinária Preventiva - UFRGS3 Méd. Vet., D.Sc., Medicina Veterinária Preventiva - UFRGS4 Bióloga, mestranda, Medicina Veterinária Preventiva – UFRGS5 Laboratorista, Embrapa Suínos e Aves, Concórdia, SCJalusa Deon Kich 1Patrícia Schwarz 2Marisa Cardoso 3Nelise Juliane Triques 4Remídio Vizzotto 5Marní Lúcia F. Ramenzoni 5ISSN 0100-8862Dezembro/2006Concórdia-SC442O uso da Sorologia (ELISA) paraMonitorar a Infecção por Salmonella emRebanhos Suínos 2 | O uso da Sorologia (ELISA) para Monitorar a Infecção por Salmonella em Rebanhos SuínosNeste sentido, o grupo desenvolveu evalidou um teste ELISA (ELISA-Typhimurium),para ser utilizado em rebanhos brasileiros,capaz de classificá-los por nível de infecção.O objetivo é disponibilizar a ferramentapara que o setor produtivo incorpore nosprogramas de monitoramento e controle deSalmonella em suínos.Condução do estudo e resultadosNo presente estudo, foi desenvolvido umteste de ELISA baseado em antígenoslipopolissacarídeos (LPS) da parede celular deuma amostra de Salmonella Typhimurium,aqui referido como ELISA-Typhimurium. Estesorovar foi escolhido por ser o mais prevalenteem suínos no sul do Brasil e, também, porquepossui pelo menos dois antígenos comunscom os demais sorovares que ocorremfreqüentemente (Agona, Derby, Panama eBredney) na região (Bessa et al., 2004). Apósa padronização das condições laboratoriais, oteste foi avaliado em diferentes categorias deanimais como segue: suínos inoculadosoralmente e sentinelas; suínos naturalmenteinfectados na granja; leitões privados decolostro (sem anticorpos) e suínos imunizadoscom bacterinas produzidas com os sorovaresmais prevelentes (Typhimurium, Agona,Derby, Panama e Bredney). A soroconversãofoi observada nos suínos inoculados sete diasapós a infecção e nos sentinelas após 21 dias.Não foram detectadas reações inespecíficasno soro dos leitões privados de colostro. Asamostras de soro dos suínos imunizados comas bacterinas demostraram reações cruzadascom o LPS do sorovar Typhimurium. Ainda, oteste mostrou alta correlação com dois “kits”comerciais propostos para a mesma finalidade(Kich et al., 2005b). O ELISA-Typhimurium foivalidado em 75 rebanhos comerciais e aprevalência sorológica mostrou associaçãocom a prevalência de suínos portadores deSalmonella nos linfonodos mesentéricos. Emnossas condições de campo, foi possíveldeterminar que a cada incremento de 25% naprevalência sorológica em rebanhosbrasileiros, existe 1,5 vezes mais chance dosanimais serem portadores da Salmonella noslinfonodos mesentéricos.O conjunto dos resultados demonstraque o ELISA-Typhimurium é uma ferramentaque pode e deve ser utilizada para determinara infecção por Salmonella em rebanhossuínos, visando seu controle.Comentários e aplicaçãoConsiderando que a origem dacontaminação por salmonelas da maioria dascarcaças são os próprios animais abatidos aolongo do dia (Botteldoorn et al., 2004), e que acontaminação dos mesmos ocorre na granjae/ou pré-abate (jejum, transporte e espera noabatedouro), a identificação do momento dainfecção e a classificação dos lotes, quanto aorisco de introdução de salmonela na linha deabate são informações essenciais paraprogramas de controle. Como o ELISA-Typhimurium detecta anticorpos do tipo IgG,só teremos resultados positivos após operíodo de soroconversão, que vai de 7 diasem condições experimentais a 21 dias emcondições naturais, dependendo da doseinfectante. Portanto, os resultados dasorologia dizem respeito a infecçõesanteriores ao período de soroconversão, ouseja, nas granjas produtoras de suínos e nãonos momentos pré-abate.Uma das aplicações do teste de ELISA éa determinação do perfil sorológico da granja,observação da fase da produção onde ainfecção é amplificada e para onde devem serdirecionadas as medidas de controle, comoexemplo a creche, terminação ou pré-abate.Foi identificada, em sete diferentes sistemasde produção de suínos brasileiros, que amédia da prevalência sorológica (81,64%) foisuperior à prevalência bacteriológica(60,81%), demonstrando que a infecção porSalmonella ocorreu nas granjas.O sítio de produção onde pode ocorrer ainfecção é variável entre os diferentessistemas/ Empresas. No entanto, conformeestudo longitudinal realizado no sul do Brasil(Schwarz, 2006), a maternidade não foiconsiderada como sítio de infecção dos lotesterminados. Os demais sítios do sistema(creche, recria e terminação) podem estarenvolvidos como fonte e na amplificação dainfecção, havendo a necessidade de procederà investigação das característicasepidemiológicas e dinâmica do agente emcada Empresa.Outra