Il contributo, partendo dal principio europeo del benessere animale di cui all'articolo 13 del Trattato sul Funzionamento dell'Unione Europea, si occupa della direttiva n 63 del 2010 sulla protezione degli animali nella sperimentazione animale focalizzandosi sulle disposizioni della direttiva che prevedono l'obbligo di ricorrere a metodi alternativa alla sperimentazione animale, ove presenti. Tale obbligo ha comportato il superamento della equiordinazione dei principi delle tre R (replacement, reduction e refiniment) in quanto la verifica della possibilità della sostituzione (replacement) del metodo alternativo rispetto a quello che riduca il numero degli animali utilizzati nella ricerca o ne migliori le condizioni deve essere vagliato obbligatoriamente in via di autorizzazione del progetto da parte del Ministero della Salute