Imunokromatografski test za dokaz invazije vrstama Babesia caballi i Babesia equi Laveran 1901 (Theileria equi Mehlhorn i Schein, 1998) (Phylum Apicomplexa) u fi lipinskih konja u usporedbi s dokazom parazita u krvnim razmascima

Abstract

Sera collected from 71 slaughtered and 33 racing horses were assayed for Babesia spp. infection using immunochromatographic (ICT) assay. The ICT strips which were developed at the National Research Center for Protozoan Diseases (NRCPD), Obihiro University, Hokkaido, Japan contained a recombinant B. caballi 48-kDa rhoptry protein (rBc48) and a recombinant truncated B. equi merozoite antigen 2 (rEMA-2t) for the detection of anti-horse Babesia spp. antibodies. The 63 sero-positive blood samples consisted of 41(57.7%) and 22 (66.7%) cases in slaughtered and racing horses, respectively. Twelve sera (19.0%) reacted with both B. caballi and B. equi antigens, 45 sera (71.0%) reacted with rBc48 antigen only, and six sera (10.0%) were positive for B. equi antibodies only. Babesia caballi infection accounted for 90.5% cases. Infection with B. caballi and/or B. equi confirmed in Giemsa-stained blood smears prepared from racing horse samples only revealed 22 (66.7%) seropositive cases. Paired pear or crescent-shaped merozoites (0.5-1.25 μm), characteristic of B. caballi were observed in 20 blood smears, while only two seropositive cases revealed the presence of both B. caballi and the Maltese cross or tetrad-shaped merozoites (0.62-0.95 μm) generally associated with Theileria sp. (B. equi) parasite. To our knowledge, this is the first immunochromatographic assay of equine babesiosis in the Philippines validated by the detection of specific etiologic agent(s) in blood smears.Uzorci seruma 71 zaklanog konja i 33 športska konja bili su pretraženi na prisutnost protutijela za babezije imunokromatografskim testom (ICT). Testovi razvijeni u Nacionalnom istraživačkom centru za protozojske bolesti u sklopu Sveučilišta Obihiro u Hokaidu u Japanu sadržavali su rekombinantni protein od 48-kDa (rBc48) vrste B. caballi i rekombinantni krnji merozoitski antigen 2 (rEMA-2t) vrste B. equi za određivanje protutijela za vrste roda Babesia. Od ukupno 63 serološki pozitivna konja, 41 (57,7%) pripadao je skupini kojoj je krv bila uzeta pri klanju, a 22 (66,7%) bila su iz skupine športskih konja. Dvadeset uzoraka seruma (19,0%) bilo je pozitivno na oba antigena (B. caballi i B. equi), 45 uzoraka (71,0%) samo na antigen rBc48, dok je svega šest uzoraka (10%) bilo pozitivno na protutijela za vrstu B. equi. Protutijela za vrstu B. caballi bila su dokazana u 90,5% pretraženih uzoraka. Pretragom krvnih razmazaka obojenih po Giemzi babezije su bile dokazane u svega 22 (66,7%) športska konja. Kruškaste tvorevine (0,5-1,25 μm), karakteristične za merozoite protozoona B. caballi bile su dokazane u 20 razmazaka krvi. Samo u dva serološki pozitivna uzorka dokazana je vrsta B. caballi i merozoiti razmješteni u obliku malteškoga križa (0,62-0,95 μm) što je i karakteristika protozoa iz roda Theileria (B. equi). Ovim istraživanjem prvi put je dokazana prikladnost imunokromatografskoga testa za određivanje protutijela za babezije konja na Filipinima, a rezultati su uspoređeni s nalazom uzročnika u krvnim razmascima