aplicação interessante, utilizadaem países com programas oficiais oucompulsórios de controle, é a categorizaçãoO uso da Sorologia (ELISA) para Monitorar a Infecção por Salmonella em Rebanhos Suínos | 3das granjas pela prevalência sorológica doslotes. O abate e as medidas de intervençãosão orientados conforme a categoria em que agranja se encontra. A Dinamarca utilizou apartir de 2001 os níveis 1 (< 40% deprevalência sorológica), 2 (>40% e <70%) e 3(>70%) que correspondem à prevalênciaaceitável, moderada e não aceitável,respectivamente (Alban et al., 2002). Estasanálises usam um ponto de corte (limite entreresultado negativo/positivo) no teste de ELISAmais alto do aquele definidoexperimentalmente, adaptado ao momento doprograma de controle. As maiores orientaçõessão dirigidas ao nível 3, onde animais sãoabatidos sob precauções específicas e agranja submetida a melhorias no manejosanitário. Se utilizarmos os mesmos critérioscom o ponto de corte experimental teremosmais de 70% dos nossos lotes classificados nonível 3 (Schwarz, 2006) o que onera demais oprograma devido a sua abrangência. Aproposta seria, num primeiro momento,aumentar o ponto de corte para discriminarmelhor os lotes do nível 3, identificar o grupode granjas mais contaminadas e direcionarmedidas de manejo e higiene para este grupoe num segundo momento, conforme aavaliação dos resultados do programa,diminuir o ponto de corte.Os procedimentos de coleta de materiale processamento laboratorial sãoaparentemente simples, porém oestabelecimento de um programa de monitoriae controle é uma atividade bastante complexadevido a sua abrangência. Deve ser coletadosangue de um número representativo deanimais por lote, o resultado deve serrapidamente processado e as intervençõesencaminhadas. A Dinamarca, por exemplo,criou um “índice sorológico para salmonela”analisando os resultados obtidos no períodode três meses em cada granja. Este índice dáum peso maior para o último mês (0,2:0,2:0,6)para que seja possível observar rapidamente oaumento da prevalência. Nas condiçõesbrasileiras, tanto o ponto de corte quanto ogrupo de granjas a serem monitoradas, bemcomo as medidas de intervenção, devem serplanificadas junto aos sistemas produtores desuínos. Estas decisões dever ser baseadasem estudos para determinar os fatores derisco, a dinâmica de infecção e as principaisfontes de contaminação para cada Empresa.Metodologias de investigação e detomadas de decisão para a construção deprogramas de controle já estão à disposiçãoem nosso ambiente produtivo, bem comoalternativas direcionadas aos rebanhos comoa  correção de fatores de risco, profilaxiaimunológica, condições peculiares damicrobiota intestinal; aos produtos cárneoscomo práticas industriais; à alimentaçãoanimal e a logística de transporte de animais.RecomendaçõesPara avanço no conhecimento e nocontrole das infecções por Salmonella emsuínos sugere-se:a) Planificação do programa de monitoriasorológica: determinação do ponto de corte,categorização dos lotes e informatização dosprocedimentos;b) Realização de estudos da dinâmicade infecção e de fatores de risco nos sistemasinteressados;c) Pesquisa das principais fontes deinfecção na granja e pré-abate;d) Elaboração de um programa deintervenção na granja com correção de fatoresde risco e medidas específicas que resultemna redução da prevalência de Salmonella nosrebanhos suínos e seus produtos.Referências BibliográficasALBAN, L.; STEGE, H.; DAHL, J.. 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InternationalJournal of Food Microbiology, v32, p.125-131, 1996.ComunicadoTécnico, 442Ministério da Agricultura,Pecuária e AbastecimentoExemplares desta edição podem seradquiridos na:Embrapa Suínos e AvesEndereço: Br 153, Km 110,Distrito de Tamanduá,Caixa postal 21,89700-000, Concórdia, SCFone: 49 3441 0400Fax: 49 3442 8559E-mail: sac@cnpsa.embrapa.br1ª edição1ª impressão (2006): tiragem: 100Comitê dePublicaçõesRevisoresTécnicosExpedientePresidente: Claudio BellaverMembros: Teresinha M. Bertol, Cícero J.Monticelli, Gerson N. Scheuermann, Airton Kunz,Valéria M. N. AbreuSuplente: Arlei ColdebellaNelson Morés, Cícero J. Monticelli, RejaneSchaefer, Irene Z.P. CameraSupervisão editorial: Tânia M. B. CelantEditoração eletrônica: Kênia Cristiane WollingerFotos: Jalusa Deon Kich

O uso da sorologia (ELISA) para monitorar a infecção por Salmonella em rebanhos suínos.

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O uso da sorologia (ELISA) para monitorar a infecção por Salmonella em rebanhos suínos.

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