Pontificia Universidad Javeriana: Facultad de Odontología
Abstract
Background: Infection by type 1 Herpes Simplex Virus (HSV-1) is the most frequent viral
infection in human population being able to cause injuries in oral mucosa, skin, cornea,
and even the central nervous system causing encephalitis. After mucosal infection, HSV-1
establishes a lifespan latent infection in trigeminal ganglia where it occasionally reactivates
infecting primary sites again. It is little known about cell and molecular events responsible
for infection reactivation and immune response in human ganglia. Objective: To standardize
the obtaining and processing of human trigeminal ganglia to detect specific HSV
antigen, DNA and RNA. Methods: After approval of the study by the Universidad Nacional
IRB, 32 trigeminal ganglia were obtained from 16 cadavers from the Colombian Forensic
Medicine Institute. Results: Using PCR technique to detect viral DNA, it was found that 56.3 %
of ganglia (9/16) amplified specific fragment and five out of ten with suitable quality RNA
were positive for latency associated transcript. Conclusion: Some trigeminal ganglia did not
show evidence of infection and some had different HSV-1 infection status (active or latent)
with inflammatory cells infiltrate in almost all samples. This is the first work that detects
simultaneously genome, proteins and LAT of HSV-1 in human trigeminal ganglia, leading to
explore findings about the latency and r eactivation pr ocessAntecedentes: la infección por virus herpes simple tipo 1 (VHS-1) es una de las más frecuentes
en la población humana; produce infecciones en mucosa oral, piel, ojos e incluso
en el sistema nervioso, que causa encefalitis. Después de la infección en la región orofacial,
este virus puede permanecer en estado de latencia en el ganglio trigémino y eventualmente
reactivarse. Objetivo: determinar la presencia de VHS-1 en ganglios trigeminales humanos
mediante pruebas paralelas de PCR, RT-PCR e inmunohistoquímica. Métodos: previa aprobación
del Comité de Ética de la Facultad de Odontología de la Universidad Nacional de
Colombia y del Instituto de Medicina Legal y Ciencias Forenses, se recolectaron dieciséis
pares de ganglios trigeminales humanos, que se procesaron tanto para extracción de ácidos
nucleicos como para inmunohistoquímica. Resultados: en seis de los ocho donantes
analizados por inmunohistoquímica se encontró marcaje positivo para antígeno de VHS-1.
Se halló que nueve de los donantes evaluados por PCR para VHS-1 y cinco de los diez
examinados para transcritos asociados a latencia (LAT) fueron positivos. Conclusión: se
encontraron ganglios trigeminales en los que no se detectó virus y otros con distintos
estados de infección (activa y latente). En casi todos los ganglios fue evidente el infiltrado
inflamatorio asociado. El presente es el primer trabajo en el que se busca sistemáticamente
tanto genoma viral como proteínas y transcritos LAT en ganglios trigeminales humanos, lo
cual abre puertas para la investigación tanto de la epidemiología como de los fenómenos
asociados a la LAT y reactivación del VHS-1