BRESSAN, W.

FIGUEIREDO, J. E. F.

Portuguese

Infoteca-e

ComunicadoTécnico65ISSN 1679-0162Outubro, 2003Sete Lagoas, MGControle de Fusariummoniliforme em sementes demilho por actinomicetosWellington Bressan1José Edson Fontes Figueiredo21 Eng. Agr., Dr. Embrapa Milho e Sorgo. Caixa Postal  151 CEP 35 701-970 Sete Lagoas, MG.  E-mail: bressan@cnpms.embrapa.br2Biólogo, Embrapa Milho e Sorgo. E-mail: jeff@cnpms.embrapa.brFusarium moniliforme J. Sheldon (Giberellafujikuroi) (Sawada Wolen) é um dos principaispatógenos do milho (Zea mays L.), causandoredução na germinação da semente, morte deplântulas, podridão de raízes e de colmos epodridão dos grãos. O patógeno pode afetar aqualidade dos grãos pela produção decompostos tóxicos, como ácido fusárico,fusarinas e micotoxinas (B1 e B2).Como um endofítico, Fusarium moniliformepode permanecer durante o ciclo da culturado milho como um parasita, sem causarsintoma visível na planta ou no grão. O fungopode sobreviver em resíduos de culturas.O controle, a prevenção e a detecção dainfecção endofítica desse fungo são difíceis,especialmente porque os grãos nãoapresentam, muitas vezes, sintomas visíveisda presença do fungo. Os métodos maiscomumentes utilizados para o controle dessepatógeno são os fungicidas aplicados nassementes e práticas culturais como a rotaçãode culturas. Embora o tratamento químicocom fungicidas seja efetivo no controle dodesenvolvimento fúngico nas sementes, elepode afetar a conservação e o acesso àdiversidade biológica do solo e acarretarcontaminação ambiental, como a do subsolo.Com isso, o estudo e a utilização demicroorganismos antagonistas a Fusariummoniliforme, como agentes de controlebiológico, constituem uma das principaisalternativas de controle na espermosfera erizosfera.Actinomicetos são bactérias filamentosasencontradas naturalmente nos solos,produtoras de substâncias que, quandotestadas in vitro, podem apresentar atividadeantagônica ao desenvolvimento de fungos.2Neste trabalho, foi estudada a utilização deActinomicetos, do gênero  Streptomyces sp.,visando controlar o desenvolvimento de F.moniliforme in vitro e  em sementesinfectadas por esse patógeno.Estudos preliminares foram conduzidos invitro, para avaliar a efetividade do controlebiológico do Fusarium moniliforme. Utilizou-seo isolado FM57 da coleção da Embrapa Milhoe Sorgo e dez isolados de Streptomyces sp.pertencentes à coleção do Departamento deAntibiótico da Universidade Federal dePernambuco DAUFPE (11470, 14632, 14885,12343, 14985, 13505, 12473, 14423, 12343,14954).Nos testes em condições in vitro, foi utilizadoo método de discos de agar contendo isoladodo fungo ou de Streptomyces sp. Os isoladosde Fusarium moniliforme foram inoculados emplacas de Petri contendo o meio de cultivoextrato de malte- extrato de levedura – agar.Após a incubação e o crescimento, osisolados foram cortados em discos de 5mm dediâmetro e colocados no centro da placa dePetri.  Quatro discos do mesmo diâmetro doisolado FM57 foram colocados na mesmaplaca, em posições opostas. As placasinoculadas foram incubadas a 28 °C, por dezdias, e a zona de inibição do crescimento dofungo, avaliada pelo diâmetro do haloformado, foi medida e tomada comoreferência da atividade antifúngica dosisolados de Streptomyces sp.Os testes para avaliação da eficiênciaantifúngica, dos isolados DAUFPE 11470 eDAUFPE 14632, nas sementes de milho,foram conduzidos em caixas de plástico degerminação (10,5 x 10,5 x 3 cm). Sementesdesinfestadas de milho, da cultivar BR 201,foram imersas em suspensão de esporos emicélios de Fusarium moniliforme por 24horas, a 25 °C, sob agitação, sendo emseguida retiradas dos frascos e secadas àtemperatura ambiente. A inoculação comisolados de Streptomyces sp. foi efetuadacolocando as sementes inoculadas em frascosindividuais contendo uma suspensão de cadaisolado. Os frascos foram agitados por 24horas, a 28 °C. Sementes não inoculadas,utilizadas como controle, foram imersas emágua destilada esterilizada. As operações deinoculação foram efetuadas em condiçõessépticas.Vinte e cinco sementes inoculadas de cadatratamento foram colocadas em caixas degerminação contendo papel de