The promoter-cloning plasmid pBRH4 (a derivative of pBR322 with a partially deleted promoter of the tet gene) is shown to contain a sequence which is located near the EcoRI site and can operate as an effective Pribnow box, but is not the remainder of the deletion-inactivated tet promoter of pBR322. If there is a sequence homologous to the ‘-35’ promoter region at the border of the DNA fragment inserted at the EcoRI site, then a compound promoter arises and activates the tet gene. Point mutations in the nonfunctional -35 region of pBRH4 also activate the cryptic Pribnow box. Several compound promoters were obtained through deleting small portions of DNA around the HindIII site of pBR322; the deletions moved various sequences that could operate as Pribnow boxes towards the -35 region of the tet promoter.Показано, що плазміда pBRH4 (похідна pBR322 із частково вилученим промотором гена tet) містить послідовність, здатну функціонувати в якості блока Прібнова, але яка не є залишком частково вилученого промотору гена tet. Якщо в EcoRI-сайт клонується фрагмент ДНК, що містить послідовність, гомологічну "-35"-ій ділянці промотора, виникає штучний промотор, що активує tet-ген. Точкові мутації в нефункціонуючому - 35-му районі pBRH4 також активують блок Прібнова. За допомогою делецій у районі сайту HindIII плазміди pBR322 отриманий ряд складних промоторів; ці делеції змістили різні послідовності, здатні функціонувати в якості блока Прібнова, до - 35-го району tet-промотора. // Русск. версия: Показано, что плазмида pBRH4 (производная pBR322 с частично удалённым промотором гена tet) содержит последовательность, способную функционировать в качестве блока Прибнова, но которая не является остатком частично удаленного промотора гена tet. Если в EcoRI-сайт клонируется фрагмент ДНК, содержащий последовательность, гомологичную "-35"-му участку промотора, возникает искусственный промотор, активирующий tet-ген. Точковые мутации в нефункционирующем -35-м районе pBRH4 также активируют блок Прибнова. С помощью делеций в районе сайта HindIII плазмиды pBR322 получен ряд составных промоторов; эти делеции сместили различные последовательности, способные функционировать в качестве блока Прибнова, к -35-му району tet-промотора.
При цитировании документа, используйте ссылку http://essuir.sumdu.edu.ua/handle/123456789/267
