Faculty of Food Technology and Biotechnology, University of Zagreb
Abstract
Arthrobacter sp. 10137 has been used to produce β-fructofuranosidase (FFase). Sucrose and corn steep powder in an optimized ratio of 10:1 were the best carbon and nitrogen sources for enzyme production in a shake flask. The maximum FFase activity was 26.69 U/mL after 22.5 h in batch culture, and the crude FFase, obtained by ultrafiltration and (NH4)2SO4 fractionation, was purified about 7-fold as measured by specific activity from the crude culture filtrate. The FFase was specific for introduction of a fructose molecule at the C19 position on both the stevioside and rebaudioside A, with high transfructosylating activity of 65 % after 15 h of incubation.U proizvodnji enzima β-fruktofuranozidaze upotrijebljen je soj bakterije Arthrobacter sp. 10137. Kao najbolji izvori ugljika i dušika za proizvodnju enzima u pokusu na tresilici upotrijebljeni su saharoza i kukuruzni ekstrakt u omjeru 10:1. Maksimalna aktivnost β-fruktofuranozidaze od 26,69 U/mL postignuta je šaržnim uzgojem nakon 22,5 h. Sirovi enzim β-fruktofuranozidaza, dobiven ultrafiltracijom i frakcioniranjem s (NH4)2SO4, pročišćen je 7 puta, što je potvrđeno usporedbom specifične aktivnosti pročišćenog enzima s filtratom sirovoga enzima. Utvrđeno je da je dobiveni enzim specifičan za uvođenje molekule fruktoze na poziciju C19 steviozida i rebaudiozida A, te da je aktivnost transfruktozilaze nakon 15 sati inkubacije iznosila 65 %
