Papel del Cdc7 en la regulación de la recombinación homóloga durante la tolerancia a daños replicativos

Abstract

Trabajo realizado en el Departamento de Biología Molecular, CABIMER y en el Departamento de Genética, Facultad de Biología, Universidad de Sevilla, para optar al grado de Doctor en Biología por la Lda. María José Cabello Lobato.La respuesta a daños en el ADN (DDR, DNA damage response) es una compleja red de mecanismos cuyo objetivo final es evitar la acumulación de mutaciones y reordenamientos genómicos que comprometen el correcto funcionamiento celular. Entre los principales mecanismos de la DDR se encuentran los puntos de control o ͞>checkpoints>, los mecanismos de reparación y tolerancia de daños y los programas de senescencia celular y apoptosis. En conjunto, esta respuesta funciona como una barrera que previene la inestabilidad genética, y por tanto clave para prevenir el desarrollo del cáncer. La correcta duplicación del ADN es esencial para el mantenimiento de la información genética y la progresión a lo largo del ciclo celular. La horquillas replicativas son estructuras altamente dinámicas y frágiles, tanto por la presencia de fragmentos de ADN de cadena sencilla (ssDNA) como por la descromatinización asociada con la síntesis de ADN, lo que las hace susceptibles de ser sustrato de nucleasas y otras enzimas implicadas en el procesamiento del ADN. Además en cada ciclo celular, numerosos obstáculos generados tanto por agentes endógenos y exógenos que causan lesiones en el ADN (aductos, sitios abásicos o incorporación de ribonucleótidos en vez de nucleótidos) como los propios obstáculos intrínsecos del ADN (zonas altamente compactadas, proteínas unidas, híbridos ADN-ARN, etc.) impiden el avance de la horquilla de replicación y, en algunos casos, llevan al colapso y la rotura de éstas. Por ello, las células han desarrollado diferentes mecanismos implicados en la protección, reparación y reiniciación de las horquillas, y mutaciones en estos mecanismos causan inestabilidad genética y están asociados con cáncer y numerosas enfermedades genéticas. Aunque la complejidad de estos mecanismos aumenta a lo largo de la evolución, los aspectos básicos están muy conservados desde levaduras hasta humanos. En este trabajo hemos utilizado Saccharomyces cerevisiae como organismo modelo por sus ventajas para la investigación genética y bioquímica.Peer Reviewe