filtroumedecido com água destilada esterilizada eincubadas por oito dias a 22 ± 2 °C, comfotoperíodo de 12/12 luz-escuro. Asavaliações da porcentagem de sementesgerminadas e da porcentagem de incidênciade Fusarium moniliforme nas sementes foramefetuadas em microscópio esterioscópico comaumento de 50 X.Os dados obtidos foram analisados pelomodelo linear geral do SAS (SAS Institute,1990). Os dados sobre a porcentagem degerminação e porcentagem de sementes comFusarium moniliforme foram transformadosem arco-seno antes das análises. Acomparação das médias foi efetuada peloteste de Duncan.Nos testes in vitro, os resultados obtidosmostraram que a efetividade antifúngica deStreptomyces sp. no controle de Fusariummoniliforme  variou entre os isoladostestados. Os halos de inibição variaram de 10a 52 mm (Tabela 1). Embora todos os isoladostenham mostrado atividade antifúngica, osisolados DAUFPE 11470 e DAUFPE 14632foram os mais eficientes (Figura 1).Com base na germinação, os tratamentos dassementes inoculadas com os isolados deStreptomyces sp., em combinação comFusarium moniliforme, não diferiramsignificativamente (p£0,05) entre si. Otratamento das sementes apenas comFusarium moniliforme também não diferiusignificativamente (p£0,05) do tratamento dassementes desinfestadas e sem inoculação,indicando que não houve um efeitopatogênico do fungo sobre a germinação dassementes. Apesar de esse fungo ter sido3detectado em todos os tratamentos e não tersido observado seu efeito na germinação, elepode se constituir em uma fonte paraposterior infecção das plantas.Quanto à incidência de Fusarium moniliformenas sementes de milho, os isolados deStreptomyces sp., DAUFPE 11470 e DAUFPE14632 reduziram significativamente (p=0,05)a presença de Fusarium moniliforme nassementes germinadas. A maior redução naincidência desse fungo (96,8%) foi obtidacom o isolado DAUFPE 11470, quandocomparada com as sementes inoculadassomente com Fusarium moniliforme. Aredução da incidência desse fungo peloisolado DAUFPE 14632 foi de 95,9%. A açãoantifúngica desses isolados confirmou osresultados obtidos em condições in vitro.Figura 1. Controle in vitro de Fusarium moniliforme isolado FM 57 por isolados deStreptomyces spp. DAUFPE 11470 (1) e DAUFPE 14632 (2).Entretanto, a incidência de Fusariummoniliforme não apresentou diferençasignificativa (p=0,05) entre as sementesinoculadas com os isolados de Streptomycessp. e as sementes desinfestadas e nãoinoculadas (Figura 2), indicando uma açãoantifúngica eficiente desses isolados. O efeitoantifúngico dos isolados de Streptomyces sp.pode ter sido devido à produção desubstâncias bioativas, como antibióticos e/ouenzimas líticas.Os resultados obtidos indicam que ainoculação das sementes de milho comisolados de Streptomyces spp. reduz aincidência de Fusarium moniliforme nassementes e mostram o potencial dessesisolados como agentes de controle biológico.Tabela 1. Inibição in vitro de Fusarium moniliforme, isolado FM 57, por isolados de  Streptomyces spp.4  Comitê dePublicaçõesPresidente:  Ivan CruzSecretário-Executivo: Frederico Ozanan Machado DurãesMembros: Antônio Carlos de Oliveira, Arnaldo Ferreira daSilva, Carlos Roberto Casela, Fernando Tavares Fernandes ePaulo Afonso VianaExpediente Supervisor editorial: José Heitor VasconcellosRevisão de texto: Dilermando Lúcio de OliveiraEditoração eletrôncia:  Tânia Mara Assunção BarbosaComunicadoTécnico, 65Exemplares desta edição podem ser adquiridos na:Embrapa Milho e SorgoCaixa Postal 151 CEP 35701-970 Sete Lagoas, MGFone: 0xx31 3779 1000Fax: 0xx31 3779 1088E-mail: sac@cnpms.embrapa.br1ª edição1ª impressão (2003) Tiragem: 200Figura 2. Germinação das sementes de milho e incidência de Fusarium moniliforme isolado FM57. (1)Streptomyces sp. isolado DAUFPE 11470 + Fusarium moniliforme; (2) Streptomyces sp. isoladoDAUFPE 14632 + Fusarium moniliforme; (3) Fusarium moniliforme; (4) Sementes sem inoculação.

Controle de Fusarium moniliforme em sementes de milho por actinomicetos.

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Controle de Fusarium moniliforme em sementes de milho por actinomicetos.

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