Asemeia extraaxillaris (Chodat) J.F.B. Pastore e J.R. Abbott (Polygalaceae) e Microlobius foetidus (subsp. Paraguensis (Benth.)M. Sousa et G. Andrade) (Fabaceae - Mimosoideae) : Contribuição ao estudo fitoquímico e investigação das atividades biológicas (alelopática,.antiploriferativa, antineoplásica, antimicrobiana, antioxidante, tóxica e larvicida).

Abstract

Orientadora : Profa. Dra. Marilis Dallarmi MiguelCoorientador : Prof. Dr. Obdulio Gomes MiguelTese (doutorado) - Univ ersidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 20/02/2014Inclui referênciasÁrea de concentração: Insumos, medicamentos e correlatosResumo: Dada a importância de estudos fitoquímicos e biológicos, associados à riqueza da flora do Pantanal Sul- Matogrossense, foram realizados estudos quanto a prospecção fitoquímica e atividades biológicas dos extrato etanólico bruto (EEB), fração hexânica (FH) clorofórmio (FCL), acetato de etila (FAE) e remanescente (FR) de Asemeia extraaxillaris e diferentes partes morfológicas de Microlobius foetidus (folhas, cascas, frutos e sementes), por meio de ensaios de atividade alelopática, antiploriferativa, antineoplásica, antimicrobiana, antioxidante, tóxica e larvicida. Na atividade alelopática, A. extraaxillaris apresentou potencial alelopático pelo método de lixiviados em laboratório e casa de vegetação, e o pó das raízes foi quem mais afetou a germinação (26% de inibição), crescimento inicial (54,3% de inibição) em laboratório e crescimento em casa de vegetação, inibindo o crescimento da raiz (50%) e caule (56%). Frutos e sementes de M. foetidus apresentaram inibição da raíz (57%) e caule (55%) tratados com o pó dos frutos. Ambas as espécies apresentam potencial antioxidante pelos métodos testados, sendo os resultados obtidos para M. foetidus superiores à A. extraaxillaris. Plantas cultivadas em casa de vegetação apresentaram alterações na anatomia após 30 dias. A espessura da epiderme córtex, diâmetro do cilindro vascular e diâmetro total foi menor em plantas tratadas de com a FH e FAE de A. extraaxillaris, e efeitos semelhantes foram observados para a FAE dos frutos de M. foetidus. A ação antineoplásica dos extratos e frações tambémfoi verificada para ambas as espécies investigadas. A FAE de A. extraaxillaris apresentou IC50 iguais a 7,5 ?g. mL para a linhagem NCI-ADR/RES (Câncer de ovário com fenótipo de resistência à múltiplas drogas) e 8,5 ?g. mL para a linhagem 786-0 (câncer de rim). Semelhante ao observado para A. extraaxillaris, as diferentes partes morfológicas de M. foetidus também demonstraram atividade antineoplásica, com IC50 de 6,4 ?g. mL para NCI-ADR/RES 8,3 ?g. mL para a linhagem OVAR3 (Ovário) e 2,1 ?g. mL para K562 (leucemia). Estes dados corroboram com os obtidos na proteção contra os efeitos do herbicida atrazina no modelo A. cepa, uma vez que o uso deste herbicida pode levar à formação de células cancerígenas. A ação antimicrobiana também foi observada. A FH e FCL de A. extraaxillaris apresentaram CIM (concentração inibitória mínima) iguais à 250 ?g. mL para S. aureus, S. epidermidis, S. saprophyticus, E. coli, P. aeruginosa e K. pneumoniae, C. albicans, C. tropicalis, S. cerevisae e C. neoformans. Folhas e cascas de M. foetidus também apresentaram CIM semelhantes para a FCL, FAE e FR. A FH das folhas apresentou CIM de 125 ?g.mL para S. aureus e K. pneumoniae. Os extratos e frações de A. extraaxillaris e FAE de M. foetidus também inibiram a divisão celular quando testadas na regeneração cefálica de D. tigrina, e a atividade larvicida frente à A. aegipty também foi observada, com inibição acentuada da tripsina e quimiotripsina. Os óleos voláteis e FAE de M. foetidus apresentaram 100% de mortalidade para a concentração de 100?g.m, e uma menor síntese de tripsina quimiotripsina e acetilcolinesterase foram observadas. As larvas também espessamento