Rieger, Elenara

Vaz Junior, Itabajara da Silva

Lume 5.8

Ciências Biológicas   366 SUB-CLONAGEM EM VETOR DE EXPRESSÃO EM PROCARIOTO DE UMA CISTEÍNA PROTEÍNASE DE BOOPHILUS MICROPLUS. Elenara Rieger, Itabajara da Silva Vaz Junior, Aoi Masuda (orient.) (UFRGS). O carrapato bovino B. microplus é causa de grandes prejuízos econômicos na pecuária, causando queda na produção de leite, carne e danos ao couro. Atualmente o controle do carrapato B. microplus é feito com o uso de acaricidas. Entretanto, devido à preocupação com os problemas criados pela poluição química do ambiente, ao alto custo e toxidez das drogas, e ao aparecimento de carrapatos resistentes a acaricidas, outras alternativas para o controle do B. microplus têm sido procuradas, como o desenvolvimento e emprego de vacinas. As proteinases estão envolvidas em funções vitais ao organismo e estão sendo utilizadas como alvos para desenvolvimento de drogas antiparasita e para imunoprofilaxia. Esta proteinase degrada vitelina e hemoglobina in vitro sugerindo exercer uma função importante no desenvolvimento do embrião e no processo digestivo. O objetivo foi a sub-clonagem do gene BmCL1 no vetor pET23d (plasmídio de expressão em procarioto), partindo-se do cDNA BmCl1 clonado em pBluescript (Renard et al, 2000). Através de PCR foi obtido um amplicon de 931 bp que foi ligado ao vetor originando o plasmídio com o cDNA da BmCl1. Foram isolados 3 clones com inserto do tamanho e com sítios de clivagem previstos. A expressão da proteína recombinante com cauda de histidina será feita em bactéria AD494(DE3)pLysS e após serão realizados experimentos de caracterização da atividade enzimática e imunogenicidade. 102 

Portuguese

Sub-clonagem em vetor de expressão em procarioto de uma cisteína proteínase de Boophilus microplus

Universidade Federal do Rio Grande do Sul

https://lume.ufrgs.br/bitstream/10183/37848/1/000521343.pdf

Sub-clonagem em vetor de expressão em procarioto de uma cisteína proteínase de Boophilus microplus

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