Usporedba postupaka sinkronizacije estrusa junica davateljica jajnih stanica u proizvodnji zametaka in vitro

Abstract

The aim of the study was to compare the effect of different synchronization protocols on oocyte retrieval and blastocyst production in vitro. Twelve Simmental heifers were randomly allocated to one of three synchronization groups. In the 1st group heifers were synchronized with two PGF2α injections in 11-days interval. In the 2nd group heifers were synchronized the same way and dominant follicles (DF) were removed 36 hours before pFSH stimulation. In the 3rd group a progestin ear implant was inserted for 10 days and DF were aspirated 36 hours before pFSH stimulation. The same stimulation protocol with pFSH, starting on Day 9/10 of cycle, was used in all treatment groups. Ovum pick-up (OPU) was performed 48 hours after the last pFSH injection. The number of aspirated follicles, number and quality of retrieved oocytes were recorded. Oocytes were matured, fertilized and cultured in vitro in SOFaaBSA until Day 9. The mean DF diameter and the mean number of expanded oocytes showed a tendency towards signififi cance (0.05 ≤ P ≤ 0.10) in the progestin treatment group. No signififi cant differences between treatment groups were observed in terms of cleavage rate on Day 2, morula/blastocyst rate on Day 7 and hatched blastocysts rate on Day 9. The results indicated that progestin treatment did not prevent the establishment of follicular dominance on the ovaries of heifers. Furthermore, the synchronization protocol did not affect the number of follicles and the recovered oocytes, or the number of in vitro produced embryos.Svrha ovog istraživanja bila je usporediti utjecaj različitih metoda sinkronizacije estrusa na razvojnu sposobnost jajnih stanica i uzgoj in vitro goveđih zametaka. Za davateljice jajnih stanica odabrane su junice u ciklusu simentalske pasmine (n=12), koje su potom nasumce podijeljene u tri skupine. Prva skupina junica sinkronizirana je pomoću dvije injekcije PGF2α u razmaku od 11 dana. U drugoj je skupini nakon sinkronizacije s PGF2α aspiriran dominantni folikul (DF) 36 sati prije stimulacije jajnika s pFSH. Treća skupina junica sinkronizirana je pomoću gestagenskih ušnih usadaka tijekom 10 dana, a DF je aspiriran 36 sati prije pFSH stimulacije jajnika. U svih je davateljica aktivnost jajnika stimulirana pomoću pFSH, počevši od 9/10 dana ciklusa. Transvaginalna aspiracija jajnih stanica izvedena je 48 sati nakon zadnje injekcije pFSH. Zabilježen je broj aspiriranih folikula, broj aspiriranih jajnih stanica i uspjeh aspiracije. Jajne stanice dobre kvalitete uzete su u postupak dozrijevanja, oplodnje i uzgoja in vitro. Prosječni promjer DF i broj ekspandiranih jajnih stanica loše kvalitete pokazivao je tendenciju prema značajnosti (0,05≤P≤0,10) u skupini junica sinkroniziranih gestagenima. Postotak brazdanih jajnih stanica drugoga dana uzgoja, morula i blastocista sedmoga dana uzgoja te postotak izlegnutih blastocista devetoga dana nije se statistički razlikovao između pojedinih skupina. Rezultati istraživanja pokazuju da sinkronizacija junica pomoću gestagenskih usadaka nije spriječila nastanak dominantnog folikula na jajnicima davateljica. Postupak sinkronizacije ciklusa nije utjecao na broj folikula i aspiriranih jajnih stanica niti na rezultate uzgoja goveđih zametaka in vitro