da membrana peritrófica e diminuição do tecido epitelial. Os resultados indicam que ambas as espécies possuem alto potencial biológico, sujerindo seu emprego na área farmacêutica e agronômica. Palavras-chave: Mentol do campo; pau- alho, flavonóides, potencial pesticida, alelopatia.Abstract: Due to the importance of biological and phytochemical research, associated to the plant richness in the Pantanal region, located at the Mato Grosso do Sul state, studies related to phytochemical prospecting and biological activities, of the crude ethanolic extract (EEB) and the hexanic (FH), chlorophorm (FCL), ethyl acetate (FAE) and remaining (FR) fractions from Asemeia extraaxillaris and different morphological portions of Microlobius foetidus (leaves, barks, fruits and seeds) were performed; by allelopathic, antiproliferative, antineoplastic, antimicrobial, antioxidant, toxic and larvicide activity assays. Regarding allelopathic activity, A. extraaxillaris presented an allelopathic potential, by the leachate method, in laboratory as well as greenhouse, and the root powder was the one which most affected the germination (26% of inhibition), early growth (54.3% of inhibition) both in the laboratory and in the greenhouse, inhibiting root (50%) and stem (56%) growth. Fruits and seeds from M. foetidus showed inhibition of the root (57%) and stem (55%), when treated with the fruit powder. Both species showed antioxidant potential by the tested methods, with better results obtained from M. foetidus when compared to A. extraaxillaris. Plants that were cultivated in greenhouses showed alterations in their anatomy after 30 days. The cortical epidermal thickness, vascular cylinder diameter, and total diameter was lower in plants treated with FH and FAE of A. extraaxillaris, and similar effects were observed for the FAE from fruits of M. foetidus. The antineoplastic action of the extracts and fractions was also verified in both investigated species. The FAE of A. extraaxillaris presented an IC50 of 7.5 ?g.mL-1 in the NCI-ADR/RES lineage (Ovary cancer with phenotype for multidrug resistance) and of 8.5 ?g.mL-1 for the 786-0 lineage (Kidney cancer). Similarly to what was observed in A. extraaxillaris, the different morphological portions of M. foetidus also demonstrated antineoplastic activity, with an IC50 of 6.4 ?g.mL-1 for NCI-ADR/RES, of 8.3 ?g.mL-1 for the OVAR3 lineage (ovary) and 2.1 ?g.mL for K562 (leukemia). These data corroborate those obtained in the protection against the effects of the herbicide atrazine in the A. cepa model, as the use of this herbicide can lead to the formation of cancer cells. Antimicrobial action was observed as well. The FH and FCL of A. extraaxillaris presented a MIC (minimum inhibitory concentration) of 250 ?g.mL-1 for S. aureus, S. epidermidis, S. saprophyticus, E. coli, P. aeruginosa and K. pneumoniae, C. albicans, C. tropicalis, S. cerevisae e C. neoformans. Leaves and barks from M. foetidus also showed MIC values similar to FCL, FAE and FR. The FH of the leaves showed a MIC of 125 ?g.mL-1 for S. aureus and K. pneumoniae.The extracts and fractions of A. extraaxillaris and FAE of M. foetidus also inhibited cellular division when tested in the cephalic regeneration of D. tigrina, and larvicide activity upon A. aegipty was also observed, with a pronounced inhibition of trypsine and chemotrypsine. The volatile oils and FAE of M. foetidus showed 100% mortality for the concentration of 100 ?g.mL, and a lower trypsine, chemotrypsine and acetylcholine synthesis was observed. The larvae showed of peritrophic membrane and decreasing of epithelial tissue. The results indicate that both species have high biological potential, suggesting their use in the pharmaceutical and agronomic areas. Key words: Mentol do campo; pau-alho, flavonoids, pesticide potential, allelopathy