Determination of Sapium discolor seed oil estolides and triacylglycerines: comparison of the substances separation by conventional and microcolumn (Milichrome A-02) chromatography
Methods for the separation and UV detection of Sapium discolor seed oil estolides and triacylglycerols by traditional analytical as well as by microcolumn reversed-phase high-performance liquid chromatography approaches were developed. For the separation, the columns filled with Kromasil 100-5C18 sorbent were used together with the "propanol-2 - acteonitrile" mobile phase systems. The oil composition was calculated on the basis of the incremental approach. The propositions were confirmed by the mass-spectrometric and the electronic spectra data. The oil was shown to be composed of the traditional ?-linolenic, linoleic, oleic, palmitic and stearic acids, and two unusual acids that match the literature data about their structure. Due to the presence of the acid radical with the chromophore O=COR1-CH=CH-CH=CHR2 composition in all estolides, the sensitive and the selective detection of the compounds was possible at the wavelength of 266 nm. This method of detection was a good alternative to the detection at 210 nm, allowing the detection of not only the estolides but also the triacylglycerols, although with approximately threefold reduced sensitivity. The experiment indicated the reduction of the total efficiency (as a number of theoretical plates) in the swap of traditional by microcolumn HPLC, and the subsequent method was proposed to separate the unseparated peaks that occur during this exchange by using the Magicplot student 2.7.2 software. This was achieved with good performance results of the qualitative and quantitative determination of the relative amounts of estolides in the oil.Разработаны условия разделения и УФ-детектирования эстолидов (триацилглицерины с одним олигомерным радикалом кислоты) и триацилглицеринов масла семян Sapium discolor в условиях традиционной аналитической и микроколоночной обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. Для разделения использовали колонки, заполненные сорбентом Kromasil 100-5C18, и подвижные фазы системы «пропанол-2 - ацетонитрил». С использованием инкрементного подхода рассчитан и в дальнейшем подтвержден анализом электронных и масс-спектров видовой состав компонентов масла. Показано, что масло содержит радикалы традиционных ?-линоленовой, линолевой, олеиновой, пальмитиновой и стеариновой кислот и двух необычных, параметры которых удовлетворяют литературным данным об их строении. Благодаря присутствию во всех эстолидах радикала кислоты с хромофором состава O=COR1-CH=CH-CH=CHR2 возможно чувствительное селективное детектирование эстолидов при длине волны 266 нм. Этот способ детектирования является хорошим дополнением к детектированию при 210 нм, позволяющему обнаруживать не только эстолиды, но и триацилглицерины, хотя и примерно со втрое сниженной чувствительностью. Экспериментально оценено снижение суммарной эффективности (по числу теоретических тарелок) при переходе от колонок с диаметром 4-4.6 мм к микроколоночной ВЭЖХ и предложен способ разделения неразделенных пиков возникающих при этом за счет использования специальной программы Magicplot student 2.7.2, с хорошими характеристиками результатов определения относительных количеств эстолидных компонентов масла
