Kretzmann Filho, Nelson Alexandre

López, Mónica Luján

Matte, Ursula da Silveira

Simon, Laura

Lume 5.8

33ª SEMANA CIENTÍFICA DO HOSPITAL DE CLÍNICAS DE PORTO ALEGRE  Rev HCPA 2013; 33 (Supl.)      17 30384 AVALIAÇÃO DA CITOTOXICIDADE DO TETRACLORETO DE CARBONO (CCL4) IN VITRO NAS LINHAGENS HEPÁTICAS HUH7 E ARL-6 Laura Simon, Mónica Luján López, Nelson Alexandre Kretzmann Filho, Ursula Matte Unidade/Serviço: Centro de Terapia Gênica - CPE  Introdução: O fígado é o principal órgão envolvido na detoxificação de substâncias e biotransformação de agentes químicos. Durante a metabolização do tetracloreto de carbono (CCL4) pelas células hepáticas, ocorre a formação do radical CCl3* e espécies reativas de oxigênio que são capazes de ligar-se ao DNA, proteínas e lipídeos, provocando danos a processos celulares importantes e degeneração gordurosa (esteatose). A exposição discreta ao CCl4 causa lesão hepática aguda, enquanto que a exposição contínua acarreta em fibrose e cirrose hepáticas. Neste trabalho, visamos testar a sensibilidade das linhagens de hepatocarcinoma humano (HuH7) e murino (ARL-6) a doses de CCl4 in vitro e verificar a toxicidade em diferentes tempos. Materiais e métodos: As células foram mantidas em cultura com meio DMEM low-glucose com 10% de soro fetal bovino (SFB) e 1% de antibiótico (P/S), em incubadora a 37°C e 5% de CO2. Para o experimento, foram plaqueadas 3x104  células por poço em placas de 96 poços. As células foram tratadas com concentrações crescentes de CCl4 (10µM – 1mM) diluídas em 1% de DMSO. Após 24 e 48 horas, foi feito ensaio com MTT para avaliar a citotoxicidade. Resultados: As células ARL-6 apresentaram viabilidade de 80% quando expostas a 20 µM por 24 horas e diminui a 60% às 48 horas. Já para concentrações acima de 80 µM a viabilidade celular foi menor que 30%. Por outro lado, as células HuH7 toleraram concentrações mais elevadas da substância, apresentando viabilidade de 90% na presença de até 0,5 mM de CCl4 às 24 horas. A mortalidade atingiu 90% quando as células foram expostas a 1mM de CCl4. O mesmo foi observado na exposição prolongada (48 horas). Conclusão: Neste trabalho, verificamos que as duas linhagens de hepatocarcinomas utilizadas no trabalho possuem sensibilidade variada ao CCl4. A padronização da metodologia nos permite usar este modelo in vitro para busca de novos tratamentos para doenças hepáticas. Apoio: FIPE HCPA (05-0318), CNPq.                             

Portuguese

Avaliação da citotoxicidade do tetracloreto de carbono (CCL4) in vitro nas linhagens hepáticas HuH7 e ARL-6

Universidade Federal do Rio Grande do Sul

https://lume.ufrgs.br/bitstream/10183/119592/1/000905235.pdf

Avaliação da citotoxicidade do tetracloreto de carbono (CCL4) in vitro nas linhagens hepáticas HuH7 e ARL-6

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