Melchiades, Gabriela de Lima

Lume 5.8

 Cultivo de uma Célula Apresentadora de Antígeno Artificial para Expansão de Células NK em Grau Clínico  Introdução: Células Natural Killer (NK) tem sido abordadas como uma alternativa terapêutica para tratamento de Leucemia Linfoblástica Aguda (LLA). Um protocolo está sendo padronizado pelo nosso grupo em Cooperação com o M.D. Anderson Cancer Center da Universidade do Texas (EUA), com o objetivo de sensibilizar linfócitos a produzirem células NK efetoras. Células K562 apresentam a translocação t(9;22) (Cromossomo Filadélfia) e derivam da linhagem celular K562 de eritroleucemia humana. Estas células foram modificadas geneticamente (mIL21-K562 Clone 9) e atuam como Células Apresentadoras de Antígeno (APCs), expressando os marcadores de superfície para a ativação dos linfócitos. Objetivo: Padronizar o cultivo de células apresentadoras de antígeno artificial para expansão de células NK em grau clínico. Metodologia: As células são expandidas mantendo-as em estufa com controle de temperatura (37ºC) e pressão de CO2 (5%); o meio das células é composto por RPMI, 10% SFB e Antibiótico; a troca do meio é feita periodicamente e a concentração das células é ajustada a uma concentração ótima para sua proliferação. O cultivo das células é realizado de acordo com as normas da GMP (Good Manufacturing Practices). Para que haja um controle de qualidade, são realizados testes de imunofenotipagem e testes para verificar a presença de contaminantes (Micoplasma, Endotoxina). Resultados: Após 2 semanas de cultura celular as células APCs apresentam o seguinte padrão de imunofenotipagem: > 80% CD64+, > 80% CD86+, > 80% CD137L+, > 80% CD19+, > 80% CD32+, > 80% IL21+, ≤ 5 % CD20+ e ≤ 5 % CD3+. As detecções de presença de micoplasma e endotoxinas nas culturas têm apresentado resultado negativo. Conclusão: O cultivo das células APCs foi realizado de acordo com o estabelecido e os resultados da imunofenotipagem se adequa às normas estabelecidas pelo protocolo seguido. Perspectivas futuras: Inicio do protocolo de expansão das células NK. 

Portuguese

Cultivo de uma Célula Apresentadora de Antigeno Artificial para Expansão de Células NK em Grau Clínico

Universidade Federal do Rio Grande do Sul

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Cultivo de uma Célula Apresentadora de Antigeno Artificial para Expansão de Células NK em Grau Clínico

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