Gonçalves, Alice Dahmer

Lume 5.8

Apoio: FIPE/HCPA, CAPES, CNPq. FAPERGSAvaliação da Atividade Funcional de Células Natural Killer em Indivíduos com Anemia FalciformeDahmer, A.; Valim, V. S; Moraes Júnior, L.; Pezzi, A.; Oliveira, F. S.; Baggio, L.; Silva, M.A.L.; Silla, L.Laboratório  de Cultura Celular e Análise Molecular de Células HematopoiéticasCentro de Terapia Celular - RSCentro de PesquisasHospital de Clínicas de Porto Alegre, RSContato: alicedahmer@gmail.comINTRODUÇÃOA anemia falciforme (AF) é uma doença genéticacausada por uma mutação que ocorre no gene daβ-globina, e resulta na troca de um únicoaminoácido. O resultado é a produção da Hb S,originando hemácias em forma de foice quecontribuem para o processo de vaso-oclusão. Oresultado deste processo é uma doençainflamatória, com o comprometimento das célulasdo sistema imune, no qual há interação entre oendotélio, plaquetas, hemácias e leucócitos. Ascélulas natural killer (NK) possuem a capacidadede reconhecer e lisar células tumorais e célulasinfectadas por vírus sem sensibilização prévia. Sãoderivadas de precursores da medula óssea e secaracterizam morfologicamente como linfócitosgrandes e granulares. Fenotipicamente sãodefinidas pela expressão de CD56 e CD16.OBJETIVOSAvaliar a atividade das células NK empacientes com anemia falciforme, comparandocom controles normais.MÉTODOSAmostragem: Serão incluidos 23 pacientes comanemia falciforme e 23 de controles normais dobanco de sangue do HCPA.Células-alvo: As células K562 (leucemia mielóidecrônica) são mantidas em meio de cultura RPMI1640, suplementado com 10% de soro bovinofetal e 1% de antibióticos (penicilina +estreptomicina), incubadas a 37 C em estufaumidificada com 5% de CO2.Células efetoras: A partir de 15ml de sanguevenoso, a camada mononuclear de sangueperiférico será obtida através de gradiente dedensidade Ficoll-Hystopaque® de acordo com asnormas do fabricante.Ensaio de Citotoxicidade: As células K562previamente marcadas com Cr51 são incubadaspor 4 horas com as células efetoras. O percentualde lise é determinado pela liberação nosobrenadante de Cr51 incorporado pelas células-alvo em diferentes concentrações.RESULTADOSCONSIDERAÇÕESForam testados 7 pacientes até o momento. Acomparação da atividade citolítica das célulasNK dos pacientes com anemia falciforme aindanão foi avaliada devido ao fato de não termosiniciado a coleta dos controles.REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICASBUNN, HF. Pathogenesis and treatment of sickle cell disease. N E J ofMedicine, Boston, v. 337, n. 11, p. 762-9, sep. 1997.MORETTA, A et al. NK cells at the interface between innate andadaptive immunity. Cell Death Differ, Genova, v. 15, n. 2, p. 226–33,feb. 2008.WHITESIDE, TL et al. Natural killer cytotoxicity in the diagnosis ofimmune dysfunction: criteria for a reproducible assay. J Clin Lab Anal,Pittisburgh, v. 4, n. 2, p. 102-14, 1990..CORDERO EA et al. HLA-G polymorphism influences the suscetibility toHCV infection in sickle cell disease patients. Tissue Antigens;74(4):308-13. 2009VARGAS E.A. Polymorphisms of chemokine receptors and eNOS inBrazilian patients with sickle cell disease.Tissue Antigens;66(6):683-90. 2005051015202530354045501 2 3 4 5 6 8Porcentagem de Lise (%)PacientesAtividade NK, 7 pacientes em diferentesproporções de célula efetora/célula-alvo50:125:112,5:16,25:1Diluições

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AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE FUNCIONAL DAS CÉLULAS NATURAL KILLER EM INDIVÍDUOS COM ANEMIA FALCIFORME

Universidade Federal do Rio Grande do Sul

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