Britto, Ênio Luiz Ribeiro de

Davolli, Gabriel Monteiro

Gregory, Ricardo Macedo

Möller, Gabriella

Trein, Cristina Rodrigues

Universidade Federal do Rio Grande do Sul

Seleção de sêmen equino através de centrifugação e gradiente de densidade

Lume 5.8

 Ciências Agrárias  203 SELEÇÃO DE SÊMEN EQUINO ATRAVÉS DE CENTRIFUGAÇÃO E GRADIENTE DE DENSIDADE. Gabriel Monteiro Davolli, Gabriela Möller, Cristina Rodrigues Trein, Ênio Luiz Ribeiro de Britto, Ricardo Macedo Gregory, Rodrigo Costa Mattos (orient.) (UFRGS). Em eqüinos, o sêmen para o uso em inseminação artificial é geralmente processado através de centrifugação e diluição. No entanto, essas técnicas não proporcionam uma possibilidade de seleção de espermatozóides de maior qualidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar três técnicas de processamento seminal em relação à sua capacidade de manter a qualidade do sêmen. Foram utilizados 14 ejaculados de três garanhões de fertilidade conhecida e comprovada. Imediatamente após a coleta, o sêmen foi diluído com leite desnatado afim de se obter uma concentração final de 50 x 106 sptz / mL. Parte do sêmen diluído foi resfriada e parte retirada para processamento imediato. Foram preparados três tratamentos: (a) grupo controle (CON); (b) centrifugação a 800 g / 15 min (CEN) e (c) seleção por um gradiente de Percoll (45/90%) com centrifugação a 800 g / 15 min (PER). Após a centrifugação, o pellet foi ressuspendido em 1 mL de leite desnatado e o número de espermatozóides, estimado. Os tratamentos foram repetidos nas 0, 24 e 48 h e avaliados quanto à motilidade, integridade (CFDA/PI) e funcionalidade de membranas (HOST). As células selecionadas pelo gradiente de Percoll apresentaram porcentagem maior de motilidade total e progressiva do que CON e CEN (p<0, 0001). Não houve diferença na porcentagem de células com membranas intactas e funcionais entre os tratamentos (p>0, 1272). A porcentagem de células recuperadas nos tratamentos CEN e PER foi de 72%±14 e 35%±16, respectivamente (p<0, 0001). Houve uma diferença significativa no número de espermatozóides recuperados por PER entre 0 e 24 h (p=0, 0019) e entre 0 e 48 h (p=0, 0130). Não se observaram diferenças no número de células recuperadas após CEN nos diferentes tempos de observação. Assim, concluiu-se que a seleção por gradiente de Percoll foi efetiva para recuperação de espermatozóides com motilidade progressiva, mas não os selecionou de acordo com sua integridade e funcionalidade de membranas. 205 

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